一、Effect of simulated ischemia-reperfusion on I_f in sinoatrial node cells and the intervention of KATP channel opener（论文文献综述）
刘宇[1]（2014）在《通阳活血方对受损兔窦房结细胞起搏电流电生理及信号转导机制研究》文中研究指明背景：流行病学调查表明,病态窦房结综合征（sick sinus syndrome,SSS,简称病窦）,是临床难治性的重大疑难心血管疾病,属慢性渐进性疾病,高发病率、高危险性已经引起人们的普遍关注。因此,病窦的治疗及研究成为亟待解决的医学疑难问题。SSS目前尚无根治措施,西医治疗以阿托品、肾上腺素、氨茶碱等药物提高心率为主,副作用大；安装及更换单腔起搏器大约为2.89万费用较贵,且存在严重的禁忌症和并发症。因此,寻求安全、有效、廉价的治疗方法成为一种迫切需要。窦房结是心脏自律性的发源地,其起搏功能的正常对维持心脏正常的泵血功能尤为重要。早在上个世纪50年代,细胞膜兴奋理论认为,细胞膜离子通道的综合作用是心脏起搏的主要机制（membrane clock,膜钟）,其中包括超极化激活的起搏电流（If）、内向整流钾电流（IK1）、SCN5A编码的钠电流（INa）、钙电流（ICa）等。窦房结细胞（SNC）超极化激活环核苷酸门控（HCN）通道（hyperpolarization-activated current,简称If通道）在维持SNC自律性方面具有举足轻重的作用,SSS的产生与SNC结构的破坏、活性和自律性的降低直接相关近年研究表明,大多数学者认为SSS临床表现以本虚标实为主,本虚以气虚、阳虚多见,提出从整体入手,通过多环节、多靶点缓解病情,提高患者生存率、改善生存质量。中国中医科学院广安门医院刘志明老中医临证70余年经验认为SSS的临证以阳虚血瘀为主,故提炼治疗SSS有效方剂—通阳活血方（THR）,为原创经验方。前期对该方进行了多中心临床研究表明该方治疗病窦疗效确切、安全性好；基础实验研究表明该方通过多靶点、多途径起作用。因此,深入挖掘名老中医治疗病窦的宝贵经验,探讨修复受损窦房结结构和功能的电生理机制,具有重要的临床意义和应用价值。目的：在以往用于细胞研究的乳兔窦房结细胞（SNC）分离方法基础上进行改良,成功分离、培养出适用于全细胞膜片钳技术的乳兔SNC,进一步探讨THR含药血清、中药原液以及主要有效成分对乳兔缺血再灌SNC动作电位（AP）相关参数、起搏电流的影响和信号转导机制,以揭示THR治疗SSS的细胞电生理机制,为名老中医经验方治疗病窦提供科学依据,为传承名老中医经验提供借鉴。方法：1.将采用“双酶解+差速贴壁”法分离的乳兔SNC分为正常组、模型组、100、200、300μl通阳活血含药血清组及100μl空白血清组,除正常组,其余各组细胞均模拟缺血-再灌注（I-R）法制备乳兔SNC损伤模型,并利用全细胞膜片钳技术观察空白血清及通阳活血方含药血清对各组SNC自发性搏动频率、作电位时程APD20、APD50、APD90、最大舒张电位（MDP）、动作电位幅值（APA）的影响。2.将采用“双酶解+差速贴壁”法分离的乳兔SNC分为正常组、模型组、100、200、300μl含药血清组及通阳活血中药原液组,除正常组,其余各组细胞模拟I-R法制备SNC损伤模型,并利用全细胞膜片钳技术观察THR中药原液及含药血清对各组SNC超极化环核苷酸门控阳离子通道电流起搏电流（If）电流-电压曲线及相关门控机制的影响。3.将采用“双酶解+差速贴壁”法分离的乳兔SNC分为正常组、模型组、100μmol/L、200μmol/L、400μmol/L人参Rb1、黄芪甲苷,除正常组,其余各组细胞模拟I-R法制备SNC损伤模型,并利用全细胞膜片钳技术观察人参Rb1、黄芪甲苷对各组SNC超极化环核苷酸门控阳离子通道电流起搏电流（If）电流-电压曲线及相关门控机制的影响。4.将采用“双酶解+差速贴壁”法分离的乳兔SNC分为正常组、模型组、1μmol/L激动剂Forskolin和100μmol/L选择性抑制剂H89,除正常组,其余各组细胞模拟I-R法制备SNC损伤模型,并利用全细胞膜片钳技术观察Forskolin、H89高中低剂量对各组SNC超极化环核苷酸门控阳离子通道电流起搏电流（If）电流-电压曲线及相关门控机制的影响。结果：1.“双酶解+差速贴壁”差速贴壁5d后细胞主要呈3种形态：梭形、蜘蛛形与多边形,梭形细胞数目最多（61.5±6.8）,搏动频率快,（136±12）次/min；蜘蛛形细胞胞体较大,多伸有伪足,搏动频率较梭形细胞慢（106±9）次/min；少量多边形细胞体积较大、少伪足且无搏动,细胞平坦、胞浆清亮。2.与正常组比较,模拟I-R造模后SNC的APD20由正常（25.7±4.8）ms延长至（82.6±5.3）ms,具有显着统计学差异（P<0.05）,于造模后细胞外液分别加入100、200、300μl通阳活血方含药血清后,APD20分别缩短至（42.7±6.7）ms.（53.3±6.5）ms.（41.5±6.4）ms,差别均具有统计学意义（P<0.05）,三个含药血清组之间比较则无统计学差异。与正常组比较,模拟I-R造模后SNC的APD5o由正常（78.79±5.3）ms延长至（152.5±5.6）ms,具有极显着统计学差异（P<0.01）,于造模后细胞外液分别加入100、200、300μl通阳活血方含药血清后,APD5o分别缩短至（98.2±6.4）ms.（123.9±4.9）ms.（114.2±4.9）ms,差别均具有统计学意义（P<0.01）,其中100μl含药血清组缩短比200、300μl含药血清组更明显（P<0.05）,但200lμl和300μl含药血清组比较无统计学意义。与正常组比较,模拟I-R造模后SNC的APD90虽有延长,但无统计学意义（P>0.05）。于造模后细胞外液分别加入100、200、300μ1通阳活血方含药血清后,APD90的改变无统计学意义（P>0.05）。3.与正常组比较,模拟I/R造模后SNC的MDP由正常的（-65.6±4.8）mV变为（-53.9±5.8）mV,APA则由正常的（85.2+3.8）mV降低至（73.7±4.9）mV,均具有显着性统计学差异（P<0.01）。分别加入100、200、300μl通阳活血方含药血清后,各组MDP值无明显改变（P>0.05）,100μl和300μl含药血清分别使APA升高至（84.3+4.8）mV和（83.4±6.3）mV,具有显着性统计学差异（P<0.01）,但两组间比较无统计学意义：与模型组比较,200μl含药血清对APA虽有升高,但无统计学差异。与模型组比较,100μl空白血清组MDP及APA均无明显改变（P>0.05）4.正常组窦房结细胞If峰值电流密度为（-43.48±1.08）pA/pF,模拟I/R后SNCIf峰值电流密度降至（-19.64±2.14）pA/pF,具有极显着性差异（P<0.01）分别加入100、200、300μl通阳活血方含药血清后If峰值电流密度有不同程度的增大,分别升高至（-94.90±0.66）pA/pF、（-115.37±1.62）pA/pF、（-122.54±1.11）pA/pF（P<0.01）.空白血清组与模型组比较,If峰值电流密度无明显变化。分别于正常细胞外液加入100μl通阳活血方含药血清及空白血清后,含药血清组If峰值电流密度较正常组有所升高（P<0.05）,空白血清组则无明显变化。模拟I/R后SNC在分别加入100、200、300μl通阳活血方原液后,If峰值电流密度亦有不同程度的增大,分别升高至（-60.27±1.47） pA/pF、（-69.70±1.67） pA/pF、（-76.03±1.59） pA/pF （P<0.01）。分别于正常细胞外液加入100μl通阳活血方中药原液后,If峰值电流密度有所升高（P<0.01）。5.正常组窦房结细胞If峰值电流密度为（-43.48±1.08） pA/pF,模拟I/R后SNC If峰值电流密度降至（-19.64±2.14）pA/pF,具有极显着性差异（P<0.01）。加入100、200、400μmol/L人参Rb1后,If峰值电流密度有不同程度的增大,分别升高至（-22.99±1.75）pA/pF（P<0.05）、（-24.39±2.38） pA/pF、（-40.55±1.33）pA/pF（P<0.01）。分别于正常细胞外液加入100μmol/L人参Rb1, If峰值电流密度较正常组有所升高,但无统计学意义（P>0.05）。模拟I/R后SNC在分别加入100、200、400μmol/L黄芪甲苷后,If峰值电流密度亦有不同程度的增大,分别升高至（-30.43±1.98） pA/pF、（-34.83±1.6） pA/pF、（-52.72±1.7） pA/pF （P<0.01）。分别于正常细胞外液加入100μmol/L黄芪甲苷后,If峰值电流密度有所升高（P<0.05）6.正常组窦房结细胞If峰值电流密度为（-43.48±1.08） pA/pF,模拟I/R后SNC If峰值电流密度降至（-19.64±2.14） pA/pF,具有极显着性差异（P<0.01）。参照文献,在浴液中加入10μmol/LH89后,If峰值电流密度有不同程度的减小,下降至（-11.56±2.34） pA/pF （P<0.01）。后于浴液中分别加入100μl的含药血清和中药原液,If峰值电流密度有不同程度的升高,分别升高至（-12.45±2.16） pA/pF （P>0.05）、（-11.84±1.75） pA/pF （P>0.05）。在浴液中加入1μmol/L Forskolin后,If峰值电流密度有不同程度的上升至（-25.82±1.53）pA/pF （P<0.05）。后于浴液中分别加入100μl的含药血清和中药原液,If峰值电流密度有不同程度的升高,分别升高至（-61.03±2.48） pA/pF （P<0.01）（-51.60±2.47） pA/pF （P<0.01）结论：1.通阳活血方含药血清可加快乳兔受损SNC自发性搏动频率,缩短作电位时程APD20、APD50,增大乳兔受损SNC的APA,同时可保护乳兔受损SNC形态结构,从而提高心率,2.通阳活血方含药血清及中药原液能电压依赖性增大受损乳兔SNC的If电流密度,加快If通道稳态激活,恢复降低的If电流密度,以缩短SNC动作电位的舒张去极,从而提高其自律性。3.人参Rb1、黄芪甲苷可电压依赖性增大受损乳兔SNC的If电流密度,加快If通道稳态激活,恢复降低的If电流密度,以缩短SNC动作电位的舒张去极。4.通阳活血方含药血清及中药原液作用于If受PKA信号转导的影响。5.通阳活血方可能是通过上述机制增强SNC If以缩短动作电位时程,改善SNC起搏功能,从而加快心率。
陈婵娟[2]（2014）在《基于心肌mitoKATP通道龙牙楤木总皂苷对大鼠缺血再灌注心脏的作用及机制研究》文中研究说明研究背景及目的冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary atherosclerotic heart disease, CHD）是冠状动脉粥样硬化导致冠状动脉血管管腔狭窄,或者动脉粥样硬化斑块阻塞冠脉,或（和）因冠状动脉痉挛等功能性改变导致心肌缺血缺氧或坏死而引起的心脏病,是严重危害人类健康的常见病。心肌梗死（myocardial infarction, MI）是指心肌缺血性坏死,是在冠状动脉病变的基础上发生的冠状动脉血供急剧减少或中断,导致相应心肌严重而持久急性缺血出现心肌坏死；是冠心病急性冠脉综合征严重类型。本病病死率高,我国本病发病率也在逐年增多。近年来,溶栓、经皮冠状动脉介入治疗（percutaneous coronary intervention, PCI）.主动脉-冠状动脉旁路移植术（coronary artery bypass grafting, CABG）得到广泛应用,使闭塞的冠状动脉再通,缺血缺氧的心肌得到血液再灌注,濒临坏死的心肌细胞得以存活,缩小梗死面积,减轻心肌重塑,改善了患者预后,挽救了许多急性心肌梗死患者的生命。然而研究发现缺血后再灌注有时不仅不能改善病情,反而加重功能结构损伤。这种在缺血基础上恢复血流后组织损伤反而加重,甚至发生不可逆损伤的现象称为缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion injury, IR）.如何做到既尽早恢复缺血组织血流,又不发生再灌注损伤,是缺血性疾病防治中亟待解决的重要课题。龙牙楤木为五加科楤木属植物,主要分布于我国东北地区,资源丰富；其根茎皮叶性平味辛有小毒,具有祛风除湿,健胃利水,活血止痛,补气安神,强精滋肾之功效。现代研究表明龙牙楤木总皂苷（Aralsides, Ar）具有抗氧化、抗心肌缺血、保护心肌作用。已有研究证明龙牙惚木提取物通过提高抗氧化酶活性,减少自由基的生成,稳定线粒体内游离Ca2+浓度对线粒体产生保护作用。龙牙楤木总皂苷的心肌保护作用机制则可能是通过增加SOD的活力,对抗氧自由基对心肌细胞的毒害作用,从而减轻心肌细胞的损伤。综上,龙牙楤木总皂苷通过增强细胞抗氧化作用,减少自由基及脂质过氧化物导致的细胞膜损伤等机制起到保护心肌缺血再灌注损伤的作用。与研究其他中药抗心肌缺血再灌注损伤机理寻找多个作用靶点一样,我们也需要通过研究龙牙楤木总皂苷对缺血再灌注心肌的保护作理,明确是否龙牙楤木总皂苷的作用机制也存在多个作用靶点。线粒体是细胞氧化磷酸化反应发生的重要场所,参与自由基生成、钙超载等环节,在心肌缺血再灌注损伤中,线粒体结构和功能都会受到不同程度的损伤。近年来研究发现,线粒体内膜上存在三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitoKATP）,对生物膜的稳定性、线粒体及心肌细胞的功能起着非常重要的作用,开放ATP敏感性钾通道具有保护缺血再灌注心肌的作用,因此心肌细胞线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitochondria ATP-sensiive potassium, mitoKATP）是心肌缺血再灌注损伤的重要治疗靶点。本课题旨在探讨龙牙楤木总皂苷对心肌细胞线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道（mitoKATP）是否具有正性作用,进而提出假说：龙牙楤木总皂苷通过开放线粒体敏感性钾通道,调节线粒体膜电位、减少线粒体形态、结构和功能的损伤,促进线粒体呼吸功能的恢复,减少ATP的水解,进而促进能量物质的合成,稳定心肌细胞细胞膜,减轻心肌缺血再灌注损伤。本论文分文献综述和实验研究两部分。文献综述部分包括Langendroff离体心脏逆行灌流方法的沿革及应用、与mitoKATP通道相关的心血管离子通道药理学研究、冠心病的中医药临床治疗和研究进展和龙牙楤木总皂苷药物化学成分和药理学研究进展四部分。Langendroff离体心脏逆行灌流方法是本实验的基础造模方法,综述一从离体心脏灌流的发明、逆行灌流的原理、原则、恒压恒流两种不同的灌流模式、实验必要条件、生理学参数的测量、可能出现的误区、实验的设计与特殊应用等方面,全面回顾了该方法的规范化流程、优缺点及使用注意事项。综述二从电生理学的发展沿革、离子通道的概念、生理结构、生理特征、分类、药物作用于离子通道的作用机理、KATP的分类、分布、生理学作用、药理学特点、相关疾病等方面系统总结了与KATP通道相关的心血管离子通道药理学研究。综述三回顾了传统中医学对冠心病、心肌缺血再灌注损伤病因病机、辨证论治的认识过程,总结了中西医结合医学对冠心病、心肌缺血再灌注损伤诊断和治疗的研究进展,概述了中药复方、单味中药、中药提取单体对心肌缺血再灌注损伤的作用研究进展,提示中医药对心肌缺血再灌注损伤的防治具有良好的应用前景。综述四是龙牙楤木总皂苷药物化学成分和药理学研究进展。实验研究部分目的：（1）探索大鼠急性心肌梗死模型缺血再灌注损伤心肌保护问题；明确心肌细胞线粒体ATP敏感性钾通道与缺血再灌注损伤的关系；（2）观察龙牙楤木总皂苷对心肌细胞线粒体ATP敏感性钾通道的开放作用；（3）阐明龙牙楤木总皂苷抗心肌细胞缺血再灌注损伤的机制。方法：使用Langendroff离体心脏逆行灌流系统建立大鼠离体心脏灌流模型,对照组（假手术组）以K-H液行常规恒压持续平衡灌注125min；同对照组平衡20min后模型组结扎冠状动脉左前降支靠近分支处停灌（缺血）30min后K-H液复灌（再灌注）75min；二氮嗪（Diazoxide, DZ）组处理同模型组,复灌时以含50umol/LDZ的改良K-H液复灌75min；龙牙楤木总皂苷组处理同模型组,复灌时以含5mg/L龙牙楤木总皂苷的改良K-H液复灌75min；5-羟基癸酸组（5-hydroxydecanoate,5-HD）处理同模型组,复灌时以含100umol/L的5-HD的改良K-H液复灌75min;5-HD加龙牙穗木总皂苷组处理同模型组,复灌时先行给予100umol/L的5-HD的改良K-H液复灌15min,再以含50mg/ml龙牙楤木总皂苷的改良K-H液复灌60min。伊文思蓝、TTC染色观察心肌梗死、缺血面积；记录左心室压力及心率变化过程,比较各组平衡20min、局部缺血30min、再灌15min、再灌30min、再灌75min的血流动力学指标及灌流液中肌酸激酶（creatine kinase, CK）和乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）漏出量。各组经以上处理后,分别切取心尖部心肌2块,分别用以制备透射电镜标本观察心肌超微结构和心肌细胞线粒体超微结构、提取线粒体用罗丹明-123（Rhodamine123, R-123）染色以流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果：益气活血中药提取物龙牙楤木总皂苷与mitoKATP开放剂DZ有类同的作用,可以减少大鼠心肌缺血再灌注损伤过程中心肌酶、乳酸脱氢酶的释放、改善血流动力学、改善心律、保护心肌细胞和心肌细胞线粒体的结构和功能,维持缺血再灌注损伤过程中心肌细胞线粒体的膜电位。而一些作用大部分可被mitoKATP阻滞剂5-HD解除。结论：龙牙楤木总皂苷可以增强再灌注过程中心脏舒缩功能,减少心肌细胞心肌酶的漏出,保护心肌纤维、心肌细胞和线粒体的结构形态,稳定线粒体膜电位,保护线粒体的功能；这些作用都与mitoKATP通道开放剂DZ类同,且都可被mitoKATP通道阻滞剂5-HD取消,可以认为是通过mitoKATP通道起作用的。
薄冰[3]（2012）在《力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道的影响》文中研究说明长期高强度运动训练可引发运动员心脏窦房结（sinoatrial node, SAN）的多种功能障碍，包括窦性心动过缓、窦性心律不齐、病态窦房结综合征等，在运动比赛中可导致猝死风险的增加。SAN起搏活动与细胞膜上多种离子通道有关，包括：HCN、L-Ca2+、T-Ca2+、IKr、IKs、IKATP等，而SAN功能障碍与其细胞膜上离子通道的改变密切相关。运动医学领域对于运动训练诱发SAN功能障碍的发生机制尤其是电生理学及分子生物学机制鲜见报道，因此，本研究即以SAN细胞膜上离子通道的电生理活动（第一部分力竭运动对大鼠SAN起搏活动相关离子通道电流的影响）和结构组成（第二部分力竭运动对大鼠SAN相关离子通道亚基mRNA和蛋白质表达的影响）为切入点，着力探讨力竭运动状态下，心脏SAN细胞起搏活动相关离子通道电生理学和基因水平的改变，揭示运动引发SAN功能障碍发生的离子通道机制，为进一步探索SAN细胞离子通道的功能调节和信号转导机制、运动性心律失常的预防措施及临床治疗等奠定理论和实验基础。第一部分力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道电流的影响研究目的：探讨两周力竭运动对大鼠SAN细胞HCN通道、L-Ca2+通道、T-Ca2+通道、快激活整流K+通道、慢激活整流K+通道、ATP敏感型K+通道If、ICa,L、ICa,T、IKr、IKs、IKATP电流的影响。实验分组：将180只健康雄性SD大鼠随机分为9组，每组20只，包括安静对照组（C组）、一次力竭组（O组）、反复力竭组（R组），各组大鼠分别于运动后即刻（0h）、4小时（4h）、12小时（12h）、24小时（24h）不同时相取材，一次力竭运动各组大鼠分别以O-0h、O-4h、O-12h、O-24h命名，反复力竭运动各组大鼠分别以R-0h、R-4h、R-12h、R-24h命名，以观察运动结束后SAN细胞膜上离子通道If、ICa,L、ICa,T、IKr、IKs、IKATP电流密度变化与时间的关系。动物模型建立：安静对照组不施加任何运动影响，反复力竭各组大鼠尾部负重为体重的3%，每天1次，每周6天游泳训练，每次运动时间控制在2小时左右，共运动2周；一次力竭运动各组大鼠正常喂养两周后，进行一次性力竭游泳运动，运动方案同反复力竭组。模型建立完成后，测量大鼠心电图及相关血液学指标以判断模型建立效果。研究方法：1.大鼠SAN细胞急性分离：采用Langendorff灌流及酶消化法急性分离大鼠SAN细胞。2.全细胞膜片钳记录SAN细胞各通道电流：应用全细胞膜片钳技术分别记录各组SAN细胞膜上If、ICa,L、ICa,T、IKr、IKs、IKATP共6个通道电流密度的变化。3.数据统计：全细胞膜片钳实验结果以通道电流密度数值表示，电流密度为电流强度与膜电容的比值（pA/pF），其中电流强度为实验所测量电流峰值，膜电容为实验中记录到的单个细胞电容值。实验结果中各通道电流密度以均数±标准差（x±S）表示，数据采用SPSS13.0软件及EXCEL软件中单因素方差分析（ANOVA），各实验组与对照组之间的显着性差异采用SNK法，P＜0.05为显着性差异，P＜0.01为非常显着性差异。研究结果：1.力竭运动对大鼠心电图和相关血液学指标的影响：心电图指标结果：反复力竭运动后，心电图显示窦性心动过缓发生率为20%；窦性心律不齐发生率为2.5%，ST-T出现明显升高，心肌缺血的发生率为5%。血液学指标：一次力竭运动及反复力竭运动后大鼠肌红蛋白、血清肌钙蛋白I和肌钙蛋白T出现不同程度升高，表明心肌出现微损伤。2.力竭运动对大鼠SAN细胞If电流的影响：与对照组-29.11±2.63pA/pF相比，一次力竭运动对于大鼠窦房结HCN通道If电流密度无明显影响，反复力竭各时相组If电流密度显着下降（P<0.01）。这一结果可能导致SAN细胞舒张期自动去极化的负性变时效应，从而引起SAN细胞起搏活动的减慢。3.力竭运动对大鼠SAN细胞ICa,L电流的影响：对照组SAN细胞ICa,L电流密度为-7.78±0.76pA/pF，一次力竭运动各时相组无明显变化，反复力竭即刻组R-0h电流密度为-6.19±0.38pA/pF，较对照组及一次力竭各组显着下降（P<0.05），反复力竭其它时相组的电流密度均下降，分别为-6.26±0.06pA/pF、-6.22±0.95pA/pF和-6.33±0.68pA/pF，低于对照组及一次力竭O-0h组（P<0.05，P<0.05，P<0.05）。4.力竭运动对大鼠SAN细胞ICa,T电流的影响：与对照组ICa,T电流密度为-11.23±0.79pA/pF相比，一次力竭运动各时相组电流密度无明显变化，反复力竭即刻组R-0h电流密度为-6.89±1.42pA/pF，较对照组及一次力竭各组下降，且具有显着性差异（P<0.01），反复力竭其它时相组的电流密度均下降，分别为-6.62±0.42pA/pF、-7.02±0.84pA/pF和-6.58±0.56pA/pF，与对照组及一次力竭各组相比，均具有显着性差异（P<0.01，P<0.01，P<0.01）。5.力竭运动对大鼠SAN细胞IKr电流的影响：与对照组大鼠SAN细胞IKr电流密度为1.73±0.04pA/pF相比，一次力竭运动各时相组电流密度无明显变化，反复力竭即刻组R-0h电流密度为0.93±0.05pA/pF，较对照组及一次力竭各组下降，且具有显着性差异（P<0.01），反复力竭其它时相组的电流密度均下降，分别为0.89±0.17pA/pF、0.96±0.03pA/pF和0.92±0.29pA/pF，与对照组及一次力竭各组相比，均具有显着性差异（P<0.01，P<0.01，P<0.01）。6.力竭运动对大鼠SAN细胞IKATP电流的影响：与对照组1.02±0.07pA/pF相比，一次力竭运动可引起大鼠窦房结KATP通道IKATP电流密度增加，但无统计学意义；反复力竭各时相组IKATP电流密度为3.77±0.05pA/pF（P<0.01），并明显高于一次力竭O-0h组（P<0.01），但反复力竭组中随着取材时间的延长，电流密度呈下降趋势，24h内仍未达到对照组水平。研究结论：1.两周反复力竭运动可导致心脏SAN细胞If，ICa,L、ICa,T、IKr电流密度减少，IKATP电流密度增加，上述5种离子通道出现变化的综合效应可导致窦房结自律性、兴奋性及传导性等功能活动异常，致使运动员窦性心动过缓、窦性心律失常、病态窦房结综合症等结内病理变化的发生率增加。2.长期大强度反复运动训练对于心脏窦房结起搏活动的影响可进而引发异位起搏点出现，如房性心律、心房颤动、心房扑动及室性心律失常等心脏电兴奋产生异常，还可能导致房室传导阻滞、房室分离等电兴奋传导障碍。由此可见，运动训练对于窦房结起搏活动相关离子通道电生理学的影响可能是运动性心律失常的主要发生机制之一。第二部分力竭运动对大鼠窦房结离子通道亚基mRNA及蛋白质表达的影响研究目的：探讨两周力竭运动对大鼠SAN细胞膜上HCN通道亚基HCN1、HCN2、HCN4，L-Ca2+通道亚基Cav1.2、Cav1.3，T-Ca2+通道亚基Cav3.1、Cav3.2，延迟整流K+通道亚基ERG、KvLQT1，ATP敏感型钾离子通道亚基Kir6.2共10个亚基mRNA和蛋白质表达的影响。实验分组及动物模型建立：同第一部分。研究方法：1.应用实时荧光定量PCR法测定各组大鼠SAN组织HCN1、HCN2、HCN4、Cav1.2、Cav1.3、Cav3.1、Cav3.2、ERG、KvLQT1、Kir6.2mRNA表达水平。2.应用Western blot法测定各组大鼠SAN组织HCN1、HCN2、HCN4、Cav1.2、Cav1.3、Cav3.1、Cav3.2、ERG、KvLQT1、Kir6.2蛋白质表达水平。3.数据统计：实验结果以均数±标准差（x±S）表示，数据采用SPSS13.0软件及EXCEL软件中单因素方差分析（ANOVA），各实验组与对照组之间的显着性差异采用SNK法，P＜0.05为显着性差异，P＜0.01为非常显着性差异。研究结果：1.力竭运动对大鼠SAN HCN通道亚基mRNA及蛋白质表达的影响：（1）mRNA水平：与对照组相比，一次力竭组中的O-0h组HCN1、HCN4mRNA相对表达量明显升高（P<0.05，P<0.01），O-4h组HCN1、HCN4明显升高（P<0.01，P<0.05）；反复力竭组R-0h与R-4h组HCN1明显下降（P<0.01，P<0.01）；反复力竭各组HCN2、HCN4mRNA表达明显下降（P<0.01）。（2）蛋白质水平：与对照组相比，反复力竭各组HCN1蛋白质表达无明显变化，HCN2、HCN4蛋白质表达明显下降（P<0.01）。2.力竭运动对大鼠SAN L-Ca2+通道亚基mRNA及蛋白质表达的影响：（1）mRNA水平：各组Cav1.2mRNA表达无明显变化；与对照组相比，O-0h、O-4h、O-12h组Cav1.3mRNA相对表达量升高（P<0.05、P<0.05、P<0.05）；反复力竭各时相组Cav1.3mRNA相对表达量下降（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）。（2）蛋白质水平：各组Cav1.2蛋白质表达无明显变化；与对照组及一次力竭O-0h组相比，反复力竭各时相组Cav1.3标准灰度值下降（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）。3.力竭运动对大鼠SAN T-Ca2+通道亚基mRNA及蛋白质表达的影响：（1）mRNA水平：与对照组相比，O-0h、O-4h、O-12h组Cav3.1mRNA相对表达量升高（P<0.05、P<0.05、P<0.05）；反复力竭各时相组Cav3.1mRNA相对表达量下降（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）；各组Cav3.2mRNA表达无明显变化。（2）蛋白质水平：与对照组及一次力竭O-0h组相比，反复力竭各时相组Cav1.3标准灰度值下降（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）；各组Cav3.2蛋白质表达无明显变化。4.力竭运动对大鼠SAN IKr通道亚基mRNA及蛋白质表达的影响:（1）mRNA水平：与对照组相比，反复力竭各时相组ERG mRNA相对表达量下降（P<0.05，P<0.05，P<0.05，P<0.05）。（2）蛋白质水平：与对照组及一次力竭O-0h组相比，反复力竭各时相组ERG标准灰度值下降（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）。5.力竭运动对大鼠SAN IKs通道亚基mRNA及蛋白质表达无影响。6.力竭运动对大鼠SAN ATP敏感型K+通道亚基mRNA及蛋白质表达的影：（1）mRNA水平：与对照组相比，反复力竭各时相组Kir6.2mRNA相对表达量上调（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.05）。（2）蛋白质水平：与对照组及一次力竭O-0h组相比，反复力竭各时相组Kir6.2标准灰度值下降（P<0.01，P<0.01，P<0.01，P<0.01）。研究结论：两周反复力竭运动可引起大鼠窦房结HCN、L-Ca2+、T-Ca2+、快激活内向整流K+通道及ATP敏感型K+通道亚基mRNA及蛋白质表达的变化，长期大强度反复运动训练状态下，窦房结起搏活动相关离子通道组成亚基mRNA及蛋白质的表达与通道电流密度的变化趋势具有一致性，可见，离子通道亚基是通道电生理活动改变的主要结构因素及重要的分子学机制，因此，运动对于窦房结细胞离子通道功能状态的影响可能主要由通道亚基的改变介导。
张娜,陈富荣,章怡祎,刘萍[4]（2010）在《冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道的影响》文中研究说明目的观察中药复方冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾（ATP-sensitive potassium channel,KATP）通道的影响,进一步探讨冠心康保护心血管、抗心肌缺血可能的作用机制。方法随机选取Wistar大鼠分为正常组、模拟缺血再灌注损伤模型组、模型加格列苯脲组、模型加吡那地尔组、模型加冠心康组、模型加冠心康加格列苯脲组,每组8只。用无钙台式液灌流10 min,停灌30 min再灌注45 min模拟心肌缺血再灌注损伤模型。检测各组心肌细胞钙-镁-ATP（Ca2+-Mg2+-ATP）酶、钠-钾-ATP（Na+-K+-ATP）酶活性及全细胞膜片钳技术的电流电压钳模式记录各组心室肌细胞的ATP敏感钾通道（KATP通道）电流变化。结果在缺血的基础上,中药复方冠心康可使KATP通道进一步开放,通道电流明显增大,与KATP通道开放剂吡那地尔具有同等开放效应（P>0.05）。与模型组比较,冠心康组Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶含量明显增高（P<0.05）。结论中药复方冠心康对于心肌缺血再灌注损伤具有一定的干预作用,促进KATP通道开放,减轻Ca2+内流,抑制Ca2+超载可能是冠心康在心肌缺血过程中发挥干预作用的有效途径。
李东,王迪生[5]（2008）在《窦房结细胞电生理研究进展》文中研究说明
张德重[6]（2008）在《缺血后处理对家兔窦房结功能及细胞凋亡的影响》文中研究说明自从1986年Murry等提出心肌缺血预处理（ischemic preconditioning,IPC）这一概念后,作为一种内源性心脏防御作用受到临床医生的关注。近年来,有学者提出缺血后处理（ischemic postconditioning）的概念,即在全面恢复再灌注前短暂多次预再灌、停灌处理,其心肌保护效应与IPC相似,且比IPC更具有临床可操作性,因此具有更广泛的临床应用价值。缺血后处理能明显减轻再灌注损伤（reperfusion injury,RI）,即再灌注过程中组织细胞功能代谢障碍及结构破坏。大量的实验表明缺血后处理的保护作用普遍存在于不同种属的不同组织和器官中。其中有关心肌细胞的研究主要集中在普通心肌,本实验将目光转向心脏传导系统中电生理冲动形成、发起单位—窦房结（sinoatrial node,SAN）,从电生理功能和组织形态学两方面探讨缺血后处理对窦房结的保护作用。目的在家兔急性右冠状动脉缺血再灌注模型中,观察缺血预处理与缺血后处理对窦房结传导时间、窦房结恢复时间及窦房结细胞凋亡和Bcl-2、Bax基因蛋白表达的影响。方法采用在体家兔右冠状动脉缺血再灌注模型。选用健康家兔32只,雌雄不拘,随机分为对照组、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IPC组）、缺血后处理组,每组8只。在心肌缺血期及再灌注期不同时间点测定各组窦房结传导时间（sinoatrial node conduction time,SACT）、窦房结恢复时间（sinoatrial node recovery time,SNRT）。实验结束后剪取窦房结组织,采用原位末端标记法测定窦房结细胞凋亡数目,免疫组化检测Bcl-2基因蛋白和Bax基因蛋白的表达。结果1.窦房结功能测定与对照组比较,IR组、IPC组、缺血后处理组在心肌缺血期及再灌注期SACT、SNRT均显着延长（P<0.01）;IPC组在心肌缺血期及再灌注期SACT、SNRT较IR组均明显缩短（P<0.01）;缺血后处理组在心肌再灌注期SACT、SNRT较IR组明显缩短（P<0.01）;与IPC组比较,缺血后处理组心肌缺血期SACT、SNRT明显缩短（P<0.01）,而在心肌再灌注期两组SACT、SNRT无明显差异（P>0.05）。2.窦房结细胞凋亡和Bcl-2、Bax基因蛋白表达与对照组比较,IR组、IPC组、缺血后处理组窦房结细胞凋亡数目、Bcl-2和Bax基因蛋白表达均显着升高（P<0.01）;IPC组、缺血后处理组与IR组比较,窦房结细胞凋亡数目显着减少（P<0.01）,Bcl-2基因蛋白表达显着提高（P<0.01）,Bax基因蛋白表达显着降低（P<0.01）;IPC组与缺血后处理组比较,在窦房结细胞凋亡数目及Bcl-2、Bax基因蛋白表达均无显着性差异（P>0.05）。结论1.缺血后处理与缺血预处理对在体家兔窦房结电生理功能的恢复有益。2.缺血再灌注损伤可诱导窦房结细胞凋亡。3.缺血后处理、缺血预处理可通过提高Bcl-2基因蛋白表达同时下调Bax基因蛋白表达从而减少窦房结细胞凋亡。4.缺血后处理与缺血预处理对在体家兔窦房结均有保护作用。
谭双,刘如秀[7]（2008）在《窦房结缺血再灌注的细胞凋亡研究进展》文中进行了进一步梳理病态窦房结综合征是临床常见病,其发病机制目前尚不完全清楚。鉴于该病常伴随缺血性心脏病而出现,故窦房结缺血再灌注诱导细胞凋亡可能为其原因之一。在窦房结的发育、成熟过程中,凋亡不足可留下引发心律失常的基础,凋亡过度可引起病态窦房结综合征等病变。采用抑制窦房结病理性细胞凋亡的措施,可望为临床防治病态窦房结综合征提供新的方法。中药具有效果明显,副作用小的优点,如何利用中药来诱导机体产生内源性心脏保护作用是现代中医面临的一个崭新课题。
张倩,宋治远,仝识非,黄骥[8]（2006）在《线粒体KATP通道开放剂与缺氧预适应对乳鼠窦房结细胞起搏离子流作用的比较》文中研究说明目的:通过比较线粒体KATP通道开放剂及缺氧预适应（HP）对缺氧/复氧（H/R）乳鼠窦房结细胞起搏离子流（If）的作用,探讨HP对H/R时窦房结细胞电生理活动的保护机制。方法:取培养2 d的乳鼠窦房结细胞,随机分为①对照组;②H/R组;③HP组;④d iazoxide（线粒体KATP通道开放剂）+H/R组;⑤5-HD（线粒体KATP通道阻断剂）+HP组。以全细胞膜片钳技术检测If。结果:①H/R组各指令电压下的If密度显着高于对照组,激活曲线右移,半数最大激活电压由（-98.9±2.4）mV变为（-85.1±2.5）mV（P<0.01）;②HP及d iazoxide预处理能显着抑制I/R后升高的If密度,使激活曲线左移,半数最大激活电压分别为（-90.7±5.0）mV（P<0.01）及（-92.2±1.9）mV（P<0.01）;③5-HD预处理阻断HP效应,使If密度增加并使激活曲线右移,半数最大激活电压为（-86.3±2.7）mV（P<0.01）。结论:线粒体KATP通道开放剂预处理能模拟HP效应,对抗H/R对乳鼠窦房结细胞If的影响,有助于维护H/R时窦房结细胞电生理活动的相对稳定性。
张倩,仝识非,黄骥,宋治远[9]（2006）在《模拟缺血预适应对原代培养乳鼠窦房结细胞起搏离子流的影响》文中研究说明目的通过比较模拟缺血预适应（IP）及模拟/再灌注（I/R）对原代培养乳鼠窦房结细胞起搏离子流（IF）的影响,探讨IP对I/R时乳鼠窦房结细胞电生理活动的保护作用。方法取培养2D的乳鼠窦房结细胞,随机分为①对照组;②模拟I/R组;③模拟IP组。以全细胞膜片钳技术检测窦房结细胞IF的变化。结果①模拟I/R组各指令电压下的IF密度较对照组显着增高,激活曲线右移,半数最大激活电压由（-98.9±2.4）MV变为（-85.2±2.5）MV（P<0.01）。②模拟IP能显着降低I/R后的IF密度,使激活曲线左移,半数最大激活电压变为（-93.3±2.8）MV（P<0.01）,但未恢复到对照水平（P<0.05）。结论模拟IP可抑制模拟I/R后活化增强的IF,有助于维护I/R时窦房结细胞电生理活动的相对稳定性。
张倩,仝识非,宋治远[10]（2005）在《三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂对模拟缺血/再灌注乳鼠窦房结细胞内钙及L-型钙电流的影响》文中指出通过观察三磷酸腺苷敏感性钾通道（KATP）开放剂对模拟缺血/再灌注（I/R）时乳鼠窦房结细胞内Ca2+及ICaL的影响,探讨模拟缺血预适应（IP）对模拟I/R时窦房结细胞的保护机制。取培养2天的乳鼠窦房结细胞,随机分为①对照组;②模拟I/R组;③模拟IP组;④Diazoxide（线粒体KATP开放剂）+模拟I/R组;⑤5HD（线粒体KATP阻断剂）+模拟IP组。以免疫荧光技术标记细胞内Ca2+,通过激光共聚焦显微镜检测荧光强度变化;以全细胞膜片钳技术检测ICaL。结果:①Diazoxide预处理能模拟IP效应,显着降低I/R后窦房结细胞内Ca2+荧光强度（P<0.01）,增加相应电压下的ICaL电流密度,使电流电压曲线相对下移。②5HD预处理阻断了IP效应,其窦房结细胞内Ca2+荧光强度及ICaL电流密度与I/R组接近。结论:KATP开放剂预处理能模拟IP效应,减轻模拟I/R引起的窦房结细胞内Ca2+超载,改善受抑的ICaL。
二、Effect of simulated ischemia-reperfusion on I_f in sinoatrial node cells and the intervention of KATP channel opener（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Effect of simulated ischemia-reperfusion on I_f in sinoatrial node cells and the intervention of KATP channel opener（论文提纲范文）
（1）通阳活血方对受损兔窦房结细胞起搏电流电生理及信号转导机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 综述一 中医药治疗病态窦房结综合征的概况 |
| 1 病因病机研究 |
| 2 治则治法研究 |
| 3 古方运用 |
| 4 自拟中药制剂 |
| 5 讨论 |
| 综述二 HCN4基因与心脏节律的关系 |
| 1 超极化激活阳离子通道4基因的电生理特性 |
| 2 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4基因与心脏节律发生、病变及预后的关系 |
| 3 中药对超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4基因的作用 |
| 4 问题与展望 |
| 实验研究 |
| 实验一 通阳活血方含药血清及原液对受损乳兔窦房结细胞起搏电流的对比研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 人参Rb1、黄芪甲苷对起搏电流(I_f)的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 通阳活血方对受损乳兔窦房结细胞起搏电流影响信号转导机制研究 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简介 |
（2）基于心肌mitoKATP通道龙牙楤木总皂苷对大鼠缺血再灌注心脏的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词英汉对照 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一：Langendroff离体心脏逆行灌流方法的沿革及应用 |
| 参考文献 |
| 综述二：与mitoK_(ATP)通道相关的心血管离子通道药理学研究 |
| 参考文献 |
| 综述三：心肌缺血再灌注损伤的病机演变及中医治疗 |
| 参考文献 |
| 综述四：龙牙楤木总皂苷药物化学成分及药理学研究进展 |
| 参考文献 |
| 第二部分 实验研究 |
| 前言 |
| 实验一 动物模型的制备及功能评价 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验二 基于心肌mitoK_(ATP)通道龙牙楤木总皂苷对大鼠缺血再灌注损伤心脏功能的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 基于心肌mitoK_(ATP)通道龙牙楤木总皂苷对大鼠缺血再灌注心脏细胞线粒体结构和膜电位的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果及讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文名词缩略词表 |
| 前言 |
| 文献综述一 运动对窦房结结构及功能的影响研究进展 |
| 1 运动与窦房结功能异常 |
| 1.1 窦性心动过缓 |
| 1.2 窦性心律不齐 |
| 1.3 病态窦房结综合征 |
| 1.4 房室交界区性逸搏 |
| 2 不同运动项目对窦房结功能变化的影响 |
| 3 运动导致窦房结功能异常的原因分析 |
| 4 结语 |
| 文献综述二 窦房结起搏活动相关离子通道研究进展 |
| 1 窦房结的位置和结构 |
| 1.1 窦房结的位置 |
| 1.2 窦房结的组成结构 |
| 1.3 窦房结细胞特性 |
| 1.4 心脏首要起搏点 |
| 2 窦房结起搏活动相关离子通道 |
| 3 窦房结起搏活动相关离子通道在自律性活动中的作用 |
| 3.1 Funny 电流与超级化激活环核苷酸门控通道 |
| 3.2 钙离子通道 |
| 3.3 延迟整流钾离子通道 |
| 3.4 内向整流钾离子通道 |
| 4 窦房结功能障碍 |
| 4.1 遗传性窦房结功能障碍 |
| 4.2 年龄与窦房结功能障碍 |
| 4.3 心力衰竭与窦房结功能障碍 |
| 4.4 心肌缺血与窦房结功能障碍 |
| 5 小结与展望 |
| 第一部分 力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道电流的影响 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 研究技术路线 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 1.5 主要试剂及其来源 |
| 1.6 主要实验试剂配制方法 |
| 1.7 动物模型建立 |
| 1.8 研究方法 |
| 1.9 统计学处理 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 各组间大鼠初始体重比较 |
| 2.2 各组大鼠心脏形态肉眼观察 |
| 2.3 各组大鼠心系数的变化 |
| 2.4 各组大鼠心电图变化特点 |
| 2.5 各组大鼠血液学指标检测 |
| 2.6 大鼠窦房结细胞鉴定 |
| 2.7 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_f电流的影响 |
| 2.8 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Ca,L)电流的影响 |
| 2.9 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Ca,T)电流的影响 |
| 2.10 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Kr)电流的影响 |
| 2.11 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Ks)电流的影响 |
| 2.12 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(KATP)电流的影响 |
| 3 结果分析与讨论 |
| 3.1 研究方法选定与实验动物模型建立 |
| 3.2 不同强度运动对大鼠各项生理学指标的影响 |
| 3.3 大鼠窦房结细胞的急性分离 |
| 3.4 全细胞膜片钳技术在离子通道研究中的应用 |
| 3.5 力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_f电流的影响 |
| 3.6 两周力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Ca,L)通道电流的影响 |
| 3.7 两周力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Ca,T)通道电流的影响 |
| 3.8 两周力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(Kr)通道电流的影响 |
| 3.9 两周力竭运动对大鼠窦房结细胞 I_(KATP)通道电流的影响 |
| 3.10 神经系统对力竭运动大鼠窦房结离子通道电流密度的影响 |
| 3.11 运动对机体的影响与窦房结功能障碍 |
| 3.12 运动引起窦房结离子通道改变与运动性窦房结功能障碍机制探讨 |
| 3.13 本章小结与展望 |
| 4 结论 |
| 第二部分 力竭运动对大鼠窦房结相关离子通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 引言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验对象 |
| 1.2 实验动物分组 |
| 1.3 研究技术路线 |
| 1.4 主要实验仪器 |
| 1.5 药品及试剂 |
| 1.6 主要溶液配制 |
| 1.7 动物模型建立 |
| 1.8 实时荧光定量 PCR 法测定窦房结离子通道亚基 mRNA 表达 |
| 1.9 Western blot 法测定窦房结离子通道亚基蛋白质表达 |
| 2 实验结果 |
| 2.1 力竭运动对管家基因 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 2.2 力竭运动对 HCN 通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 2.3 力竭运动对 L-Ca~(2+)通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 2.4 力竭运动对 T-Ca~(2+)通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 2.5 力竭运动对快激活延迟整流 K~+通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 2.6 力竭运动对慢激活延迟整流 K~+通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 2.7 力竭运动对窦房结 ATP 敏感型 K~+通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 3 结果分析与讨论 |
| 3.1 研究方法选定与实验动物模型建立 |
| 3.2 窦房结离子通道亚基基因表达特点 |
| 3.3 力竭运动对大鼠窦房结 HCN 通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 3.4 力竭运动对 L-Ca~(2+)通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 3.5 力竭运动对 T-Ca~(2+)通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 3.6 力竭运动对快激活内向整流 K~+通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 3.7 力竭运动对 ATP 敏感型 K~+通道亚基 mRNA 及蛋白质表达的影响 |
| 3.8 运动引起窦房结离子通道亚基基因表达改变原因分析 |
| 3.10 本章小结与展望 |
| 4 结论 |
| 第三部分 力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道的影响全文总结 |
| 1 力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道电流及亚基的影响 |
| 2 窦房结功能异常与运动性心律失常发生机制探讨 |
| 2.1 窦房结细胞除极障碍及复极障碍与运动性心律失常 |
| 2.2 窦房结电兴奋冲动产生异常与运动性心律失常 |
| 2.3 窦房结电兴奋冲动传导异常与运动性心律失常 |
| 2.4 窦房结电兴奋冲动产生合并传导异常与运动性心律失常 |
| 3 全文结论 |
| 参考文献 |
| 本研究创新贡献与未来研究展望 |
| 致谢 |
| 附录 |
（4）冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道的影响（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 1 动物 |
| 2 中药制剂 |
| 3 试剂 |
| 4 实验仪器 |
| 5 溶液 |
| 6 实验分组 |
| 7 心肌细胞的分离 |
| 8 心肌细胞缺血再灌注模型制备[3, 4] |
| 9 膜片钳全细胞记录 |
| 1 0 样本保存 |
| 1 1 生化法检测各组心肌细胞Ca2+-Mg2+-ATP酶、Na+-K+-ATP酶活性 |
| 1 2 统计学分析 |
| 结果 |
| 1冠心康对大鼠心肌细胞KATP通道电流的影响 (表1) |
| 2冠心康对大鼠缺血心肌细胞Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATPase酶活性的影响 (表2) |
| 讨论 |
（5）窦房结细胞电生理研究进展（论文提纲范文）
| 1 动作电位 (AP) |
| 1.1 负性频率时的AP |
| 1.2 正性频率时的AP |
| 1.3 缺血-灌注时的AP |
| 2 窦房结细胞主要起搏离子流 |
| 2.1 起搏离子流 |
| 2.2 内向钙电流 (ICa) |
| 2.2.1 L型钙电流 |
| 2.2.2 T型钙电流 (ICa-T) |
| 2.2.3 延迟整流性钾电流 |
| 3 窦房结细胞通道蛋白的表达 |
| 3.1 钠通道亚型 |
| 3.2 连接蛋白43的表达 |
| 3.3 L型钙通道 |
| 3.4 T型钙通道 |
| 3.5 HCN通道 |
| 3.6 K通道 |
| 4 结 语 |
（6）缺血后处理对家兔窦房结功能及细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 正文 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 综述 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（8）线粒体KATP通道开放剂与缺氧预适应对乳鼠窦房结细胞起搏离子流作用的比较（论文提纲范文）
| 材 料 和 方 法 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要试剂及溶液配制 |
| 2 方法 |
| 2.1 乳鼠窦房结细胞的培养 |
| 2.2 实验分组 |
| 2.3 窦房结细胞起搏离子流的检测 |
| 3 统计学处理 |
| 结 果 |
| 1 乳鼠窦房结起搏细胞的鉴定[4] |
| 2 各组窦房结P细胞起搏离子流的比较 |
| 2.1 起搏离子流的记录和验证 |
| 2.2 各组窦房结P细胞起搏离子流密度值的比较 |
| 2.3 各组窦房结P细胞起搏离子流激活曲线的比较 |
| 讨 论 |
（9）模拟缺血预适应对原代培养乳鼠窦房结细胞起搏离子流的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂及配制 |
| 1.2 乳鼠窦房结细胞的培养 |
| 1.3 实验分组 |
| 1.4 窦房结细胞起搏离子流的记录 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 乳鼠窦房结起搏细胞的鉴定[3] |
| 2.2 起搏离子流的记录和验证 |
| 2.3 模拟缺血预适应对窦房结细胞If密度值的影响 |
| 2.4 模拟缺血预适应对窦房结细胞If激活曲线的影响 |
| 3 讨论 |
（10）三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂对模拟缺血/再灌注乳鼠窦房结细胞内钙及L-型钙电流的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂及配制 |
| 1.2 乳鼠窦房结细胞的培养 |
| 1.3 试验分组 |
| 1.4 窦房结细胞内Ca2+测定 |
| 1.5 窦房结细胞ICa-L的记录 |
| 1.6 ICa-L的记录及电流密度-电压曲线的绘制 |
| 1.7 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组窦房结细胞内Ca2+的变化 |
| 2.2 各组窦房结细胞ICa-L电流密度及电流密度-电压曲线的变化 |
| 3 讨论 |
四、Effect of simulated ischemia-reperfusion on I_f in sinoatrial node cells and the intervention of KATP channel opener（论文参考文献）
- [1]通阳活血方对受损兔窦房结细胞起搏电流电生理及信号转导机制研究[D]. 刘宇. 中国中医科学院, 2014(07)
- [2]基于心肌mitoKATP通道龙牙楤木总皂苷对大鼠缺血再灌注心脏的作用及机制研究[D]. 陈婵娟. 北京中医药大学, 2014(01)
- [3]力竭运动对大鼠窦房结起搏活动相关离子通道的影响[D]. 薄冰. 上海体育学院, 2012(04)
- [4]冠心康对大鼠缺血心肌细胞ATP敏感钾通道的影响[J]. 张娜,陈富荣,章怡祎,刘萍. 中国中西医结合杂志, 2010(11)
- [5]窦房结细胞电生理研究进展[J]. 李东,王迪生. 中西医结合心脑血管病杂志, 2008(12)
- [6]缺血后处理对家兔窦房结功能及细胞凋亡的影响[D]. 张德重. 山西医科大学, 2008(S2)
- [7]窦房结缺血再灌注的细胞凋亡研究进展[J]. 谭双,刘如秀. 医学综述, 2008(01)
- [8]线粒体KATP通道开放剂与缺氧预适应对乳鼠窦房结细胞起搏离子流作用的比较[J]. 张倩,宋治远,仝识非,黄骥. 中国病理生理杂志, 2006(10)
- [9]模拟缺血预适应对原代培养乳鼠窦房结细胞起搏离子流的影响[J]. 张倩,仝识非,黄骥,宋治远. 第三军医大学学报, 2006(04)
- [10]三磷酸腺苷敏感性钾通道开放剂对模拟缺血/再灌注乳鼠窦房结细胞内钙及L-型钙电流的影响[J]. 张倩,仝识非,宋治远. 中国心脏起搏与心电生理杂志, 2005(06)