一、Ⅲ期卵巢上皮癌首次手术治疗彻底性对预后的影响（论文文献综述）
王梦瑶[1]（2020）在《80例铂敏感型复发性卵巢上皮癌无瘤生存期影响因素及预后相关分析》文中研究说明目的:通过归纳铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者的临床资料,探索患者初治并复发后的无瘤生存期（disease-free interval,DFI）相关影响因素,DFI与总生存期的相关性,总生存期的影响因素及患者的预后分析,以期进一步认识卵巢上皮性癌的复发规律、为延长患者DFI、改善患者预后提供依据。方法:回顾性分析2007年1月至2017年12月于宁夏医科大学总医院及心脑血管病医院就诊并完成初次系统性治疗的80例铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者的临床资料,分析患者初诊时的年龄、病理类型、组织学分级、FIGO分期、术后残余病灶大小、治疗前血小板计数、初次术后化疗疗程数7个因素对患者无瘤生存期的影响、无瘤生存期与总生存期的相关性。利用ROC曲线确定治疗前血清CA125水平及血小板计数的影响患者总生存期的界值并分组,同时纳入其余因素分组,利用Kaplan-Meier法描绘不同分组患者复发后生存曲线并用log-rank检验其生存率差异。结果:（1）单因素分析提示:肿瘤的组织学分级、FIGO分期、初次术后残余病灶大小、治疗前血小板计数均与患者的无瘤生存期相关,差异有统计学意义（P<0.05）,患者初诊时年龄、肿瘤病理类型及初次术后化疗疗程数均与无瘤生存期无关（P>0.05）。（2）将组织学分级、FIGO分期、初次术后残余病灶大小、治疗前血小板计数纳入COX比例风险模型提示初次术后残余病灶大小（RR=0.276,95%CI:0.1320.578,P=0.001）及治疗前血小板计数（RR=0.454,95%CI:0.2420.850,P=0.014）均是患者无瘤生存期的独立影响因素。（3）无瘤生存期与患者总生存期呈正相关性（rs=0.628,P=0.000）。（4）本文80例铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者于1年内复发者6例,占7.5%,2年内复发者53例,占66.3%,于3年内复发73例,占91.3%,5年内复发79例,占98.8%。（5）本文80例铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者2年、3年、4年、5年生存率分别为90.0%,66.3%,50.0%,38.7%。（6）利用ROC曲线确定治疗前血清CA125的界值为984U/ml,得出治疗前血清CA125水平>984U/ml组患者生存率更低,差异有统计学意义（?2=13.232,P=0.000,P<0.05）;血小板计数影响预后的界值为387×后,得出治疗前血小板>387×组患者生存率更低,差异有统计学意义（?2=8.127,P=0.004,P<0.05）;组织学分级呈低分化组患者生存率更低差异有统计学意义（?2=9.689,P=0.002,P<0.05）,术后残余病灶大小为12cm组患者生存率更低,差异有统计学意义（?2=19.954,P=0.000,P<0.05）。结论:（1）铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者的DFI与肿瘤组织学分级、FIGO分期、初次术后残余病灶大小、治疗前血小板计数相关。（2）初次术后残余病灶大小、治疗前血小板计数为铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者无瘤生存期的独立影响因素。（3）铂敏感型复发性卵巢上皮癌患者的DFI越短则总生存期越短。（4）治疗前血清CA125水平>984U/ml、血小板计数>387×、组织学分级呈低分化者或术后残余病灶≥1cm者多预后不良。
高珍珍[2]（2016）在《新辅助化疗与晚期卵巢上皮癌铂耐药相关性研究》文中研究指明研究背景目前卵巢上皮癌仍是导致女性死亡的最主要妇科恶性肿瘤,由于其早期无典型临床表现,且无特异筛查指标,约70%确诊时已为晚期,导致较高死亡率。NCCN指南中提出,卵巢上皮癌首选治疗方案为初次肿瘤细胞减灭术,即满意的肿瘤细胞减灭术,术后给予辅助化疗,以铂类联合紫杉醇药物化疗为首选。但是,对于晚期卵巢上皮癌来说,患者已出现盆腹腔内或全身广泛转移、且大多数患者此时一般状况较差、合并症多,常难以耐受大手术,临床上实现彻底切除所有肉眼可见病灶仍然面临巨大挑战。新辅助化疗或先期化疗指,在明确诊断卵巢癌后,选择相应有效的化疗方案给予患者有限疗程的化疗,然后再行肿瘤细胞减灭术。大多数卵巢上皮癌对细胞毒性化疗药物敏感,超过80%患者对紫杉醇联合铂类化疗方案治疗结果为化疗敏感,应用新辅助化疗可以有效减少肿瘤负荷、术前胸水及腹水量,从而缩小手术范围、降低围手术期并发症发生率。但是,有证据表明,新辅助化疗并未改善无复发生存期及总生存期,并易导致肿瘤耐药。本研究通过回顾性病例分析研究,探讨新辅助化疗与晚期卵巢上皮癌铂耐药的相关性,并且在此基础上,对其与二次复发性卵巢上皮癌的耐药关系进行了研究与阐述,以为临床治疗提供指导及依据。研究方法1、选择解放军总医院2005年01月01日至2015年01月01日期间,确诊为卵巢上皮癌、原发性输卵管癌或腹膜癌住院并接受手术、依据FIGO（2013）手术-病理分期确诊为Ⅲc期或Ⅳ期患者,按照术前是否给予化疗分为-新辅助化疗后间歇性细胞减灭术组（NACT-IDS组）和直接肿瘤细胞减灭术组（PDS组）,通过对入组病例资料进行分析随访,比较两组间铂反应（包括铂敏感、铂耐药及铂抵抗）及无复发生存期是否存在差异,从而评估新辅助化疗是否与晚期上皮癌铂耐药相关。2、选取本研究第一部分入组患者中再次复发卵巢上皮癌、原发性输卵管癌或腹膜癌患者,并且复发患者的诊断治疗及随访均在我院完成,治疗信息完善,对其病例资料进行分析随访,按照术前是否给予化疗分为-新辅助化疗后间歇性细胞减灭术组（NACT-IDS组）和直接肿瘤细胞减灭术组（PDS组）,比较两组间铂反应（包括铂敏感、铂耐药及铂抵抗）及无复发生存期是否存在差异,同时,进一步分析高级别及低级别浆液性复发性卵巢上皮癌无复发生存期的差异,从而评估新辅助化疗是否与二次复发性卵巢上皮癌耐药的关系及其对不同组织分级浆液性癌耐药的影响.研究结果1、新辅助化疗并未增加晚期卵巢上皮癌铂耐药及铂抵抗的发生,同时,与直接肿瘤细胞减灭术组相比,其对无复发生存期的影响无统计学差异。肿瘤细胞减灭术残余癌灶大小可以影响无复发生存期,残余病灶>1cm会缩短无复发生存时间,多因素COX回归分析显示,残余癌灶大小是影响无复发生存期的单一危险因素。2、新辅助化疗增加了二次复发性卵巢上皮癌铂耐药（包括铂抵抗）的发生,但是对于铂敏感型复发性卵巢癌无复发生存期的影响无统计学差异,多因素COX回归分析显示,新辅助化疗及年龄是影响二次复发性卵巢上皮癌无复发生存期的两个独立危险因素。通过对高、低两个不同级别浆液性卵巢癌无复发生产期的分析,结果可知,新辅助化疗可缩短高级别浆液性复发癌的无复发生存期,但未缩短低级别浆液性复发卵巢癌的无复发生存期。
吴文娟[3]（2014）在《卵巢上皮癌多药耐药的血清蛋白组学及代谢组学的初步研究》文中研究指明目的使用蛋白组学及代谢组学技术研究卵巢上皮癌多药耐药患者血清中差异表达的蛋白质及代谢化合物，寻找卵巢上皮癌多药耐药相关的诊断标志物及探索多药耐药的发病机制，进而找到逆转耐药治疗的靶点。方法收集临床上卵巢上皮癌（EOC）铂类耐药患者（PTR）、非耐药患者（PTS）、卵巢良性囊肿（BOC）及正常健康人（NC）四组血清各10例，每组的10例样品混合成一个pool，使用Human14亲和柱去除血清中高丰度蛋白后，收集去除高丰度蛋白后的组分用于蛋白组学的分析。本实验采用基于iTRAQ的蛋白组学技术分析不同分组血清差异蛋白表达谱，然后借助生物信息学方法筛选出有重要价值的蛋白质，采用Western blot及ELISA技术验证其表达的规律；此外，从蛋白组学分析的样本中抽取132例临床血清样本，包括PTR、PTS、BOC及NC四组，利用液质联用正离子模式检测四组血清代谢指纹谱。结果两次iTRAQ实验总共鉴定三百多种蛋白，本研究对四组样本中两两进行对比分析，重点关注PTS及PTR间的差异表达，两组鉴定到62个有统计学意义的差异表达蛋白，使用生物信息学方法对这62个蛋白进行全面分析，并采用Western blot及ELISA技术对部分差异蛋白进行验证，表达趋势与质谱一致。代谢组学共检测到25800个代谢化合物，使用主成分分析（PCA）对数据降维后，并结合临床资料进行分析后得到6个对EOC多药耐药意义重大的差异代谢物。结论差异表达蛋白SERPINA1、FN1、ORM1及6个差异代谢物可对EOC化疗的疗效起到监测作用，可能参与EOC多药耐药的生物过程，是EOC多药耐药潜在的诊断标志物及逆转耐药治疗药物的作用靶点。
刘玲[4]（2014）在《miRNA-mRNA差异表达与卵巢癌多药耐药关系的研究》文中研究指明卵巢癌在女性生殖道恶性肿瘤发病率中占第三位，但是死亡率高居第一。化疗是治疗卵巢上皮癌重要手段之一，但多药耐药的产生又是导致化疗失败的中心环节。卵巢上皮癌多药耐药机制十分复杂，目前研究认为可能涉及肿瘤细胞内化疗药物的外排、DNA损伤与修复、细胞凋亡异常和信号传导通路障碍等分子机制，但是至今仍未找到安全有效的逆转耐药靶点。本研究拟通过运用miRNA芯片技术和基因芯片技术，以及生物信息学等多样化研究手段，从临床到基础研究，然后回归临床的研究桥梁，阐述卵巢上皮癌多药耐药分子机制，为寻找安全有效的逆转卵巢上皮癌多药耐药治疗靶点提供理论基础。研究目的：筛选卵巢上皮癌多药耐药相关miRNA表达谱。材料和方法：采用Agilent miRNA芯片，检测5例卵巢上皮癌耐药组织、5例敏感组织、5例卵巢良性肿瘤和5例正常卵巢组织的miRNA表达情况，运用Fc差异倍数，获得了卵巢上皮癌耐药组和敏感组差异大于2倍的上调或下调miRNA。用多个在线软件分别预测上调和下调差异miRNA对应的靶基因，并运用GO分析和Pathway通路富集等生物信息学方法分析预测到的靶基因潜在的生物学功能和参与的信号通路。用QRT-PCR验证芯片结果，并扩大样本量检测目的miRNA的表达情况，并分析miRNA表达水平与临床病理因素关系。结果：miRNA芯片筛选出与卵巢上皮癌多药耐药相关的差异表达miRNA共62个，其中有42个miRNA在卵巢上皮癌耐药组织中上调、20个miRNA下调，上调miRNA预测到1391个靶基因，下调miRNA预测到1231个靶基因。GO分析结果显示：上调表达的miRNA预测到的靶基因主要参与了细胞蛋白质代谢过程和RNA聚合酶II启动子的转录调控过程，下调表达的miRNA预测的靶基因主要参与转录调控、蛋白酶参与的细胞蛋白质分解代谢过程以及细胞蛋白质分解代谢等过程。KEGG Pathways通路分析提示上调表达的miRNA预测的靶基因主要参与TGF-beta信号通路和粘着连接信号通路。疾病富集分析部分靶基因与卵巢上皮癌或卵巢肿瘤相关。QRT-PCR验证miRNA芯片结果，差异表达的miR-200a-3p、miR-382-5p、miR-1、miR-152和miR-299-5p与芯片表达趋势一致，扩大临床样本验证亦得到了一致的结果，其中miR-200a-3p在卵巢癌耐药组织中下调0.31倍，差异有统计学意义（P＜0.01）；miR-382-5p、miR-152和miR-299-5p分别上调3.53倍、2.69倍和2.70倍，差异有统计学意义（P＜0.01）；miR-1上调1.14倍，差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：我们通过miRNA芯片技术筛选出了跟卵巢上皮癌耐药相关miRNA表达谱，同时靶基因预测提示我们一个miRNA可以调控多个靶基因，而一个靶基因又可能同时受几个miRNA的调控，可见miRNA的调控机理是十分复杂的。生物信息学分析提示差异表达miRNA预测到的靶基因广泛参与多个生物学过程，我们可以推测这些异常表达的miRNA可能通过调控特定功能的靶基因，参与重要信号传导通路，在肿瘤的生长及肿瘤耐药产生过程中发挥重要角色。后期需要进一步研究以认识这些差异miRNA参与卵巢上皮癌耐药发生的相关分子机制。研究目的：筛选卵巢上皮癌多药耐药相关mRNA表达谱。材料和方法：采用Agilent lncRNA芯片，检测5例卵巢上皮癌耐药组织、5例敏感组织、5例卵巢良性肿瘤和5例正常卵巢组织的mRNA表达情况，获得与卵巢上皮癌耐药组和敏感组差异大于2倍的上调或下调mRNA。运用GO分析和Pathway通路富集等生物信息学方法分析差异表达mRNA潜在的生物学功能和参与的信号通路。用QRT-PCR验证芯片结果，并扩大样本量检测目的mRNA的表达情况，并分析mRNA表达水平与临床病理因素关系。结果：mRNA芯片筛选出于卵巢上皮癌多药耐药相关差异表达mRNA共855个，其中在卵巢上皮癌耐药组织中上调表达的mRNA598个，下调表达的257个。生物信息学分析结果显示上调mRNA主要参与细胞粘附、生物黏附、调节细胞增殖、免疫反应以及血管发育等31个生物学过程，下调mRNA未富集到显着相关生物学过程。KEGGPathway分析结果显示上调mRNA主要参与了粘着斑和ECM-受体相互作用的信号传导途径。QRT-PCR验证芯片结果，KIT、HGF、CSF1R、PDGFRB和KIAA1804与芯片表达趋势一致，扩大临床样本验证亦得到了一致的结果，其中KIT、HGF、CSF1R、PDGFRB基因在EOC耐药组织中分别上调3.81倍、2.74、2.03倍和2.92倍，差异有统计学意义（P﹤0.05），而KIAA1804基因则下调0.42倍，差异有统计学意义（P﹤0.05）。结论：利用基因芯片基础筛选出了跟卵巢上皮癌多药耐药相关的mRNA表达谱，丰富了目前已知的跟耐药相关的靶基因数据。生物信息学提示差异表达mRNA多参与细胞粘附、调节细胞增殖、免疫反应等生物学过程，以及部分mRNA被富集在粘着斑和ECM-受体相互作用的信号通路上，提示这些差异基因可能通过多种途径参与卵巢上皮癌多药耐药的发生，后期需要进一步研究以认识这些差异miRNA参与卵巢上皮癌耐药发生的相关分子机制。研究目的：构建与卵巢上皮癌多药耐药相关miRNA-mRNA调控网络。材料和方法：对筛出的卵巢上皮癌多药耐药相关的miRNA差异表达谱和mRNA差异表达谱信息运用MAGIA软件进行整合分析，并选取miRNA跟mRNA负相关的miRNA-mRNA，构建卵巢上皮癌耐药相关miRNA-mRNA调控网络图，并用QRT-PCR方法验证关键位点miRNA和mRNA的表达，并分析miRNA-mRNA表达水平与临床病理因素关系。结果：miRNA表达谱和mRNA表达谱关联后，共得到53对负关联的miRNA/miRNA，其中包括10个miRNA和43个mRNA，被富集到的靶基因最多的是miR-429和miR-381，对应靶基因数目分别为16个和8个，而被最多miRNA关联调控的mRNA分别是ERBB4、PRKCE和PPP1R9A，印证了一个miRNA调控多个靶基因，而一个靶基因可受到多个miRNA调控。扩大临床样本QRT-PCR验证结果：相比于卵巢癌敏感组，miR-429、miR-373-5p在卵巢耐药组中分别下调0.35倍和0.39倍，差异有统计学意义（P＜0.01）；对应靶基因KANK2、ZEB2和CTSD分别上调2.56倍、3.15倍和1.89倍，差异有统计学意义（P＜0.05）；miR-381、miR-495和miR-410在耐药组中分别上调2.36倍、2.46倍和2.42倍，差异有统计学意义（P＜0.01）；对应的靶基因ERBB4、TIAL1、FGFRL1和MPPED2分别下调0.46倍、0.38倍、0.29倍和0.43倍，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论：经过QRT-PCR验证以及文本挖掘，我们认为构建与卵巢上皮癌多药耐药相关的miRNA-mRNA调控网络图比较可靠，提示了在卵巢癌耐药组织中miRNA和mRNA复杂的调控网络关系，亦从多基因多靶点角度阐述了卵巢上皮癌多药耐药的发生机制。而关键位点的miRNA及其负调控mRNA具体以何种方式和途径参与EOC多药耐药机制的发生，需要后期做进一步深入的功能学研究，以期找到确实可靠的逆转卵巢上皮癌MDR被关键靶点，指导临床更好得防治卵巢上皮癌多药耐药的发生，提高患者预后和生活质量。
李状[5]（2012）在《二氢叶酸还原酶与卵巢上皮癌多药耐药关系的研究》文中进行了进一步梳理第一章卵巢癌多药耐药的研究进展（文献综述）卵巢恶性肿瘤是女性生殖器三大恶性肿瘤之一。卵巢隐匿于盆腔的深部,早期病变时不易被发现,一旦出现症状时大多属于晚期,治疗后容易复发,死亡率亦一直位居妇科恶性肿瘤之首。目前卵巢癌的治疗目的是早期争取治愈、晚期控制复发、延长生存期及提高患者生活质量。治疗原则是以手术为主,联合化疗及放疗的综合治疗。大多数的情况下,手术是很难将卵巢癌的转移灶彻底的切除干净。对于那些残留的细小的转移和种植结节.都需要化学药物来进行治疗。因此,化疗在卵巢癌治疗的过程中具有极其重大的意义。晚期卵巢癌的治疗方法主要以肿瘤细胞减灭术及术后辅助化疗为主。但化疗失败常会导致卵巢癌的复发,其主要原因在于肿瘤细胞产生的多药耐药（multidrug resistance,MDR）。以顺铂为主的联合化疗对卵巢癌的有效率达40%-60%,由于疾病进展和机体对化疗产生耐药,晚期卵巢癌患者的5年生存率低于20%。所以,多药耐药是肿瘤化疗失败的主要因素之一。因此,肿瘤产生耐药机制的研究以及在临床上预防耐药、对抗耐药并尝试逆转耐药就成为了当前卵巢癌治疗中的热点和难点,成为提高卵巢癌的治疗效果及改善卵巢癌患者生存的重要目标之一。第二章卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因的表达及临床意义目的探讨卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因（DHFR）（?）的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR法测定80例卵巢癌组织、50例良性卵巢组织及30例正常卵巢组织中的DHFR mRNA表达情况,分析其与卵巢癌临床病理及多药耐药的相关性。结果（1）DHFR mRNA表达量在止常卵巢,良性卵巢肿瘤和卵巢癌组织中分别为0.584±0.234,0.895±0.783和0.197±0.412,相比较差异有统计学意义（P<0.001,P=0.027,P<O.001）。（2）卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与患者临床分期及病理分级无相关（P>O.05）,但在上皮性癌中浆液性癌组织中DHFR mRNA表达量则明显高于粘液性和内膜样癌,相比较差异有统计学意义（P<0.001）。（3）卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与患者的腹水量,淋巴结转移和远处器官转移无明显相关（P>O.05）,但大网膜转移者肿瘤组织中DHFR mRNA表达量则低于无转移者（P=0.044）。（4）在卵巢癌患者中治疗后缓解者组织中DHFR mRNA表达量低于肿瘤进展者（P<O.001）；而铂类药物敏感型患者肿瘤组织中DHFR mRNA表达量也低于铂类药物耐药者（0.130±0.103vs0.341±0.701P=0.011）。（5）DHFR mRNA表达量判断卵巢肿瘤性质的ROC曲线Youden旨数最大值所对应的数值为0.331, DHFR mRNA表达量高于0.331的患者中位生存时间为16.4个月,而低于0.331的患者中位生存时间为44.5个月,着异有统计学意义（P<0.001）,且COX模型多因素分析亦显示DHFR mRNA表达量为影响预后的独立因素（P=0.018）。结论DHFR mRNA在正常和良性卵巢组织中表达量高于卵巢癌组织,提示DHFR参与正常组织细胞生理代谢；而在卵巢癌中DHFR mRNA在铂类耐药组织中高表达（O.341±0.701）,在铂类敏感组织低表达（0.130±0.103）,提示DHFR与卵巢癌多药耐药相关,可能为判断卵巢癌多药耐药潜在标志之一。第三章二氢叶酸还原酶基因表达上调对卵巢上皮癌细胞系生物学特性影响的体外实验研究目的构建携带人二氢叶酸还原酶（DHFR）基因的慢病毒表达载体pWPI。方法采用PCR方法扩增二氢叶酸还原酶cDNA全长,与EZ-T克隆载体连接,HindⅢ及BamHI-HF限制性内切酶双酶切回收的PCR片段并补平其缺口。慢病毒系统载体使用pWPI系统,采用PmeI酶切载体后回收片段,将其磷酸化,T4酶连接载体与目的基因。表达载体鉴定均采用核苷酸序列测定,重组质粒采用脂质体转染293T包装细胞后获得包装的病毒颗粒。通过流式细胞仪检测成功构建好的DHFR-pWPI-SKOV3细胞、空载pWPI-SKOV3细胞以及亲本SKOV3细胞在不同的顺铂浓度下（2.5ug/ml,5.0ug/ml,10.0ug/ml,20.0ug/m1）不同时间段（24h、48h及72h）的三种细胞的凋亡情况以及IC50顺铂浓度（6.0ug/m1）下三种细胞的周期变化,高效液相法（HPLC法）检测不同顺铂浓度（4.0ug/ml,6.0ug/ml,8.0ug/ml）不同时间段（24h、48h及72h）药物作用后三种细胞内的顺铂浓度,以及透射电镜观察IC50顺铂浓度（6.0ug/m1）下三种细胞的超微结构变化,以探讨DHFR基因的过表达对卵巢癌细胞的体外生物学行为影响。结果（1）成功扩增二氢叶酸还原酶全长并连接入pWPI载体构建成重组表达载体DHFR-pWPI,重组质粒测序结果显与DHFR基因的同源性达100%,按标准生产程序转染293T后有DHFR基因的表达,将其病毒液感染SKOV3细胞。（2）通过流式细胞仪检测转染DHFR基因的细胞的凋亡变化,发现DHFR-pWPI-SKOV3细胞在顺铂浓度（2.5ug/ml、5.0ug/m1）刺激下,其24h、48h及72h的凋亡率均低于pWPI-SKOV3及SKOV3细胞；DHFR-pWPI-SKOV3细胞在顺铂浓度（10.0ug/ml、20.0ug/ml）刺激下,其24h及48h的凋亡率均低于pWPI-SKOV3及SKOV3细胞,但在72h时,凋亡率却高于SKOV3细胞株。表明DHFR-pWPI-SKOV3细胞在浓度小于5.0ug/ml时,不管时间的改变（72小时内）,其对顺铂的抵抗力高于其他两种细胞。（3）通过流式细胞仪检测不同时间段IC50顺铂浓度（6.0ug/m1）对三种不同处理卵巢癌细胞的周期变化,结果提示1C50（6.0ug/m1）顺铂浓度给药时,DHFR-pWPI-SKOV3、pWPI-SKOV3及SKOV3三种细胞在24h、48h时其G1期含量明显低于G2+S细胞：而在72h时,DHFR-pWPI-SKOV3细胞的G2+S期明显低于pWPI-SKOV3及SKOV3细胞。（4）采用HPLC法检测细胞内顺铂浓度,结果显示细胞培养液中顺铂浓度（4.0ug/m1）给药24h、48h后及顺铂浓度（6.0ug/m1）给药24h后,DHFR-pWPI-SKOV3细胞内的顺铂含量均明显低于pWPI-SKOV3及SKOV3细胞；顺铂浓度（6.0ug/m1）给药48h及顺铂浓度（8.0ug/ml）给药24h、48h后,DHFR-pWPI-SKOV3细胞内的顺铂含量明显高于pWPI-SKOV3及SKOV3细胞。（5）通过电镜观察1C50顺铂浓度在不同时间段刺激三种不同处理的细胞的超微结构改变,发现DHFR-pWPI-SKOV3细胞在给药24h及48h其微丝聚集,线粒体从数量上及结构上改变明显,而pWPI-SKOV3细胞微丝少见,线粒体数目减少,但结构改变不明显,SKOV3细胞亦很少见到微丝,但其线粒体的结构改变亦明显,扩张与固缩同时存在；三者均出现扩张的内质网；三者均少见正常的细胞器；在给药72h后,pWPI-SKOV3及SKOV3细胞可见微丝排列紊乱,核膜部分消失,核糖体大量的聚集,进入了明显的坏死阶段,而DHFR-pWPI-SKOV3细胞未见微丝,核膜几乎完全消失,胞质内有白色囊状物质,线粒体结构基本消失,大部分细胞濒临死亡。结论成功采用慢病毒载体系统构建了二氢叶酸还原酶重组慢病毒转基因,耐药性功能实验表明DHFR表达量增高时卵巢癌细胞系耐药性增加,可以认为DHFR与卵巢癌顺铂的耐药性相关,为探讨DHFR在肿瘤多药耐药过程中的分子机理奠定基础。第一节RNA干扰质粒载体的构建及鉴定目的构建二氢叶酸还原酶（DHFR, dyhidrofolate reductase）基因RNAi慢病毒载体,为探讨抑伟DHFR基因表达在卵巢癌铂类耐药治疗中的意义奠定基础。方法设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA,筛选出最佳siRNA沉默片段,退火后连接入p GSCIL载体,转化后进行序列鉴定,脂质体转染SKOV3细胞株,并进行荧光摄像。结果将退火后的双链寡核苷酸片段连接至pGPU6/GFP/Neo载体,测序结果正确。转染SKOV3细胞后,PCR鉴定干扰效果。G418筛选稳定细胞株。结论成功构建针对DHFR基因的siRNA载体,找到了有效的干扰靶序列,转染SKOV3细胞后,DHFR基因的表达明显减弱。第二节DHFR慢病毒干扰载体的构建及其在卵巢上皮癌细胞中生物学特性影响目的构建二氢叶酸还原酶（DHFR, dyhidrofolate reductase）基因RNA干扰慢病毒载体,研究其耐药性功能影响,为探讨抑制DHFR基因表达在卵巢癌铂类耐药治疗中的意义奠定基础。方法设计DHFR基因靶向的发夹状siRNA,筛选出最佳siRNA沉默片段,退火后连接入pGSCIL/GFP载体,转化后进行序列鉴定,脂质体转染SKOV3细胞株,并进行荧光摄像。Western blot验证构建成功通过流式细胞仪检测成功构建好的DHFR-pGSCIL-SKOV3细胞、空载pGSCIL-SKOV3细胞以及亲本SKOV3细胞在不同的顺铂浓度下（2.5ug/m1,5.0ug/ml,10.0ug/ml,20.0ug/m1）不同时间段（24h、48h及72h）的三种细胞的凋亡情况以及IC50顺铂浓度（4.4ug/ml）下三种细胞的周期变化,高效液相法（HPLC法）检测不同顺铂浓度（2.5ug/ml,5.0ug/ml,7.5ug/ml）不同时间段（24h、48h及72h）药物作用后三种细胞内的顺铂浓度,以及透射电镜观察IC50顺铂浓度（4.4ug/m1）下三种细胞的超微结构变化,以探讨DHFR基因的沉默对卵巢癌细胞的体外生物学行为影响。结果（1）将退火后的双链寡核苷酸片段连接至pGSCIL/GFP载体,测序结果正确。转染SKOV3细胞后,Western blot鉴定十扰效果。（2）在给药24h、48h及72h,DHFR-pGCSIL-SKOV3、pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞的凋亡率随着顺铂浓度（2.5ug/ml、5.0ug/ml、10.0ug/ml、20.0ug/m1）的增大而升高,且DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞给药48h及72h后的凋亡率明显高于pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞。（3）在IC50（4.4ug/ml）顺铂浓度给药24h、48h后,DHFR-pGCSIL-SKOV3、pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞均以G1期为主。DHFR-pGCSIL-SKOV3在48h时G1期的细胞比例明显减少,S期和G2/M期比例增多,72h后三种细胞G1期的含量均明显降低,S期和G2/M期的含量均增高。（4）采用高效液相检测细胞内顺铂浓度时,当2.5ug/m1、5.0ug/ml顺铂浓度作用三种不同处理的卵巢癌细胞时,DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞在给药后24h、48h其细胞内顺铂浓度均明显高于pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞。而DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞在7.5ug/ml顺铂浓度给药后24h其细胞内顺铂浓度均明显低于PGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞,而在48h却又高于pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞。（5）在IC50（4.4ug/m1）给药24h、48h三种不同处理细胞的微丝均少见,DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞在24h时可见线粒体肿胀、脊消失、空泡化、萎缩,内质网扩张明显,有聚集的核糖体,末见高尔基体,48h时其有些线粒体溶解消失,且出现大量的白色囊泡；而pGCSIL-SKOV3及SKOV3细胞24h、48h内质网扩张少见,线粒体结构改变不明显,甚至有2-3个高尔基体存在；DHFR-pGCSIL-SKOV3细胞至72h时,微丝明显的聚集、增多,线粒体结构亦消失。余两种细胞微丝排列紊乱,线粒体形态多样化。结论成功构建针对DHFR基因的siRNA慢病毒载体,找到了有效的干扰靶序列,转染SKOV3细胞后,DHFR基因的表达明显减弱。通过对DHFR下调后耐药性功能研究证实DHFR基因的下调与经过铂类药物作用的体外卵巢癌细胞的药物敏感性有一定的联系,抑制DHFR基因表达能增加顺铂药物敏感性,因此,抑制卵巢癌细胞DHFR基因的表达可以考虑作为顺铂多药耐药的逆转机制。
计峰[6]（2012）在《卵巢上皮癌规范化治疗后复发的临床早期诊断的循证医学研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨血清CA125检测对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断的价值及对治疗疗效的影响，以指导临床诊断治疗。方法：采用放射免疫方法对152例卵巢上皮性癌患者血清CA125进行连续监测。术前测定一次，术后每月测定一次，连续两年以上。结果：152例卵巢上皮性癌患者经治疗缓解，部分患者出现复发，血清CA125以35u/ml为临界值，其诊断复发的敏感度为67.39%，特异度为86.79%。治疗前血清CA125、治疗后血清CA125下降程度和速度与患者预后有关，治疗前血清CA125≤35u/ml者较治疗前血清CA125＞35u/ml者预后好，治疗后血清CA125呈对数下降者或1个月之内下降至正常者较治疗后血清CA125呈非对数下降者或大于1个月下降至正常者预后好；复发时血清CA125上升含量与临床出现病灶时间有一定关系，CA125上升含量越高，出现病灶的时间越短，其相关性呈负相关；经多因素Cox回归模型分析显示，治疗前CA125含量和治疗后血清CA125下降速度是患者预后的独立因素。结论：血清CA125水平检测对卵巢上皮性癌复发的诊断、疗效评价有重要意义。目的：系统评价血清CA125水平对卵巢上皮癌治疗后复发的诊断价值。方法：计算机检索PubMed、EMbase、Medline、Cochrane Library、EBMR、CBM、CJFD、CSJD、清华同方等数据库，检索期限1995年1月1日至2011年12月31日，收集有关血清CA125诊断卵巢上皮癌复发的诊断试验。根据诊断性试验准确性质量评价工具（QUADAS）评价文献质量并提取数据，采用Meta-Disc1.4版软件进行Meta分析。结果：10篇文献符合纳入标准入组本系统评价，合并统计量617例（患者）。Meta分析的结果显示：血清CA125对卵巢上皮癌治疗后复发的诊断优势比DOR为10.38（95％Cl=6.08～17.72），敏感度和特异度分别为62％（95％Cl=57％～67％）和86％（95％Cl=80％～91％），阳性似然比和阴性似然比分别为3.99（95％Cl：2.17～7.31）和0.45（95％Cl=0.39～0.52）。结论：血清CA125检测诊断卵巢上皮癌治疗后复发的敏感度一般，但特异度较高，可作为临床辅助诊断复发性卵巢上皮癌的有效方法。目的：探讨影像学检查（B超、CT）对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断的价值。方法：对152例卵巢癌切除术后患者进行B超、CT检查,同时检测血清CA125值,将检查结果与病理组织学诊断对照，分别计算各单项检查与联合模型诊断的敏感性、特异性。利用SAS8.0软件包采用Logistic回归方法随机抽取72例来建立回归模型，80例用于验证所得到的模型，并与单独B超、CT结果进行对比分析。结果：单独应用B超检查，敏感性和特异性分别为84.78%和89.62%，单独应用CT检查，敏感性和特异性分别为86.96%和91.51%,单独CA125检查，敏感性和特异性分别为67.39%和86.79%，B超联合CA125模型的敏感性和特异性分别为84.62%和85.69%，CT联合CA125模型的敏感性和特异性分别为92.31%和94.44%。结论：CT联合CA125模型对卵巢癌复发具有较好的诊断效能，灵敏度，特异度均较高，是监测卵巢上皮癌术后复发的有效方法。目的：系统评价影像学检查（B超、CT、MRI、PET/CT）对卵巢上皮癌治疗后复发的诊断价值。方法：计算机检索PubMed、EMbase、Medline、CochraneLibrary、EBMR、CBM、CJFD、CSJD、清华同方等数据库，检索期限1995年1月1日至2011年12月31日，收集有关影像学检查（B超、CT、MRI、PET/CT）诊断卵巢上皮癌复发的诊断试验。根据诊断性试验准确性质量评价工具（QUADAS）评价文献质量并提取数据，采用Meta-Disc1.4版软件进行Meta分析。结果：最终符合纳入标准纳入本研究CT文献8篇，合并统计量478例（患者）；MRI文献3篇，合并统计量184例（患者）；PET/CT文献10篇，合并统计量559例（患者）。Meta分析的结果显示：CT对卵巢上皮癌治疗后复发的诊断优势比DOR为10.32（95％Cl=4.93～21.62），敏感度和特异度分别为70％（95％Cl=64％～75％）和81％（95％Cl=75％～86％），阳性似然比和阴性似然比分别为3.11（95％Cl：2.30～4.19）和0.35（95％Cl=0.23～0.55）；MRI对卵巢上皮癌治疗后复发的诊断优势比DOR为48.17（95％Cl=15.02～154.51），敏感度和特异度分别为85％（95％Cl=78％～91％）和90％（95％Cl=77％～97％），阳性似然比和阴性似然比分别为7.83（95％Cl：3.09～19.87）和0.19（95％Cl=0.07～0.52）；PET/CT对卵巢上皮癌治疗后复发的诊断优势比DOR为71.48（95％Cl=29.31～174.34），敏感度和特异度分别为88％（95％Cl=85％～92％）和90％（95％Cl=85％～94％），阳性似然比和阴性似然比分别为657（95％Cl：4.44～9.72）和0.12（95％Cl=0.06～0.23）。结论：CT、MRI、PET/CT在诊断卵巢上皮癌治疗后复发有较高的敏感度和特异度。
覃金春[7]（2011）在《卵巢上皮癌手术相关问题临床及循证医学研究》文中研究表明目的:探讨影响卵巢上皮性癌预后的手术相关因素。方法:回顾性分析1992年10月22日至2009年12月30日在广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科收治的卵巢上皮性癌患者的病历料,Kaplan-Meier法绘制生存曲线,并比较单因素不同水平生存时间的差异,其差异性经Log-rank test进行检验,用Cox模型进行多因素回归分析。结果:534例上皮性卵巢癌临床病例的累积生存率:1年、2年、3年、5年、10年的生存率为65%、55%、46%、33%、18%,中位生存期是42.5个月。多因素分析显示手术病理分期、组织学分级、肿瘤细胞减瘤理想程度、大网膜切除、新辅助化疗是影响预后的决定因素。单因素分析显示:早期患者预后好于晚期患者;高分化癌患者预后好于中、低分化癌患者;理想减瘤患者预后好于未达理想减瘤患者;Ⅲ期淋巴结切除患者预后好于淋巴结未切除者,理想减瘤患者中淋巴结切除患者预后好于淋巴结未切除者;Ⅲ期行大网膜切除患者预后好于未行大网膜切除患者,在理想或不理想减瘤患者中,大网膜切除均能改善患者的预后;在理想减瘤患者中肠未切除患者预后仍好于肠切除者,但是在不理想减瘤患者中差异无显着性;阑尾切除仅有改善Ⅱ期患者预后的趋势,但是差异无统计学意义;达理想减瘤横隔未受累患者预后好于横隔受累者;新辅助化疗并不能改善预后。结论:手术病理分期、组织学分级、肿瘤细胞减瘤理想程度、大网膜切除、新辅助化疗是影响预后的决定因素。背景:系统性腹膜后淋巴结切除在改善上皮性卵巢癌患者总的生存率中的作用仍不明确。为此,我们进行了一项Meta分析评价系统腹膜后淋巴结与非系统淋巴结切除对上皮性卵巢癌患者总的生存率的影响。方法:对1995年1月1日至2010年12月31日公开发表的文献进行广泛检索后,我们对17个研究（2篇RCT, 15篇为回顾性病例对照研究、其中3篇为SEER）共74754例行系统淋巴结切或未切的分期手术的上皮性卵巢癌患者进行Meta分析。结果:SL与USL相比较是改善患者OS的有利因素,OR=O.55;95%CI,0.49-0.69,P=0.00001;即使对于早期（I-II期）患者也显示SL较USL患者预后好,OR=0.52;95%CI,0.35-0.78,P=0.001;而晚期（III-IV期）患者其OR=0.52;95%CI,0.41-0.67,P<0.00001。此外,SL改善所有期别的理想减瘤患者的OS,OR=0.65;95%CI,0.50-0.84,P=0.0009;然而,早、晚期达到理想减瘤患者中SL与USL对OS的影响比较,无统计学差异。但是对晚期III-IV期理想减瘤的上皮性卵巢癌患者,SL与USL相比P=0.06,接近有统计学意义。但是由于纳入文献存在发表偏移,应对该结果持谨慎态度。结论: SL有可能改善EOC的OS。但是由于缺乏足量的RCT,SL对上皮性卵巢癌OS的影响仍确定,需要更多的RCT研究以进一步明确。目的:评价卵巢癌膈下病灶手术处理的安全性及对预后的影响。方法:收集2000年1月1日—2010年12月31日发表的,关于卵巢癌手术中膈肌病灶处理的文献进行循证评价,探讨膈肌手术的安全性及临床价值。结果:12篇文献符合纳入标准。手术相关并发症最长见的为胸腔积液、其次为气胸、肺炎、膈下脓肿等。仅有1例手术相关死亡。膈肌手术时间为78-710分钟,住院时间为4-40天。不管是原发或是复发患者,大多数患者达到理想减瘤（残余病灶<2cm）。肿瘤细胞减灭术中行膈肌手术患者较未行膈肌手术患者达到理想减瘤比例高,预后较好。结论:卵巢癌膈下病灶的处理是安全可行的,能提高患者理想减瘤的比例,从而改善患者的预后,但目前多为小样本回顾性研究,有待于临床试验的研究结果证明。目的:评价卵巢癌肿瘤细胞减灭术中肠道病灶处理的安全性及对预后的影响。方法:收集2000年1月1日-2010年12月31日发表的,关于卵巢癌肿瘤细胞减灭术中肠道转移病灶处理的文献进行复习,评价肠道病灶处理的临床价值。结果:27篇文献符合纳入标准。最常见的为术后并发症为感染,发生率平均20.7%。而与肠道手术直接相关的最常见并发症为肠梗阻发生率平均10.6%。其次为肠漏及吻合口漏的发生,平均2.7%。术中出血量100ml-8500ml不等。住院时间4天-79天不等。术后肛门排气时间约周左右。多数学者认为肠切除有改善患者生存的趋势,肠切除理想减瘤患者较不理想减瘤患者预后好。而肠管浸润深度可能对患者的无瘤生存有影响,但对于总的生存无影响。结论:卵巢癌肿瘤细胞减灭术中肠道病灶处理是安全可行的,肠切除后达到理想减瘤患者预后好,但其对预后的影响仍需更多相关研究以进一步证实。目的:评价卵巢癌再分期手术的临床价值及手术安全性。方法:收集1980年1月1日-2010年12月31日发表的、关于卵巢癌再分期手术相关文献进行循证评价,评价卵巢癌再分期手术的临床意义及手术安全性。结果:有9篇文献符合纳入标准,总共351例患者进行了再分期手术,术后91例（26%）患者再分期提高（或有阳性发现）,阳性率为。其中术后分期为Ⅲ期占所有分期提高患者的47%（43/91）。有6篇文章共报道了112个阳性部位,腹膜及盆腹腔其它部位转移40例（36%）,其中细胞学阳性24例（21%）,淋巴结阳性19例（17%）,大网膜转移14例（13%）,膈肌转移15例（13%）。4篇文献报道了手术并发症,术中并发症常见的为术中出血及膀胱、输尿管、肠等脏器损伤,术后并发症常见的为感染、肠梗阻、淋巴囊肿等。有1篇文献报道了腹腔镜手术术中出血情况,均<300ml。无手术相关死亡报道。结论:卵巢癌的再分期手术能进一步明确分期,术中术后病率可接受,是安全可行的。
唐兆前[8]（2010）在《卵巢癌耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因的验证与结构和表型变化研究》文中提出卵巢上皮癌在妇科恶性肿瘤中致死率最高。手术后,以铂类为基础的联合化疗是其主要的治疗方法。但随着化疗的进行,患者最终获得难以治愈的多药耐药,因而其五年生存率一直徘徊在30-50%。为了更好地认识肿瘤抑制基因在卵巢癌多药耐药中的机制,我们对卵巢癌卡铂耐药基因差异表达谱芯片进行了肿瘤抑制基因的筛选及验证,对相关的肿瘤抑制基因启动子区进行了甲基化检测以及突变基因筛选研究。并在组织标本中进行了临床意义的探讨。第二章卵巢癌卡铂耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因的验证目的:筛选卵巢癌卡铂耐药表达谱基因芯片中卡铂耐药细胞系（SKOV3-CB）较其亲本（SKOV3）细胞系差异表达下调的肿瘤抑制基因,并验证其差异表达。方法:应用分子生物信息学方法,分析卵巢癌卡铂耐药表达谱基因芯片中卵巢癌SKOV3-CB细胞系较SKOV3细胞系差异表达下调两倍以上的基因1554条,筛选肿瘤抑制基因。应用real-time PCR技术对基因芯片中差异表达基因检测验证。结果:从卵巢癌卡铂耐药表达谱基因芯片中筛选出RNASET2,VHL,DLG1,COPS2,NOL7,GGNBP2, RBL1, S100A2, PARG1,PERP,TCF3,DNAJA3,PCGF2,ING1,CYLD,RARRES3,RBBP8等17个肿瘤抑制基因,荧光定量PCR技术差异表达验证结果示:RNASET2,VHL, COPS2,NOL7, RBL1, S100A2, PARG1,PERP,TCF3,DNAJA3, ING1,CYLD,RARRES3,RBBP8等基因差异表达下调,下调倍数分别为24.47、65.24、10.81、21.30、72.94、5.95、27.13、1.57、1.32、12.93、46.8、7.57、14.9、14. 00、23.98。GGNBP2,PCGF2,DLG1等基因差异表达上调,上调倍数分别为5.76,2.19,17.1,基因芯片差异表达结果与real-time PCR所验证表达下降趋势的结果一致率为82.35%,下调两倍以上的基因一致率为64.70%。结论:利用基因芯片技术分析基因差异表达结合real-time PCR对其检测结果验证是一种有效的方法,多肿瘤抑制基因参与卵巢癌卡铂耐药的机制。第三章卵巢癌卡铂耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因甲基化检测目的:探讨卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因启动子区甲基化状态与卵巢癌卡铂耐药表达下调的关系。方法:应用分子生物信息学方法,分析肿瘤抑制基因启动子区CPG岛并设计出引物,采用甲基化特异性PCR（MS-PCR）法或亚硫酸盐测序法（bisulphite sequencing）检测SKOV3-CB、SKOV3中的耐药相关肿瘤抑制基因启动子区甲基化状态。结果:表达下调的14个基因（VHL, COPS2, NOL7,RANSET2, RBL1, S100A2, PARG1, PERP, TCF3, DNAJA3, ING1, RARRES3, RBBP8,CYLD）中,有10个基因（VHL, COPS2, NOL7, RBL1, PARG1, PERP, DNAJA3, ING1, RNASET2,CYLD）启动子区能够设计出引物,其中CYLD未检出结果,后改用亚硫酸盐测序法检测。MS-PCR检测结果显示,SKOV3-CB、SKOV3的ING1、DNAJA3、VHL甲基化引物均能够扩增出产物,未甲基化引物均不能扩增出产物;COPS2、PERP甲基化引物均不能够扩增出产物,未甲基化引物均能够扩增出产物;RNASET2,PARG1、NOL7、RBL1甲基化引物与未甲基化引物均能够扩增出产物,CYLD重亚硫酸盐测序提示在SKOV3-CB及SKOV3细胞系均为未甲基化状态。结论:卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因启动子区无超甲基化,甲基化机制不是引起卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因差异表达下调的原因。第四章卵巢癌卡铂耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因突变检测目的:筛查可能的基因突变,探讨其与卵巢卡铂耐药以及相关肿瘤抑制基因表达下调的关系。方法:以亲本细胞系（SKOV3）为对照,在卵巢癌卡铂耐药细胞系（SKOV3-CB）,应用单链构象多态性分析（SSCP）检测RNASET2,VHL, COPS2, NOL7, PARG1, RBL1, PERP, DNAJA3, ING1, CYLD等10个基因RT-PCR扩增片段的突变。结果:以SKOV3细胞系为对照,在SKOV3-CB细胞系中,SSCP检测发现DNAJA3,PERP基因聚丙烯酰胺电泳带型存在差异;RNASET2,VHL,COPS2, NOL7, PARG1, RBL1,ING1, CYLD等基因未检测到差异带型。经测序发现PERP第三外显子1093,1160,1222位点上分别存在A→G突变;1083位点及1085,1086位点,分别存在T,C,C,碱基缺失。DNAJA3第八个外显子87位点处存在A→T突变。结论:DNAJA3,PERP的基因突变以及PERP基因的碱基缺失与卵巢癌卡铂耐药相关,可能是导致其表达下调的原因,宜进一步深入研究。第五章卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因表达与临床病理的关系的研究目的:探讨卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因表达的临床意义方法:Trizol一步法提取卵巢肿瘤患者卵巢组织总RNA,应用RT-PCR检测85例卵巢组织的RNASET2、VHL、PARG1、CYLD、COPS2、PERP、DNAJA3、ING1、NOL7、RBL1基因mRNA表达,其中卵巢癌49例,卵巢良性组织21例,卵巢正常组织15例。结果: RT-PCR结果显示RNASET2、ING1、PARG 1、RBL1、NOL7基因在正常卵巢组织、卵巢良性肿瘤组织、卵巢癌组织中均有一定程度表达;VHL、PERP、COPS2、CYLD基因在正常卵巢组织、良性肿瘤中、卵巢癌组织中均有一定程度表达,但在部分卵巢癌组织中表达沉默,分别为4（4/49）、3（3/49）、2（2/49）、32（32/49）例;采用Fisher确切概率法统计分析,提示RNASET2、ING1、PARG 1、RBL1、NOL7、VHL、PERP、COPS2基因在卵巢癌中的表达沉默阳性率与在卵巢正常组织及卵巢良性肿瘤中的表达沉默阳性率比较差异无意义。CYLD、DNAJA3基因在卵巢癌中的表达沉默阳性率与在卵巢良性肿瘤组织与正常卵巢组织中的表达沉默阳性率比较差异有显着意义（P分别为0.00、0.00;0.00,0.00）。VHL等10个基因表达与卵巢癌临床病理的关系Fisher确切概率法统计分析,提示CYLD在FIGO I-II与III-IV期存在差异有意义外（P<0.05）,其余基因差异均无意义（P均>0.05）。Log Rank分析发现卵巢癌组织VHL、PERP、CYLD基因表达阳性患者与阴性患者的生存时间比较,差异均无统计学意义（P分别为0.183、0.493、0.271）。COPS2基因表达阳性患者与阴性患者的生存时间比较,差异有统计学意义（P=0.005）。COX回归模型多因素生存分析提示FIGO分期、病理分级进入模型（P分别为0.045、0.028）;淋巴结转移及COPS2、PERP、CYLD、ING1基因表达沉默等参数均未进入模型（P分别为0.907、0.476、0.754、0.728、0.304）。结论:结论CYLD、DNAJA3基因表达沉默可作为卵巢癌与卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织鉴别诊断的一个潜在的指标,COPS2、PERP、CYLD、ING1不能作为卵巢癌独立的预后因素。
黄鑫[9]（2010）在《晚期卵巢上皮癌初次肿瘤细胞减灭术后治疗与预后因素分析》文中进行了进一步梳理卵巢癌的发病率在女性生殖道癌中占第三位,是造成女性生殖道肿瘤患者死亡原因最高的一种肿瘤,具有晚期、难治、复发率高、预后差等特点。卵巢肿瘤可根据起源的细胞类型（上皮、间质或生殖细胞）分类。大多数卵巢恶性肿瘤来源于卵巢上皮（85%-95%）,即上皮性卵巢肿瘤。根据组织类型（浆液性、粘液性、内膜样、透明细胞）可进一步细分。卵巢上皮癌分期按FIGO标准。本文只涉及晚期上皮性卵巢癌,FIGO分期中的Ⅱ-Ⅳ期。全世界每年卵巢癌的发病人数超过140000。各国发病率有差异。在英国,卵巢癌居女性常见恶性肿瘤发病率第4位,是妇科肿瘤的首要致死病因,妇女一生的发病危险为2%。在英国,1988年发病人数为5174人,1998年为6880人。在一些国家卵巢癌的发病率趋于稳定,而在较富裕的国家如芬兰、丹麦、新西兰、美国等,发病率在降低。本研究通过回顾性分析86例晚期上皮性卵巢癌的综合治疗情况,探讨晚期难治性卵巢癌的治疗模式。目的：探讨晚期卵巢上皮性癌的临床特点、治疗方法及影响预后的因素。方法：回顾性分析大连市妇产医院2002年4月至2007年4月期间行初次肿瘤细胞减灭术的86例晚期卵巢上皮性癌患者的临床病理资料,采用SPSS17.0软件,以Kaplan-Meier法计算生存期,应用COX风险比例回归模型分析比较影响患者预后的因素。结果：患者中位年龄45岁,中位生存期38.54-45.46个月。病理分期（FIGO2000）:Ⅱa3例（3.49%）、Ⅱb5例（5.81%）、Ⅱc7例（8.14%）、Ⅲa期21例（24.42%）,Ⅲb期3例（3.49%）,Ⅲc期40例（46.51%）,Ⅳ7例（8.14%）。病理分类：浆液性乳头状囊腺癌56例（65.12%）,粘液性囊腺癌4例（4.65%）,子宫内膜样癌6例（6.98%）,透明细胞癌7例（8.14%）,低分化腺癌9例（10.47%）,混合性癌3例（3.49%）,勃勒纳瘤1例（1.16%）。组织学分级：1级2例,2级29例,3级55例。腹水检出癌细胞者20例。淋巴结转移者53例。86例患者全部接受了初次肿瘤细胞减灭术的治疗,术后配合化疗,其中79例接受单纯静脉化疗,7例接受了腹腔灌注联合静脉化疗。多因素分析表明,卵巢癌患者预后与手术彻底性（P<0.01）、病理分期（P<0.05）和化疗疗程数（P<0.01）相关。结论：提高晚期卵巢上皮性癌患者的疗效、延长其生存期的主要措施是彻底切除肿瘤、明确病理分期和术后规范、足疗程化疗
车志丹[10]（2010）在《70例卵巢上皮性癌复发相关因素的分析》文中提出卵巢癌（ovarian cancer）是女性生殖系统常见肿瘤之一,其中85%-90%约为上皮性癌。由于卵巢处在盆腔深部,早期病变不易发现,故发现后70%已属晚期,加之在手术或联合化疗后仍有50%-80%的患者复发,导致其5年生存率低,死亡率居妇科恶性肿瘤之首。许多因素与卵巢癌复发有关。因此,通过归纳总结并详细分析这些因素与卵巢癌复发的关系,对于制定个体化的治疗方案、改善患者预后、延缓复发时间、提高患者生存率有积极意义。本文对2000年1月至2010年1月吉林大学第一临床医院收治的接受手术治疗的191例卵巢癌患者（其中复发70例）进行回顾性分析,探讨各项临床参数（年龄、临床分期、肿瘤残余灶大小、腹水）、病理参数（病理类型、组织分级、淋巴结清扫）以及化疗（疗程数、新辅助化疗、化疗方案）等与复发性卵巢癌的关系。采用单变量及多变量分析的方法研究各因素与复发的关系:SPSS 11.5统计软件包对复发率进行卡方检验:Kaplan-Meier法进行生存分析,多变量分析采用Cox回归分析。P<0.05有统计学意义。结果表明:1、单变量分析中,临床分期、肿瘤残余灶大小、组织分级、化疗疗程数以及新辅助化疗为影响卵巢上皮性癌患者复发的因素;多变量分析中,临床分期、肿瘤残余灶大小、组织分级及化疗疗程数为影响患者复发的独立因素。2、卵巢癌临床期别越晚,治疗后复发可能性越大。因此,提高其早期诊断率对于改善患者预后、降低复发率,意义深远。3、对晚期卵巢癌患者,尤其合并腹水者,应用新辅助化疗可提高手术切除率,降低复发率。4、年龄、腹水脱落细胞、病理类型、淋巴结清扫及化疗方案在本研究中与上皮性卵巢癌复发无关。
二、Ⅲ期卵巢上皮癌首次手术治疗彻底性对预后的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Ⅲ期卵巢上皮癌首次手术治疗彻底性对预后的影响（论文提纲范文）
（1）80例铂敏感型复发性卵巢上皮癌无瘤生存期影响因素及预后相关分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 个人简介 |
| 开题、中期及学位论文答辩委员组成 |
（2）新辅助化疗与晚期卵巢上皮癌铂耐药相关性研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 新辅助化疗与晚期卵巢上皮癌铂耐药相关性研究 |
| 研究对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 新辅助化疗与二次复发性卵巢癌铂耐药相关性研究 |
| 研究对象及方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读博士学位期间发表文章 |
| 致谢 |
（3）卵巢上皮癌多药耐药的血清蛋白组学及代谢组学的初步研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 中英文缩略语对照 |
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 卵巢上皮癌多药耐药分子机制研究现况（文献综述） |
| 前言 |
| 1 卵巢上皮癌化疗概述 |
| 1.1 一线化疗药物及方案的选择 |
| 1.2 一线化疗的循证医学证据 |
| 1.3 影响化疗疗效的临床病理因素 |
| 1.4 影响化疗疗效的分子病理因素 |
| 1.5 卵巢上皮癌分子病理分型及对卵巢癌治疗和预后的意义 |
| 2 卵巢癌多药耐药的临床特点 |
| 3 卵巢癌多药耐药的分子机理 |
| 3.1 细胞内有效药物浓度降低的机制 |
| 3.2 DNA 损伤修复异常 |
| 3.3 细胞凋亡的调控改变 |
| 3.4 信号传导通路异常的机制 |
| 3.5 其它机制 |
| 4 多药耐药的分子诊断 |
| 5 卵巢癌多药耐药的治疗 |
| 5.1 卵巢癌多药耐药的分型、治疗目的及原则 |
| 5.2 多药耐药的逆转耐药治疗 |
| 5.3 MDR 的化疗 |
| 5.4 多药耐药的的基因治疗 |
| 5.5 多药耐药的靶向治疗 |
| 6 卵巢上皮癌多药耐药蛋白组学研究 |
| 6.1 蛋白质组学研究定义 |
| 6.2 蛋白组学研究的主要方法及原理 |
| 6.3 蛋白组学研究主要存在问题与可能的解决措施 |
| 6.4 卵巢上皮癌多药耐药差异表达蛋白筛选鉴定现况 |
| 6.5 筛选鉴定与 EOC 多药耐药关联血清差异表达蛋白在阐明其分子机制和临床应用中的价值 |
| 7 卵巢上皮癌多药耐药代谢组学研究 |
| 7.1 代谢组学研究定义 |
| 7.2 代谢组学研究的主要方法与原理 |
| 7.3 代谢组学研究存在的主要问题与可能的解决措施 |
| 7.4 代谢组学在卵巢上皮癌代谢标志物筛选及鉴定中的应用 |
| 7.5 筛选、鉴定与 EOC 多药耐药关联代谢标志物在阐明多药耐药发生的分子机制和临床应用中的价值 |
| 8 与卵巢癌多药耐药相关的血清蛋白组与代谢组学研究存在的问题及本研究的目的 |
| 参考文献 |
| 第二章 EOC 多药耐药血清差异表达蛋白筛选、鉴定及临床验证 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 1.1 临床标本 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要溶液配制 |
| 1.4 主要仪器 |
| 1.5 抗体 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 定量蛋白质组实验操作步骤 |
| 2.2 Western blot 技术验证差异表达蛋白的实验操作步骤 |
| 2.3 ELISA 方法验证差异表达蛋白的实验操作步骤 |
| 2.4 实验原理 |
| 2.5 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 iTRAQ 定量蛋白质组学相关的结果 |
| 3.2 Western blot 验证卵巢上皮癌多药耐药相关血清差异蛋白的表达水平 |
| 3.3 ELISA 验证卵巢上皮癌多药耐药相关血清差异蛋白在临床样本中的表达水平 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 笫三章 卵巢上皮癌多药耐药血清代谢组学初步研究 |
| 前言 |
| 1 材料 |
| 1.1 临床标本 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要溶液配制 |
| 1.4 主要仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 血清小分子代谢物样品的预处理 |
| 2.2 冻干样品的复溶 |
| 2.3 Agilent1290 快速液相色谱分析条件 |
| 2.4 质谱分析条件 |
| 2.5 数据处理 |
| 2.6 统计学分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 四组 EOC 血清样本的临床病理资料对比分析结果 |
| 3.2 血清代谢组学谱差异对比分析结果 |
| 3.3 使用主成分分析对四组样品差异表达代谢谱中两两比较的结果 |
| 3.4 使用统计学方法分析 EOC 铂类耐药相关的血清差异代谢物 |
| 3.5 与 EOC 多药耐药相关的血清代谢化合物与临床病理因素的相关分析 |
| 3.6 血清代谢物判断 EOC 多药耐药预后的单因素 Kaplan-meier 分析 |
| 3.7 血清代谢物诊断 EOC 多药耐药发生的 ROC 和诊断性能分析结果 |
| 3.8 结合 logistic 回归模型建立差异代谢物联合诊断 EOC 多药耐药的 ROC 曲线 |
| 3.9 与 EOC 多药耐药关联的血清代谢物及其差异表达蛋白的关联分析 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 论文创新点 |
| 论文的不足之处 |
（4）miRNA-mRNA差异表达与卵巢癌多药耐药关系的研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 致谢 |
| 中英文主要缩写略语列表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 技术路线 |
| 笫一章 卵巢上皮癌多药耐药分子机制研究现况 |
| 1 卵巢上皮癌化疗概述 |
| 1.1 一线化疗药物及方案的选择 |
| 1.2 一线化疗的循证医学证据 |
| 1.3 影响化疗效果的临床病理因素 |
| 1.4 影响化疗疗效的分子病理因素 |
| 1.5 卵巢上皮癌分子病理分型及对卵巢癌治疗和判断预后的意义 |
| 2 卵巢癌多药耐药的临床特点 |
| 3 卵巢癌多药耐药的分子机理 |
| 3.1 细胞内化疗药物外排的机制 |
| 3.2 细胞内化疗药物代谢解毒增强的机制 |
| 3.3 DNA 损伤与修复的机制 |
| 3.4 信号传导通路障碍的机制 |
| 3.5 细胞凋亡异常的机制 |
| 3.6 其它机制 |
| 4 卵巢癌多药耐药的分子诊断 |
| 5 卵巢癌多药耐药的治疗 |
| 5.1 卵巢癌多药耐药的分型、治疗原则和目的 |
| 5.2 多药耐药的逆转耐药治疗 |
| 5.3 多药耐药的化疗 |
| 5.4 多药耐药的的基因治疗 |
| 5.5 多药耐药的靶向治疗 |
| 6 mRNA 差异表达与卵巢癌多药耐药关系的研究现况 |
| 6.1 差异表达基因 mRNA 筛选鉴定原理与方法 |
| 6.2 卵巢上皮癌多药耐药差异表达基因筛选鉴定现况 |
| 6.3 筛选鉴定出的多药耐药差异表达基因临床应用价值 |
| 7 miRNA 差异表达与卵巢癌多药耐药关系的研究现况 |
| 7.1 miRNA 差异表达筛选鉴定原理与方法 |
| 7.2 靶基因及参与信号网络和基因调控网络生物信息学分析原理与方法 |
| 7.3 卵巢上皮癌多药耐药差异表达 miRNA 筛选鉴定现况 |
| 7.4 筛选鉴定出的多药耐药差异表达 miRNA 临床应用价值 |
| 8 miRNA/mRNA 差异表达与卵巢癌多药耐药关系的研究存在的问题和本研究的目的 |
| 参考文献 |
| 笫二章 卵巢上皮癌多药耐药相关 miRNA 的筛选鉴定及验证 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 临床组织样本收集和保存 |
| 1.2 实验仪器设备 |
| 1.3 试剂及材料 |
| 1.4 实验方法、步骤 |
| 1.5 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 miRNA 芯片样本临床病理资料对比分析结果 |
| 2.2 miRNA 芯片质控分析结果 |
| 2.3 miRNA 表达谱组间对比分析结果 |
| 2.4 与 EOC 多药耐药相关 miRNA 的 QRT-PCR 验证 |
| 2.5 与 EOC 多药耐药发生关联 miRNA 与临床资料分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 笫三章 卵巢上皮癌多药耐药相关 mRNA 的筛选鉴定及验证 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 组织样本收集 |
| 1.2 实验仪器设备 |
| 1.3 主要试剂和材料 |
| 1.4 实验方法、步骤 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 lncRNA 芯片样本临床病理资料对比分析结果 |
| 2.2 lncRNA 芯片质控分析结果 |
| 2.3 mRNA 表达谱组间对比分析结果 |
| 2.4 与 EOC 多药耐药相关 mRNA 的 QRT-PCR 验证 |
| 2.5 与 EOC 多药耐药相关差异 mRNA 的正选择分析 |
| 2.6 与 EOC 多药耐药发生关联 mRNA 与临床资料分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 笫四章 卵巢上皮癌多药耐药相关 miRNA-mRNA 表达的关联分析及临床验证 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法、步骤 |
| 2 结果 |
| 2.1 与 EOC 多药耐药相关关联 miRNA-mRNA 分析结果 |
| 2.2 与 EOC 多药耐药相关关联 miRNA-mRNA 调控网络分析 |
| 2.3 与 EOC 多药耐药相关关联 miRNA-mRNA 生物信息学分析 |
| 2.4 与 EOC 多药耐药相关关联 miRNA-mRNA 的验证 |
| 2.5 与 EOC 多药耐药相关关联 miRNA-mRNA 基因的正选择分析 |
| 2.6 与 EOC 多药耐药发生关联的 miRNA-mRNA 与临床资料分析 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 创新点 |
| 本研究存在的不足之处 |
| 后期实验计划 |
| 附录 |
| 学习期间发表的论文 |
（5）二氢叶酸还原酶与卵巢上皮癌多药耐药关系的研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 卵巢癌多药耐药的研究进展(文献综述) |
| 1.卵巢上皮癌一线化疗模式及存在的问题 |
| 1.1 卵巢上皮癌一线化疗方案选择 |
| 1.2 一线化疗方案总体疗效评价 |
| 1.3 卵巢上皮癌一线化疗存在的问题 |
| 2.卵巢癌多药耐药的概念 |
| 3.卵巢癌多药耐药的临床表现 |
| 4.卵巢癌多药耐药的诊断 |
| 4.1 血清CA125对卵巢癌多药耐药的诊断价值 |
| 4.2 血清HE4对卵巢癌多药耐药的诊断价值 |
| 4.3 其他肿瘤标志物 |
| 5.卵巢癌多药耐药发生的机理 |
| 5.1 卵巢癌多药耐药发生的相关临床病理因素 |
| 5.2 影响卵巢癌一线化疗疗效的相关临床病理因素 |
| 5.3 卵巢癌多药耐药发生的分子机理 |
| 5.3.1 细胞内化疗药物的外排机制 |
| 5.3.2 细胞内化疗药物代谢解毒增加 |
| 5.3.3 细胞内DNA修复增加 |
| 5.3.4 信号传导通路障碍的机制 |
| 5.3.5 细胞凋亡异常的机制 |
| 5.3.6 其它机制 |
| 6.卵巢癌多药耐药的治疗 |
| 6.1 降低卵巢癌多药耐药发生的化疗对策探索 |
| 6.1.1 一线标准方案中加入其它化疗药物的RCT结果 |
| 6.1.2 一线标准方案用药途径改变的RCT结果 |
| 6.1.3 一线标准方案用药时间及强度改变的RCT结果 |
| 6.1.4 一线标准化疗完成后巩固化疗的RCT结果 |
| 6.1.5 术前新辅助化疗的RCT结果 |
| 6.2 卵巢癌多药耐药的预防 |
| 6.3 卵巢癌多药耐药的临床分型及治疗目的 |
| 6.4 卵巢癌多药耐药的手术治疗 |
| 6.4.1 卵巢癌多药耐药患者手术的适应征与禁忌征 |
| 6.4.2 卵巢癌多药耐药患者手术的主要方式与疗效评价 |
| 6.4.3 影响卵巢癌多药耐药患者手术疗效的临床病理因素 |
| 6.5 卵巢癌多药耐药的化疗 |
| 6.5.1 卵巢癌多药耐药患者化疗的适应征与禁忌征 |
| 6.5.2 单纯的CA125升高是否适合化疗 |
| 6.5.3 卵巢癌多药耐药患者化疗的方案选择与疗效评价 |
| 6.5.4 影响卵巢癌多药耐药患者化疗疗效的临床病理因素 |
| 6.6 卵巢癌多药耐药的靶向治疗 |
| 6.6.1 EGFR(表皮生长因子受体)拮抗剂 |
| 6.6.2 血管生长阻滞剂（贝伐单抗等） |
| 6.6.3 信号转导抑制剂 |
| 6.6.4 抗FRA人源化单克隆抗体 |
| 6.6.5 mTOR抑制剂 |
| 6.6.6 PARP抑制剂 |
| 6.6.7 DNA甲基转化酶抑制剂 |
| 6.7 卵巢癌多药耐药的其它治疗 |
| 6.7.1 抗肿瘤MDR基因治疗 |
| 6.7.2 多药耐药的逆转耐药治疗 |
| 7.二氢叶酸还原酶与肿瘤多药耐药关系的研究 |
| 7.1 二氢叶酸还原酶结构与生物学作用 |
| 7.2 二氢叶酸还原酶与肿瘤多药耐药的关系 |
| 7.3 二氢叶酸还原酶抑制剂的研究 |
| 8.本研究的目的和意义 |
| 参考文献 |
| 第二章 卵巢癌组织中二氢叶酸还原酶基因的表达及临床意义 |
| 1.材料及方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 组织标本 |
| 1.1.2 载体及菌株 |
| 1.1.3 实验主要的仪器设备 |
| 1.1.4 主要试剂 |
| 1.1.5 部分试剂的配置 |
| 1.1.6 用具处理 |
| 1.1.7 引物的设计 |
| 1.2 实验方法及步骤 |
| 1.2.1 卵巢组织总RNA提取 |
| 1.2.2 cDNA合成 |
| 1.2.3 DHFR及GAPDH基因扩增(RT—PCR) |
| 1.2.4 PCR产物的纯化与回收 |
| 1.2.5 回收的PCR产物与EZ-Blunt载体连接 |
| 1.2.6 感受肽大肠杆菌DH-5α的制备 |
| 1.2.7 连接产物转化至感受态DH-5α |
| 1.2.8 挑选阳性克隆 |
| 1.2.9 质粒DNA小提 |
| 1.2.10 检测连接是否成功 |
| 1.2.10.1 PCR法 |
| 1.2.10.2 测序 |
| 1.2.11 测序结果序列分析 |
| 1.2.12 制备标准品 |
| 1.2.13 实时荧光定量PCR |
| 1.2.14 数据整理 |
| 1.2.15 统计分析 |
| 1.2.16 PCR检测基因突变 |
| 2.结果 |
| 2.1 DHFR基因和重组GAPDH基因质粒构建结果 |
| 2.2 实时荧光定量PCR检测卵巢癌DHFR mRNA的标准曲线与融解曲线的建立 |
| 2.3 DHFR测定的实时荧光扩增熔解曲线 |
| 2.4 各类卵巢组织中DHFR mRNA表达量的比较 |
| 2.5 卵巢癌组织中DHFR mRNA表达量与其临床病理因素的关系 |
| 2.6 卵巢癌患者组织中DHFR mRNA表达量与其转移关系 |
| 2.7 卵巢癌组织DHFR mRNA表达含量及其治疗疗效和耐药的相关性 |
| 2.8 卵巢癌组织中DHFR mRNA表达与其预后的关系 |
| 2.9 PCR检测耐药患者及敏感患者的基因突变 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 二氢叶酸还原酶基因表达上调对卵巢上皮癌细胞生物学特性的影响的体外实验研究 |
| 1.材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1质粒与菌株、细胞 |
| 1.1.2 主要试剂 |
| 1.1.3 仪器 |
| 1.1.4 试剂的配制 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 DHFR慢病毒表达系统的构建 |
| 1.2.1.1 DHFR全长的扩增及回收 |
| 1.2.1.2 PCR产物的纯化和回收 |
| 1.2.1.3 DHFR的定量 |
| 1.2.1.4 载体的准备 |
| 1.2.1.4.1 PmeI酶切pWPI |
| 1.2.1.4.2 pWPI去磷酸化 |
| 1.2.1.5 DHFR与pWPI的连接 |
| 1.2.1.6 连接产物转化大肠杆菌DH-5α |
| 1.2.1.7 挑选阳性克隆 |
| 1.2.1.8 重组质粒的初步鉴定 |
| 1.2.1.9 质粒DNA的提取 |
| 1.2.1.10 重组质粒的PCR鉴定 |
| 1.2.1.11 重组质粒的测序 |
| 1.2.1.12 测序结果的序列分析 |
| 1.2.2 DHFR-pWPI转染293T细胞 |
| 1.2.3 病毒滴度测定 |
| 1.2.4 不同卵巢癌细胞株DHFR的表达量 |
| 1.2.5 病毒颗粒感染SKOV3细胞 |
| 1.2.6 转染效率的检测 |
| 1.2.7 慢病毒介导SKOV3细胞DHFR表达前后细胞中DHFR含量的变化 |
| 1.2.7.1 荧光定量PCR(2~(-△△Ct)法)检测三组细胞中DHFR的含量 |
| 1.2.7.2 Western Blot检测三组细胞中DHFR的含量 |
| 1.2.8 慢病毒介导SKOV3细胞DHFR表达前后细胞耐药性的生物学影响实验 |
| 1.2.8.1 MTT法检测IC50 |
| 1.2.8.2 不同药物浓度、不同时间段的凋亡变化 |
| 1.2.8.3 IC50顺铂浓度6.0(Vg/mO不同时间段的周期变化 |
| 1.2.8.4 不同药物浓度.不同时间段的细胞内外的铂类药物浓度变化 |
| 1.2.8.5 不同时间段的IC50药物浓度的超微结构变化 |
| 2.结果 |
| 2.1 重组质粒DHFR-pWPI PCR电泳结果 |
| 2.2 重组质粒DHFR-pWPI PCR测序结果 |
| 2.3 不同卵巢癌细胞株DHFR的表达量 |
| 2.4 DHFR-pWPI转染293T细胞结果 |
| 2.5 病毒滴度测定结果 |
| 2.6 病毒颗粒转染SKOV3细胞 |
| 2.7 转染效率的检测 |
| 2.8 慢病毒介导SKOV3细胞DHFR表达前后细胞中DHFR含量的变化 |
| 2.9 慢病毒介导SKOV3细胞DHFR表达前后细胞耐药性的生物学影响实验 |
| 2.9.1 MTT法检测IC50 |
| 2.9.2 不同药物浓度.不同时间段的凋亡变化 |
| 2.9.3 IC50顺铂浓度(6.0μg/ml)不同时间段的周期变化 |
| 2.9.4 不同药物浓度.不同时间段的细胞内外的铂类药物浓度变化 |
| 2.9.5 不同时间段的IC50药物浓度的超微结构变化 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 siRNA沉默DHFR基因对卵巢上皮癌生物学特性影响体外实验研究 |
| 第一节 RNA干扰质粒载体的构建及鉴定 |
| 1 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 干扰细胞系的选择 |
| 1.2.2 脂质体介导的DHFR-siRNA的转染 |
| 1.2.3 构建DHFR-pGPU6载体重组质粒 |
| 1.2.4 DHFR-pGPU6-768转染SKOV3细胞 |
| 1.2.5 携带干扰重组质粒的SKOV3细胞的筛选 |
| 1.2.6 携带干扰重组质粒的SKOV3细胞的克隆 |
| 1.2.7 RT-PCR及western-blot检测干扰效果的表达 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同种类卵巢癌细胞的DHFR基因表达情况 |
| 2.2 转染条件的确定 |
| 2.3 DHFR-pGPU6-768siRNA表达载体构建结果 |
| 2.4 DHFR-pGPU6-768载体转染SKOV3细胞结果 |
| 2.5 荧光PCR检测干扰后三种不同细胞株的DHFR表达量 |
| 2.6 DHFR-pGPU6-768-SKOV3和pGPU6-SKOV3细胞筛选 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 第二节 DHFR慢病毒干扰载体的构建及其在卵巢上皮癌细胞中的生物学特性影响 |
| 1 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 质粒与菌株、细胞 |
| 1.1.1.1 质粒 |
| 1.1.1.2 试剂 |
| 1.1.1.3 仪器 |
| 1.2 实验方法及步骤 |
| 1.2.1 实验总流程 |
| 1.2.1.1 siRNA 靶点设计 |
| 1.2.1.2 合成单链DNA oligo |
| 1.2.1.3 引物退火形成带双链DNA oligo |
| 1.2.1.4 pGCSIL/GFP质粒载体的线性化 |
| 1.2.2 重组pGCSIL/GFP质粒载体的构建和扩增 |
| 1.2.3 DHFR-PGCSIL/GFP转染 |
| 1.2.4 病毒滴度测定 |
| 1.2.5 不同卵巢癌细胞株DHFR的表达量 |
| 1.2.6 病毒颗粒感染SKOV3细胞 |
| 1.2.6.1 MOI值的预测 |
| 1.2.6.2 感染步骤 |
| 1.2.6.3 转染效率的检测 |
| 1.2.7 慢病毒干扰SKOV3细胞DHFR表达前后细胞中DHFR含量的变化 |
| 1.2.7.1 荧光定量PCR(2~(-△△Ct)法)检测三组细胞中DHFR的含量 |
| 1.2.7.2 Western Blot检测三组细胞中DHFR的含量 |
| 1.2.8 慢病毒干扰SKOV3细胞DHFR表达前后细胞耐药性的生物学影响实验 |
| 1.2.8.1 MTT法检测IC50 |
| 1.2.8.2 不同药物浓度.不同时间段的凋亡变化 |
| 1.2.8.3 IC50顺铂浓度(4.4μg/ml)不同时间段的周期变化 |
| 1.2.8.4 不同时间段的IC50药物浓度的超微结构变化 |
| 1.2.8.5 不同药物浓度.不同时间段的细胞内外的铂类药物浓度变化 |
| 1.3 统计学方法 |
| 2.结果 |
| 2.1 pGCSIL/GFP质粒载体酶切图及构建图 |
| 2.2 RNAi重组质粒测序结果 |
| 2.3 慢病毒包装图及病毒滴度的测定 |
| 2.4 病毒颗粒感染SKOV3细胞 |
| 2.5 不同卵巢癌细胞株DHFR的表达量 |
| 2.6 转染效率的检测 |
| 2.7 慢病毒干扰SKOV3细胞DHFR表达前后细胞中DHFR含量的变化 |
| 2.8 慢病毒干扰SKOV3细胞DHFR表达前后细胞耐药性的生物学影响实验 |
| 2.8.1 MTT法检测不同时间段的IC50 |
| 2.8.2 不同药物浓度.不同时间段的凋亡变化 |
| 2.8.4 IC50顺铂浓度(4.4μg/ml)不同时间段的周期变化 |
| 2.8.5 不同时间段的IC50药物浓度的超微结构变化 |
| 2.8.6 不同药物浓度.不同时间段的细胞内外的铂类药物浓度变化 |
| 3.讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 全文创新点 |
| 本研究存在的问题 |
| 第五章 二氢叶酸还原酶与卵巢癌多药耐药关系研究的进一步计划 |
| 1.立题依据 |
| 2.研究内容 |
| 3.技术路线 |
| 4.本项目的特色与创新之处 |
| 5.研究的基础与可行性 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（6）卵巢上皮癌规范化治疗后复发的临床早期诊断的循证医学研究（论文提纲范文）
| 目录 |
| 致谢 |
| 第一部分 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第二部分 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第三部分 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 第四部分 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩写 |
| 第一章 卵巢上皮癌规范化治疗后复发的诊治研究现况(综述) |
| 1、复发卵巢上皮癌的定义 |
| 2、导致卵巢上皮癌规范化治疗后复发的相关临床病理因素 |
| 2.1 临床分期与卵巢上皮癌复发的关系 |
| 2.2 组织学分级与卵巢上皮癌复发的关系 |
| 2.3 病理类型与卵巢上皮癌复发的关系 |
| 2.4 术后残留灶与卵巢上皮癌复发的关系 |
| 3、复发卵巢上皮癌的临床表现 |
| 3.1 血清 CA125 或 CA199 升高 |
| 3.2 体检发现肿块 |
| 3.3 影像学检查发现肿块 |
| 3.4 出现胸腹水 |
| 3.5 不明原因肠梗阻 |
| 4、复发卵巢上皮癌的诊断 |
| 4.1 CA125 |
| 4.2 HE4 |
| 4.3 其它肿瘤标志物 |
| 4.4 影像学检查对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断价值 |
| 4.4.1 B 超 |
| 4.4.2 CT |
| 4.4.3 MRI |
| 4.4.4 PET/CT |
| 4.5 卵巢上皮癌复发的可能分子机制及分子病理诊断 |
| 4.5.1 致癌基因与卵巢癌的关系 |
| 4.5.2 抑癌基因与卵巢癌的关系 |
| 5、复发卵巢上皮癌的分类及临床特征 |
| 6、复发卵巢上皮癌的治疗目标及方案选择原则 |
| 7、复发卵巢上皮癌的手术治疗 |
| 7.1 手术的适应证与禁忌证 |
| 7.2 手术的目标与要求 |
| 7.3 手术的疗效评价 |
| 7.4 影响复发卵巢上皮癌的手术治疗疗效的临床病理因素 |
| 8、复发卵巢上皮癌的化疗 |
| 8.1 化疗的适应证与禁忌证 |
| 8.2 化疗的药物与方案选择 |
| 8.3 化疗的疗效评价 |
| 8.4 影响复发卵巢上皮癌的化疗疗效的临床病理因素 |
| 9、复发卵巢上皮癌的其它治疗 |
| 9.1 放射治疗 |
| 9.2 生物及靶向治疗 |
| 10、复发卵巢上皮癌诊治中存在的问题及对策 |
| 11、本研究的目的和意义 |
| 参考文献 |
| 第二章 血清 CA125 检测对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断的价值及对治疗疗效的影响 |
| 1. 前言 |
| 2. 资料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 血清 CA125 检测对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断的 Meta 分析 |
| 1. 前言 |
| 2. 资料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 影像学检查（B 超、CT）对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断的价值 |
| 1. 前言 |
| 2. 资料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 影像学检查（B 超、CT、MRI、PET/CT）对卵巢上皮恶性肿瘤治疗后复发诊断价值的 Meta 分析 |
| 1. 前言 |
| 2. 资料与方法 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 参考文献 |
| 全文小结 |
| 论文创新点 |
| 本研究存在的问题和进一步研究的初步设想 |
（7）卵巢上皮癌手术相关问题临床及循证医学研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 英文略写缩词列表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 卵巢.上皮癌手术治疗临床研究现况 |
| 1 卵巢上皮癌概况 |
| 1.1 卵巢上皮癌发病因素的流行病学研究. |
| 1.2 卵巢上皮癌发病的可能分子生物学机制 |
| 1.3 卵巢上皮癌诊断的主要手段 |
| 1.3.1 肿瘤标志物检测对卵巢上皮癌诊断与病程监测的临床价值 |
| 1.3.2 影像学检测对卵巢上皮癌诊断与病程监测的临床价值 |
| l.4 卵巢上皮癌FIGO 手术一病理分期 |
| 1.4.1 分期的内容 |
| 1.4.2 分期循证依据 |
| l.4.3 分期对治疗决策的影响 |
| 2 卵巢上皮癌各期别的治疗原则与模式，治疗目地，主要治疗手段及临床循证依据 |
| 2.1 卵巢仁皮癌各期别的治疗原则、模式及循证依据 |
| 2.1.1 早期卵巢卜皮性癌 |
| 2.1.2 晚期卵巢上皮性癌 |
| 3 卵巢上皮癌手术治疗现况 |
| 3.1 全面的分期手术 |
| 3.1.1 定义及手术内容 |
| 3.1.2 原理 |
| 3.1.3 个面分期手术对疗效及预后的影响 |
| 3.2 理想的种瘤减火术 |
| 3.2.1 走义及乒术内容 |
| 3.2.2 原理及循证医学证据 |
| 3.2.3 理想的肿瘤细胞减火术对疗效及预后的影响 |
| 3.3 中间性”肿瘤减灭术 |
| 3.3.1 走义及乒术内容 |
| 3.3.2 原理及循证医学证据 |
| 3.3.3 理想的肿瘤细胞减火术对疗效及预后的影响 |
| 3.4 膜膜后淋巴结清扫 |
| 3.4.1 卵巢癌后腹腔淋巴结清扫的原理及抓证医学证据 |
| 3.4.2 FIGO，NCCN 和CGOGC 对卵巢癌后膜腔淋巴结清扫的指导意见及循证医学证据 |
| 3.4 3 卵巢癌后膜腔淋巴结清扫的临床价值 |
| 3.5 卵巢癌的再分期手术 |
| 3.5.1 卵巢癌的再分期手术的定义及原理 |
| 3.5.2 卵巢癌的再分期手术的内容及临床价值 |
| 3.6 卵巢癌肠道转移灶的手术 |
| 3.6.1 原理及彻证医学证据 |
| 3.6.2 卵巢癌肠道转移灶的手术临床价值 |
| 3.7 卵巢癌上腹部转移灶的手术.. |
| 3.7.1 原理及循证医学证据 |
| 3.7.2 卵粱癌1 几月硬部转移灶乒术的内容及注意事项 |
| 3.7.3 卵巢癌上腹部转移灶手术的临床价值 |
| 4 卵巢癌腹腔外转移灶的手术临床价值 |
| 5 卵巢癌保留生育手术 |
| 5.1 卵巢上皮癌保留生育治疗手术的指征 |
| 5.2 卵巢上皮癌保留生育治疗手术应用的临床价值 |
| 5.3 卵巢非上皮癌保留生育治疗手术的指征 |
| 5.4 卵巢非上皮癌保留生育治疗手术应用的临床价值 |
| 6 循证医学与卵巢癌手术 |
| 6.1 矾证医学的概念、分类及分级 |
| 6 2 循证医学对卵巢癌下术决策的影响 |
| 6.2.1 对早卵巢癌全面分析手术的影响 |
| 6.2.3 对晚期卵巢上皮痈肿瘤细胞减灭术的影响 |
| 6.2.4 对二次剖腹探查术的影响 |
| 6.2.5 对间隔性减瘤的影响 |
| 6.2.6 对腹膜后淋巴结切除的影响 |
| 6.2.7 对保留生育功能的影响 |
| 7 卵巢癌手术目前存在的问题和本研究的目地 |
| 参考文献 |
| 第二章 影响卵巢上皮性癌手术治疗的临床病理多因素分析 |
| 1、前言 |
| 2、材料与方法 |
| 2.1 研宄对象 |
| 2.2 治疗情况 |
| 2.3 随访情况 |
| 2.4 统计学方法 |
| 3、结果 |
| 3.1 卵巢上皮性癌患者的生存情况 |
| 3.2 影响卵巢癌手术治疗疗效的多因素分忻 |
| 3.3 影日向卵巢癌手术治疗疗效的单因素分析 |
| 3.3.1 手术病理分期 |
| 3.3.2 病理类型 |
| 3.3.3 组织学分级 |
| 3.3.4 肿瘤细胞减灭术程度 |
| 3.3.5 淋巴结切除 |
| 3.3.6 淋巴结转移 |
| 3.3.7 火网膜切除 |
| 3.3.8 肠切除 |
| 3.3.9 阑尾切除 |
| 3.3.1O 横隔受累 |
| 3.3.11 新辅助化疗 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 腹后腔淋巴结清扫对卵巢癌患者预后影响的 Meta 分析 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究(检索)方法 |
| 2.2 资料选择标准 |
| 2.3 资料的收集和方法学质量评估 |
| 2.4 资料提取 |
| 2.5 统计学处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 纳入研究的一般情况 |
| 3.2 纳入文献的质量评价 |
| 3.3 结局测量指标 |
| 3.4 统计分析结果 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 卵巢癌膈下病灶手术处理对预后影响的循证评价 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究(检索)办法 |
| 2.2 资料选择标准 |
| 3 结果 |
| 3.1 文献检索结果 |
| 3.2 循证评价结果 |
| 3.2.1 膈肌手术并发症 |
| 3.2.2 膈肌下术时间和住院时叫比较 |
| 3.2.3 不同膈肌手术方式对预后的影响 |
| 3.2.4 原发与复发患者膈肌手术的比较 |
| 3 2.5 腑肌手术组及膈肌木手术组比较 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 卵巢癌手术中肠道病灶处理对预后影响的循证评价 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 研究(榆索)方法 |
| 2.2 资利选择杯准 |
| 3 结果 |
| 3.1 文献检索结果榆糸结果 |
| 3.2 循征评价结果 |
| 3.2.1 初次减瘤手术中肠切除并发症的比较 |
| 3.2.2 初次减瘤手术肠切除的手术时间、出血量、住院时间 |
| 3.2.3 减瘤术中肠切除手术后肛门排气时间比较 |
| 3.2.4 初次减瘤术中肠切除手术除与不切除预后比较 |
| 3.2.5 肠切除手术减瘤程度与预后比较 |
| 3.2.6 肠管浸润深度与预后比较 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第六章 卵巢癌再分期手术临床价值的循证评价 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2 l 研究(检索)方法 |
| 2.2 资料选择标准 |
| 3 结果 |
| 3.1 文献检索结果 |
| 3.2 循证评价结果 |
| 3.2.1 再分期后情况 |
| 3.2.2 再分期后阳性部位 |
| 3.2.3 再分期手术相关并发症 |
| 4 讨论 |
| 参考文献 |
（8）卵巢癌耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因的验证与结构和表型变化研究（论文提纲范文）
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 卵巢上皮恶性肿瘤多药耐药研究现况(文献综述) |
| 1 卵巢恶性肿瘤概述 |
| 1.1 卵巢癌的发病情况简述 |
| 1.1.1 卵巢癌的发病率及生存率 |
| 1.1.2 流行病学与致病因素 |
| 1.2 卵巢上皮恶性肿瘤的主要临床表现及诊断 |
| 1.2.1 肿瘤标志物 |
| 1.2.2 影像学检查 |
| 1.2.3 细胞学检查 |
| 1.2.4 腹腔镜探查术 |
| 1.2.5 联合诊断 |
| 1.3 卵巢上皮性癌一线常规治疗现况 |
| 1.3.1 卵巢癌手术治疗的研究近况 |
| 1.3.1.1 早、中期卵巢癌的手术治疗现状 |
| 1.3.1.1.1 全面分期手术的定义与价值 |
| 1.3.1.1.2 早期卵巢癌的手术切除范围及注意事项 |
| 1.3.1.1.3 阑尾切除在卵巢上皮性癌治疗中的价值 |
| 1.3.1.1.4 大网膜切除在卵巢癌治疗中的价值 |
| 1.3.1.1.5 腹膜后淋巴结清扫在卵巢癌治疗中的价值 |
| 1.3.1.1.6 卵巢癌的保守性手术现状 |
| 1.3.1.1.6.1 保守性手术的适应症与禁忌症 |
| 1.3.1.1.6.2 保守性手术的手术范围 |
| 1.3.1.1.6.3 保守性手术的价值 |
| 1.3.2 晚期卵巢癌的手术治疗现状 |
| 1.3.2.1 肿瘤细胞减灭术的原由及范围 |
| 1.3.2.2 肿瘤细胞减灭术的注意事项 |
| 1.3.2.3 影响肿瘤细胞减灭术的因素及在晚期卵巢癌临床治疗中的价值 |
| 1.3.2.4 复发卵巢癌的手术治疗 |
| 1.3.2.4.1 手术的目的与意义 |
| 1.3.2.4.2 手术的适应症,禁忌症及范围 |
| 1.3.2.4.3 影响手术效果的预后因素 |
| 1.3.3 化疗 |
| 1.3.3.1 一线化疗药物及方案的选择 |
| 1.3.3.1.1 一线化疗的指征 |
| 1.3.3.1.2 一线化疗药物以及方案的选择 |
| 1.3.3.2 腹腔化疗 |
| 1.3.3.3 维持或巩固化疗的临床价值 |
| 1.3.3.4 新辅助化疗 |
| 1.3.3.5 影响化疗疗效的临床病理因素 |
| 1.3.3.5.1 FIGO 分期 |
| 1.3.3.5.2 病理类型 |
| 1.3.3.5.3 残余灶的大小 |
| 1.3.3.5.4 化疗的用药剂量 |
| 1.3.3.5.5 肿瘤细胞产生耐药性 |
| 1.3.3.5.6 其它因素 |
| 1.3.4 影响腹腔化疗临床应用的因素 |
| 1.3.5 影响化疗疗效的分子病理因素 |
| 1.4 生物治疗 |
| 1.4.1 免疫治疗 |
| 1.4.2 过继性免疫治疗 |
| 1.4.3 抗体 |
| 1.4.4 细胞因子 |
| 1.4.5 肿瘤疫苗 |
| 1.5 基因治疗 |
| 1.5.1 自杀基因治疗 |
| 1.5.2 癌基因与抑癌基因治疗 |
| 1.5.3 免疫基因治疗 |
| 1.5.4 耐药基因治疗 |
| 1.5.5 抗肿瘤血管生成基因治疗 |
| 2 卵巢上皮恶性肿瘤的多药耐药 |
| 2.1 卵巢上皮恶性肿瘤多药耐药的原因及机理 |
| 2.1.1 卵巢癌多药耐药的分子机理 |
| 2.1.1.1 细胞内化疗药物浓度降低 |
| 2.1.1.2 P-糖蛋白 |
| 2.1.1.3 多药耐药相关蛋白 |
| 2.1.1.4 肺耐药蛋白 |
| 2.1.1.5 乳腺耐药蛋白 |
| 2.1.2 细胞内化疗药物代谢解毒增加 |
| 2.1.3 DNA 损伤修复能力增加 |
| 2.1.4 抗凋亡能力增加 |
| 2.1.5 p53 基因突变 |
| 2.1.6 信号传导通路 |
| 2.1.7 其它机制 |
| 2.1.7.1 细胞间连接 |
| 2.1.7.2 DNA 聚合酶 |
| 2.1.7.3 ATP7B |
| 2.2 卵巢上皮恶性肿瘤多药耐药的诊断 |
| 2.2.1 卵巢癌多药耐药的诊断 |
| 2.2.1.1 MDR-1 基因 |
| 2.2.1.2 肺耐药蛋白 |
| 2.2.1.3 GST-π |
| 2.2.1.4 mtP53 |
| 2.2.1.5 c-erbB-2 基因(HER-2 基因) |
| 2.2.1.6 DNA 错配修复基因 |
| 2.2.1.7 ATP7B |
| 2.2.1.8 多药耐药基因 SNPs 的检测 |
| 2.2.1.9 细胞凋亡相关基因 |
| 2.2.1.10 多基因联合检测在诊断多药耐药的价值 |
| 2.3 卵巢上皮恶性肿瘤多药耐的治疗 |
| 2.3.1 卵巢癌多药咐药的分型及治疗原则和目的 |
| 2.3.1.1 卵巢癌多药耐药的分型 |
| 2.3.1.2 卵巢癌多药耐药的治疗原则 |
| 2.3.1.3 治疗的目标及价值 |
| 2.3.2 多药耐药的化疗 |
| 2.3.2.1 二线化疗药物及方案的选择及疗效评价 |
| 2.3.2.2 顽固型卵巢癌的治疗 |
| 2.3.2.3 耐药型和难治型卵巢癌的治疗 |
| 2.3.2.4 影响二线化疗疗效的主要因素 |
| 2.3.2.5 常规化疗药物疗效预测分子靶向化疗 |
| 2.3.2.6 自体骨髓移植加大剂量化疗在卵巢癌多药耐药治疗中的应用 |
| 2.3.3 多药耐药的逆转耐药治疗 |
| 2.3.3.1 反义核酸技术 |
| 2.3.3.2 反义 RNA 技术 |
| 2.3.3.3 RNA 干涉技术 |
| 2.3.3.4 核酶基因转移技术 |
| 2.3.3.5 细胞因子基因逆转技术 |
| 2.3.3.6 针对 P-gp 的增敏治疗 |
| 2.3.3.7 针对 MRP 的增敏治疗 |
| 2.3.3.8 针对 BCRP 的增敏剂 |
| 2.3.4 多药耐药的手术治疗 |
| 2.3.5 多药耐药的的基因治疗 |
| 2.3.5.1 药物敏感基因 |
| 2.3.5.2 肿瘤免疫基因治疗 |
| 2.3.5.3 骨髓细胞修饰 |
| 2.3.6 多药耐药的综合治疗方案筛选及临床验证 |
| 2.3.6.1 单克隆抗体 |
| 2.3.6.2 腺病毒载体 |
| 2.3.6.3 中药治疗 |
| 2.3.6.4 亚致死量陡脉冲 |
| 3 卵巢上皮癌多药耐药差异表达基因研究现况 |
| 3.1 卵巢上皮癌多药耐药差异表达基因筛选鉴定技术 |
| 3.1.1 基因芯片技术 |
| 3.1.2 DDRT-PCT |
| 3.1.3 比较基因组杂交法 |
| 3.1.4 表达序列标签 |
| 3.1.5 基因表达的系列分析 |
| 3.1.6 消减杂交基因克隆技术 |
| 3.1.7 差异显示技术衍生的方法 |
| 3.1.8 差异基因的鉴定技术 |
| 3.2 卵巢上皮癌多药耐药差异表达基因筛选鉴定现况及临床价值 |
| 3.2.1 基因芯片应用 |
| 3.3 卵巢上皮癌多药耐药差异表达基因筛选鉴定存在问题 |
| 4 卵巢上皮癌多药耐药与基因甲基化的关系 |
| 4.1 基因甲基化的定义及主要检测手段 |
| 4.1.1 基因甲基化定义 |
| 4.1.2 主要检测手段 |
| 4.1.2.1 高效液相色谱柱(HPLC)及相关方法 |
| 4.1.2.2 SssI 甲基转移酶法 |
| 4.1.2.3 免疫化学法 |
| 4.1.2.4 氯乙醛法 |
| 4.1.2.5 特异性位点的 DNA 甲基化的检测 |
| 4.1.2.5.1 甲基化敏感性限制性内切酶法 |
| 4.1.2.5.2 直接测序法 |
| 4.1.2.5.3 甲基化特异性的 PCR |
| 4.1.2.5.4 甲基化敏感性单核苷酸引物延伸 |
| 4.1.2.5.5 结合重亚硫酸盐的限制性内切酶法 |
| 4.1.2.5.6 甲基化敏感性单链构象分析 |
| 4.1.2.5.7 甲基化敏感性变性梯度凝胶电泳 |
| 4.1.2.5.8 荧光法 |
| 4.1.2.5.9 DNA 微阵列法 |
| 4.1.2.5.10 甲基化敏感性斑点分析 |
| 4.1.2.5.11 甲基化特异性多连接依赖性探针扩增 |
| 4.2 卵巢上皮癌多药耐药与基因甲基化的关系 |
| 4.3 卵巢上皮癌多药耐药基因甲基化检测的临床意义 |
| 4.3.1 治疗反应的标志物 |
| 4.3.2 化疗耐药和预后 |
| 5 卵巢上皮癌多药耐药与基因突变的关系 |
| 5.1 基因突变的定义及主要检测手段 |
| 5.1.1 基因突变的定义 |
| 5.1.2 基因突变主要检测手段 |
| 5.1.2.1 直接 DNA 序列分析法 |
| 5.1.2.2 单链构象多态性分析技术 |
| 5.1.2.3 温度梯度凝胶电泳分析 |
| 5.1.2.4 变性梯度凝胶电泳分析 |
| 5.1.2.5 变性高效液相色谱 |
| 5.1.2.6 异源双链分析 |
| 5.1.2.7 核酸分子杂交 |
| 5.1.2.8 核糖核酸酶切法 |
| 5.1.2.9 限制性内切酶酶谱分析 |
| 5.1.2.10 蛋白截短试验 |
| 5.1.2.11 聚合酶链反应—限制性片段长度多态性分析 |
| 5.1.2.12 等位基因特异性扩增法 |
| 5.1.2.13 等位基因特异性寡核苷酸分析法 |
| 5.1.2.14 毛细管电技术 |
| 5.2 卵巢上皮癌多药耐药与基因突变的关系 |
| 5.3 卵巢上皮癌多药耐药基因突变检测的临床意义 |
| 参考文献 |
| 第二章 卵巢上皮癌卡铂耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因的验证 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 卵巢上皮癌卡铂耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因甲基化检测 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 卵巢上皮癌卡铂耐药细胞与非耐药细胞筹异表达基因突变检测 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 第五章 卵巢癌卡铂耐药相关肿瘤抑制基因表达与临床病理的关系研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（9）晚期卵巢上皮癌初次肿瘤细胞减灭术后治疗与预后因素分析（论文提纲范文）
| 一、摘要 |
| (一) 中文摘要 |
| (二) 英文摘要 |
| 二、文献综述 |
| (一) 综述 |
| (二) 参考文献 |
| 三、正文 |
| (一) 前言 |
| (二) 材料和方法 |
| (三) 结果 |
| (四) 讨论 |
| (五) 结论 |
| (六) 参考文献 |
| 四、致谢 |
（10）70例卵巢上皮性癌复发相关因素的分析（论文提纲范文）
| 内容提要 |
| 英文缩略词 |
| 第1章 前言 |
| 第2章 综述 |
| 2.1 遗传因素与卵巢上皮性癌复发的关系 |
| 2.2 临床参数与卵巢上皮性癌复发的关系 |
| 2.3 病理参数与卵巢上皮性癌复发的关系 |
| 2.4 化学药物治疗与卵巢上皮性癌复发的关系 |
| 2.5 术后辅助性放疗与卵巢上皮性癌复发的关系 |
| 2.6 分子生物学指标与卵巢上皮性癌复发的关系 |
| 第3章 材料与方法 |
| 3.1 研究对象 |
| 3.2 病例特点 |
| 3.3 临床分期 |
| 3.4 病理类型 |
| 3.5 组织学分级 |
| 3.6 手术方法 |
| 3.7 腹水脱落细胞检测 |
| 3.8 化疗方法 |
| 3.9 随访 |
| 3.10 研究方法 |
| 第4章 结果 |
| 4.1 复发状况 |
| 4.2 单变量分析卵巢上皮性癌复发的影响因素 |
| 4.3 多变量分析卵巢上皮性癌复发的影响因素 |
| 第5章 讨 论 |
| 5.1 临床参数对于卵巢上皮性癌患者复发的影响 |
| 5.2 病理参数对于卵巢上皮性癌患者复发的影响 |
| 5.3 化学药物治疗对于卵巢上皮性癌患者复发的影响 |
| 第6章 结论 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 |
| 致谢 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 导师及作者简介 |
四、Ⅲ期卵巢上皮癌首次手术治疗彻底性对预后的影响（论文参考文献）
- [1]80例铂敏感型复发性卵巢上皮癌无瘤生存期影响因素及预后相关分析[D]. 王梦瑶. 宁夏医科大学, 2020(08)
- [2]新辅助化疗与晚期卵巢上皮癌铂耐药相关性研究[D]. 高珍珍. 中国人民解放军医学院, 2016(02)
- [3]卵巢上皮癌多药耐药的血清蛋白组学及代谢组学的初步研究[D]. 吴文娟. 广西医科大学, 2014(11)
- [4]miRNA-mRNA差异表达与卵巢癌多药耐药关系的研究[D]. 刘玲. 广西医科大学, 2014(10)
- [5]二氢叶酸还原酶与卵巢上皮癌多药耐药关系的研究[D]. 李状. 广西医科大学, 2012(09)
- [6]卵巢上皮癌规范化治疗后复发的临床早期诊断的循证医学研究[D]. 计峰. 广西医科大学, 2012(02)
- [7]卵巢上皮癌手术相关问题临床及循证医学研究[D]. 覃金春. 广西医科大学, 2011(08)
- [8]卵巢癌耐药细胞与非耐药细胞差异表达基因的验证与结构和表型变化研究[D]. 唐兆前. 广西医科大学, 2010(08)
- [9]晚期卵巢上皮癌初次肿瘤细胞减灭术后治疗与预后因素分析[D]. 黄鑫. 大连医科大学, 2010(12)
- [10]70例卵巢上皮性癌复发相关因素的分析[D]. 车志丹. 吉林大学, 2010(09)