一、补肾方药对地塞米松所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的影响（论文文献综述）
朱珍,顾江红[1]（2011）在《补肾中药与围绝经期女性激素的研究进展》文中进行了进一步梳理女性围绝经期综合征是指妇女从生育期向老年期的过渡时期,由于性激素减少可引起一系列躯体及精神心理症状。缓解和治疗这时期的各种症状补肾中药有其优势。作者从补肾中药对围绝经期女性激素的影响阐述补肾中药治疗围绝经期症状的有效性和优势。
王剑[2]（2011）在《基于Runx2相关基因表达级联调控对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾虚证候病机的研究》文中指出目的:通过体内实验,基于成骨分化特异调控基因Runx2相关基因表达级联调控,探讨糖皮质激素性骨质疏松症（glucocorticoid-induced osteoporosis,GIOP）肾虚病机的微观发病机制,以及补肾益髓中药复方的疗效机理,并为进一步阐明中医“肾藏精生髓主骨”理论的科学内涵提供实验依据。材料与方法:本研究采用后肢肌注地塞米松（2.5mg/kg,每周2次,连续9周）的方法复制GIOP大鼠模型,选用笔者导师郑洪新教授在中医“肾藏精生髓主骨”理论指导下的多年科研、临床实践之补肾益髓中药复方（主要由鹿茸、淫羊藿、牡蛎组成,功效:补肾填精、益髓壮骨）作为实验因素,选用补中益气颗粒（功效:补中益气）和血府逐瘀胶囊（功效:活血祛瘀）作为对照药,选用骨疏康颗粒（功效:补肾益气、活血壮骨）作为阳性对照药,以骨、肾组织Runx2、Runx2的上游调控基因Msx2、Dlx5、Runx2的下游靶基因Osterix mRNA及蛋白表达为效应指标,进行体内实验。实验大鼠按体重分层随机分为正常组、模型空白组、补肾益髓中药复方组、补中益气颗粒组、血府逐瘀胶囊组、骨疏康颗粒阳性对照组。灌胃给药9周。实验期间,每天观察大鼠皮毛的状态、活动状态、反应状态、是否有聚堆、是否有弓腰塌背的体态改变以及食量、大便状态等,并做好记录。9周后处死动物,取股骨、肾组织检测以下指标:应用XR-26型双能X线骨密度仪测定股骨骨密度,应用IX71FL型倒置荧光显微镜观察股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构,以评价动物模型的成立及药物疗效;实时定量RT-PCR（Real-Time Quantitative RT-PCR）检测骨、肾组织Msx2、Dlx5、Runx2、Osterix mRNA表达,Western Blot检测骨、肾组织Msx2、Dlx5、Runx2、Osterix蛋白表达。结果:1.大鼠生物学表征信息:正常组大鼠实验全程皮毛有光泽,活泼喜动,反应灵敏,无竖毛、聚堆、弓腰塌背等表现,食欲佳,食量、大便正常;造模9周结束时,模型空白组大鼠均呈现明显的弓腰塌背体态,皮毛无光泽,竖毛,喜静懒动,萎靡不振,反应迟钝,喜蜷缩聚堆,食欲下降,便软等肾虚表现;各给药组大鼠的弓腰塌背等肾虚表现均有不同程度的改善,其中补肾益髓中药复方组和骨疏康颗粒阳性对照组改善较明显,以补肾益髓中药复方组改善最明显。2.大鼠离体股骨骨密度（BMD）:与正常组比较,模型空白组明显降低（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显升高（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显升高（P<0.05）,补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。3.大鼠股骨头石蜡切片HE染色显微形态结构:光镜下可见,正常组骨小梁粗壮、饱满,形态结构完整,余留骨重建空间较少,骨髓腔相对较小;与正常组比较,模型空白组骨小梁明显变细,形态结构完整性差,有些部位破坏、断裂,余留骨重建空间较多,骨髓腔明显扩大;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组和骨疏康颗粒阳性对照组骨小梁形态结构明显改善,骨小梁增粗,结构较紧密,余留骨重建空间减少,骨髓腔减小,尤以补肾益髓中药复方组改善更为明显,而补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组骨小梁形态结构虽有所改善,但不明显。4. Real-Time Quantitative RT-PCR结果:（1）骨组织:正常大鼠骨组织可检测到Msx2、Dlx5、Runx2、Osterix mRNA表达。①Msx2 mRNA表达:与正常组比较,模型空白组明显升高（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显下调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显下调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。②Dlx5、Runx2、Osterix mRNA表达:与正常组比较,模型空白组明显降低（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显上调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显上调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。（2）肾组织:正常大鼠肾组织可检测到Msx2、Dlx5、Runx2、Osterix mRNA表达。①Msx2 mRNA表达:与正常组比较,模型空白组明显降低（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显上调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显上调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。②Dlx5、Runx2、Osterix mRNA表达:与正常组比较,模型空白组明显升高（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显下调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显下调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。5. Western Blot结果:（1）骨组织:正常大鼠骨组织可检测到Msx2、Dlx5、Runx2、Osterix蛋白表达。①Msx2蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显升高（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显下调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显下调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。②Dlx5、Runx2、Osterix蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显上调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显上调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。（2）肾组织:正常大鼠肾组织可检测到Msx2、Dlx5、Runx2、Osterix蛋白表达。①Msx2蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显降低（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显上调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显上调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有升高趋势,但无统计学意义（P>0.05）。②Dlx5、Runx2、Osterix蛋白表达:与正常组比较,模型空白组明显升高（P<0.01）;与模型空白组比较,补肾益髓中药复方组明显下调（P<0.01）,骨疏康颗粒阳性对照组明显下调（P<0.05）;补中益气颗粒组和血府逐瘀胶囊组虽有降低趋势,但无统计学意义（P>0.05）。结论:1.肌肉注射地塞米松（2.5mg/kg,每周2次,连续9周）的方法可以成功复制GIOP大鼠模型,GIOP的证候病机属肾虚,补肾益髓中药复方可有效防治该病,疗效明显优于健脾中药和活血中药。2.正常大鼠骨、肾组织存在Runx2、Osterix、Msx2、Dlx5 mRNA和蛋白表达;肾藏精生髓可能通过级联调控肾系统之骨与肾Runx2相关基因表达而实现主骨。3.长期、超生理剂量应用GC耗损肾精,精亏髓少,骨、肾失养,功能失常,Runx2相关基因表达级联失调:骨组织Runx2、Osterix、Dlx5 mRNA及蛋白表达降低,Msx2 mRNA及蛋白表达升高;肾组织Runx2、Osterix、Dlx5 mRNA及蛋白表达升高,Msx2 mRNA及蛋白表达降低,可能是GIOP肾虚病机的微观发病机制之一。4.补肾益髓中药复方功能补肾填精、益髓壮骨,可恢复肾“藏精生髓主骨”的功能,进而级联调节肾系统之骨与肾Runx2相关基因表达:上调骨组织Runx2、Osterix、Dlx5mRNA及蛋白表达,下调骨组织Msx2 mRNA及蛋白表达;下调肾组织Runx2、Osterix、Dlx5 mRNA及蛋白表达,上调肾组织Msx2 mRNA及蛋白表达,可能是补肾益髓中药复方防治GIOP的疗效机理之一。
赵旭,高泓,吴加才,胡冬青,杨仁旭[3]（2009）在《补肾法防治骨质疏松症的机理及临床研究现状与展望》文中研究表明近年来补肾法防治骨质疏松症的实验研究日趋深入、完善,临床研究逐步规范、严谨。通过对1996年至今的相关文献进行综述,指出目前研究主要存在中医特色不突出的软件问题:机理研究各自为营,缺乏整合;临床评价标准没有突出中医优势。继而对今后的发展思路进行探索,即机理研究中当逐渐形成以中医证候为核心,以"人"为载体,借助基因组学的研究方法方法;在临床科研领域,则应将病人的生活质量作为评价标准,并展开中医特色的证候量表研究。
刘梅洁[4]（2009）在《滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠Wnt信号传导的影响》文中提出目的通过体内实验和体外实验,从对成骨细胞具有重要调控作用的Wnt信号通路传导的角度,揭示滋阴补肾法治疗糖皮质激素性骨质疏松症的作用机理,并为阐明中医“肾主骨”机理的科学内涵提供进一步的实验依据。方法1体内实验将55只雌性Wistar大鼠随机分为4组:正常对照组12只、模型组15只、阳性对照组13只、滋补肾阴组15只。模型组大鼠肌注地塞米松0.1ml/100g体重,给药浓度为1mg/ml,给药剂量为1mg/kg体重,每周2次,连续8w;正常对照组则相应肌注等体积的生理盐水。阳性对照组及滋补肾阴组除按以上方法肌注地塞米松外,阳性对照组灌胃给予阿法骨化醇1ml/100g体重,给药浓度为0.005μg/ml,给药剂量为0.05μg/kg体重;滋补肾阴组灌胃给予左归丸水煎剂1ml/100g体重,给药浓度为0.952g生药/ml,给药剂量为9.52g生药/kg体重,以上给药每天1次,每周6天,连续8w。各组大鼠于处死前16天和前3天分别腹腔注射盐酸四环素30mg/kg体重,以对骨进行荧光标记。给药结束后,采用大鼠麻醉后股动脉取血法,所取全血静置1h后,经2000rmp离心10 min后取血清,采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血清中BGP、E2、PTH、IGF-Ⅰ的水平。取血后将各组大鼠处死,取右侧胫骨近端1/3,制作不脱钙骨切片,采用骨组织形态计量学方法,检测各组大鼠胫骨骨小梁体积百分比（TBV%）、骨小梁吸收表面百分比（TRS%）、骨小梁形成表面百分比（TFS%）、骨小梁矿化率（MAR）、类皮质平均宽度（OSW）、骨皮质矿化率（mAR）,以观察各组大鼠骨形成及骨吸收等骨代谢情况。取左侧胫骨近端1/3,制作大鼠胫骨脱钙骨的冰冻切片,分别采用免疫组化、原位杂交法检测各组大鼠胫骨成骨细胞及骨髓基质细胞中Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白及mRNA的表达。2体外实验2.1左归丸含药血清的制备雌性Wistar大鼠20只,随机分为2组:正常对照组和左归丸治疗组,每组10只。左归丸治疗组大鼠:地塞米松0.1mg/100g肌注,每周2次,连续8w,然后灌服左归丸,一日2次,连续5次,于末次给药1h,乙醚麻醉,无菌条件下,经腹主动脉采血,冷置1h后,离心（2500r/min,25min）,分离血清,是为左归丸含药血清,56℃灭活30min,-20℃冰箱保存备用。正常对照组按以上程序,灌服等容积的蒸馏水,所取血清即正常对照组血清。2.2 MTT法测定不同实验条件对成骨细胞增殖的影响本实验分为6组:成骨细胞（OB）+正常血清组,OB+10-7 mol/L地塞米松组,OB+10-8mol/L地塞米松组,OB+5%左归丸含药血清组、OB+10%左归丸含药血清组、OB+15%左归丸含药血清组,每组8个样本。将成骨细胞悬液浓度调节至为1×104/ml,将其接种至96孔细胞培养板,每孔200μl,培养12h细胞贴壁后,分别用正常对照组血清、10-7mol/L地塞米松、10-8mol/L地塞米松、5%左归丸含药血清、10%左归丸含药血清、15%左归丸含药血清处理各组细胞,5%CO2,37℃,继续培养96h,然后用MTT法于酶标仪上检测波长为570nm处各种细胞的OD值。2.3左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白及mRNA表达的影响本实验分为3组:正常血清组,地塞米松组,左归丸含药血清组。培养12h后,分别用正常对照组血清、10-7mol/L地塞米松、15%左归丸含药血清处理各组细胞,继续培养96h。随后分别采用免疫印迹法及荧光实时定量PCR（Realtime PCR）技术检测各组细胞中Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白及mRNA的表达。3统计学分析以上实验结果皆以均数±标准差（（?）±s）表示,采用单因素方差分析（ANOVA）进行数据处理,组问两两比较,采用q检验。结果1体内实验1.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响1.1.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨TBV%的影响模型组大鼠胫骨TBV%显着低于正常对照组。阳性对照组及滋补肾阴组的TBV%均显着高于模型组,但与正常对照组相比仍有显着差异;与阳性对照组比较,滋补肾阴组的TBV%显着降低。见表1。注:与正常对照组比较:*P<0.05,**P<0.01;与模型组比较:△P<0.05,△△P<0.01;与阳性对照组比较:▲P<0.05,▲▲P<0.01;下同。1.1.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨TRS%的影响与正常对照组比较,模型组大鼠胫骨TRS%显着增高。阳性对照组的TRS%明显高于正常对照组,但显着低于模型组。滋补肾阴组的TRS%与正常对照组及阳性对照组相比,显着增高;与模型组相比,没有差异,但有明显的降低趋势。见表2。1.1.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨TFS%和MAR的影响模型组大鼠胫骨TFS%和MAR较正常对照组皆显着降低。与模型组相比,阳性对照组的TFS%和MAR皆显着增高,而与正常对照组相比,TFS%仍显着降低,MAR则无显着差异。滋补肾阴组与模型组相比,TFS%和MAR均显着增高,与阳性对照组相比,无显着性差异;但与正常对照组相比,仍明显降低。见表3。1.1.4滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨mAR和OSW的影响模型组大鼠胫骨mAR和OSW显着低于正常对照组。阳性对照组及滋补肾阴组的mAR和OSW与模型组相比皆显着增高,但比正常对照组仍显着降低。与阳性对照组相比,滋补肾阴组的mAR和OSW无显着性差异。见表4。1.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表达的影响1.2.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC Wnt1蛋白和mRNA表达的影响模型组大鼠胫骨OB及MSC的Wnt1蛋白和mRNA表达阳性密度较正常对照组皆显着降低。阳性对照组及滋补肾阴组OB、MSC的Wnt1蛋白和mRNA表达阳性密度皆显着高于模型组;但与正常对照组相比,仍显着降低。滋补肾阴组OB及MSC Wnt1蛋白表达的阳性密度与阳性对照组相比,明显降低。见表5。1.2.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC LRP-5蛋白和LRP mRNA表达的影响与正常对照组相比,模型组大鼠胫骨OB及MSC的LRP-5蛋白和LRP mRNA表达阳性密度皆显着降低。阳性对照组及滋补肾阴组OB及MSC的LRP-5蛋白和LRP mRNA表达阳性密度皆显着高于模型组;但与正常对照组相比,仍显着降低。与阳性对照组相比,滋补肾阴组LRP-5蛋白和LRP mRNA表达的阳性密度显着降低。见表6。1.2.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSCβ-catenin蛋白和mRNA表达的影响与正常对照组相比,模型组大鼠胫骨OB及MSC的β-catenin蛋白和mRNA表达阳性密度皆显着降低。阳性对照组OB及MSC的β-catenin蛋白和mRNA表达阳性密度皆显着高于模型组;但与正常对照组相比,仍显着降低。滋补肾阴组OB及MSCβ-catenin蛋白和mRNA表达的阳性密度与模型组相比,明显增高,但显着低于正常对照组;且与阳性对照组相比,β-catenin蛋白表达的阳性密度明显降低。见表7。1.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中BGP、E2、PTH、IGF-Ⅰ含量的影响1.3.1滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中BGP含量的影响模型组大鼠血清中BGP的含量比正常对照组显着降低。与模型组相比,阳性对照组大鼠血清中BGP的含量显着增高;且与正常对照组相比,无显着性差异。滋补肾阴组大鼠血清中BGP的含量与模型组相比明显增高,但仍明显低于正常对照组,而与阳性对照组相比,无显着差异。见表8。1.3.2滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中E2含量的影响模型组大鼠血清中E2的含量比正常对照组显着降低。滋补肾阴组大鼠血清中E2的含量与模型组相比,显着增高;但较之正常对照组仍显着降低。与阳性对照组相比,滋补肾阴组大鼠血清中E2的含量显着增高。见表9。1.3.3滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中PTH含量的影响模型组大鼠血清中PTH的含量比正常对照组显着增高。阳性对照组及滋补肾阴组大鼠血清中PTH的含量与模型组相比,显着降低;但较之正常对照组仍明显增高。滋补肾阴组大鼠血清中PTH的含量与阳性对照组相比仍明显增高。见表10。1.3.4滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠血清中IGF-Ⅰ含量的影响模型组大鼠血清中IGF-Ⅰ的含量比正常对照组显着降低。与模型组相比,阳性对照组及滋补肾阴组大鼠血清中IGF-Ⅰ的含量皆显着增高;但较之正常对照组仍明显降低。滋补肾阴组大鼠血清中IGF-Ⅰ的含量与阳性对照组相比,无显着性差异。见表11。2体外实验2.1 MTT法测定不同实验条件对成骨细胞增殖的影响OB+10-6mol/L地塞米松组及OB+10-7mol/L地塞米松组的OD值均显着低于OB+正常血清组,但两者之间无显着性差异。OB+5%左归丸含药血清组、OB+10%左归丸含药血清组及OB+15%左归丸含药血清组的OD值均显着高于OB+10-6mol/L地塞米松组及OB+10-7mol/L地塞米松组,其中以OB+15%左归丸含药血清组增高最为明显;但与正常血清组相比,仍明显降低。这一结果说明:10-6mol/L地塞米松及10-7mol/L地塞米松均对成骨细胞的增殖有明显的抑制作用,而5%、10%及15%的左归丸含药血清均可明显促进成骨细胞的增殖,其中,15%的左归丸含药血清促进成骨细胞增殖的作用最为明显。所以下一步的实验选用10-7mol/L地塞米松以及15%左归丸含药血清作为干预条件。注:与OB+正常血清组比较:*P<0.05,**P<0.01;与OB+10-6mol/L地塞米松组比较:△P<0.05,△△P<0.01;与OB+5%左归丸含药血清组比较:▲P<0.05,▲▲P<0.01。2.2左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白表达的影响2.2.1左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α蛋白表达的影响较之正常血清组,地塞米松组Wnt3α蛋白的表达显着下调。左归丸含药血清组Wnt3α蛋白的表达与地塞米松组相比明显上调,但与正常血清组相比,仍明显降低。见图1。2.2.2左归丸含药血清对成骨细胞LRP-6蛋白表达的影响与正常血清组相比,地塞米松组LRP-6蛋白的表达显着下调。左归丸含药血清组LRP-6蛋白的表达较之地塞米松组明显上调,但与正常血清组相比,仍明显降低。见图2。2.2.3左归丸含药血清对成骨细胞β-catenin蛋白表达的影响地塞米松组β-catenin蛋白的表达较之正常血清组明显下调。与地塞米松组比,左归丸含药血清组β-catenin蛋白的表达明显上调,且与正常血清组相比,无显着性差异。见图3。2.3左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin mRNA表达的影响2.3.1 RNA提取纯度的检测和质量鉴定使用NanoDrop（?）ND-1000微量分光光度计测定RNA浓度及纯度,系统自动计算出A260/280,定量分析结果,见表13、图4。所有样本总RNA的A260/280均在1.8-2.0之间,说明所提取的RNA纯度高,无蛋白质和DNA的污染。经琼脂糖电泳成像后可看到清楚的两条带（见图4）:28S、18S,除此之外无其他杂带,且28S:18S≈2:1,证实所提总RNA完整,无异常断裂和丢失。1、2、3:正常血清组样本;M:marker;4、5、6:地塞米松组样本;7、8、9:左归丸含药血清组样本2.3.2扩增产物的溶解曲线各样品扩增产物的溶解曲线如图5,均为单一吸收峰,说明产物专一,单一片段反应特异性合格,无二聚体等杂带样品,可进行下一步荧光定量PCR反应。（a） Wnt3α（b） LRP-6（c）β-catenin（d）β-actin2.3.3左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3αmRNA表达的影响与正常血清组相比,地塞米松组芹归丸含药血清组Wnt3αmRNA的表达均明显下调;但左归丸含药血清组Wnt3αmRNA的表达较之地塞米松组显着上调。见图6。1、2、3正常血清组样本;4、5、6地塞米松组样本;7、8、9左归丸含药血清组样本;下同。2.3.4左归丸含药血清对成骨细胞LRP-6 mRNA表达的影响地塞米松组LRP-6 mRNA的表达较之正常血清组显着下调。与地塞米松组比,左归丸含药血清组LRP-6 mRNA的表达明显上调,但与正常血清组相比,仍明显下调。见图7。如下:对文献中较多的10个证候,应用方剂树形分析算法进行分析,对获得的计算结果总结如下。基本方
周忠民[5]（2009）在《滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠治疗作用及机制研究》文中研究说明目的：本研究课题拟通过滋补肝肾方和乙烯雌酚对治疗去卵巢骨质疏松模型大鼠的对比研究，观察去卵巢骨质疏松模型大鼠血清性激素水平FSH、LH、E2，血清骨钙素（BGP），胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平的变化、脏器指数测定、骨组织病理改变、RT-PCR方法观测IGF-1、OPG-mRNA的表达来探讨滋补肝肾方对去卵巢骨质疏模型大鼠的治疗作用及作用机制。方法：1血液性激素指标测定：摘眼球取血，分离血清，放射免疫法测定血清性激素指标雌二醇（E2）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成激素（LH）2血液骨代谢生化指标测定：摘眼球取血，分离血清，放射免疫法测定血清骨钙素（BGP）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）。3子宫湿重、脏器指数、骨组织病理改变：将动物断头处死，游离子宫组织，计算脏器指数；取出右侧股骨，以甲醛固定，取股骨头／股骨干处做病理切片，做成石蜡包块，HE染色，光学显微镜下进行病理观察。4骨标本的RT-PCR：断头处死大鼠后完整取出左侧股骨，放入液氮中冷冻，并分装在无菌EP管中密封，以备检测IGF-1、OPG-mRNA水平。结果：1．去势后形成的实验性骨质疏松症大鼠模型，其血清E2水平明显降低，FSH、LH水平明显升高；血清BGP、IGF-1水平显着降低；子宫湿重和脏器指数明显降低；骨小梁变细，骨皮质变薄，骨密度和面积减少；IGF-1、OPG-mRNA表达水平显着低于正常，出现了典型的骨质疏松症。2．滋补肝肾方可以改善去卵巢骨质疏松模型大鼠的生殖内分泌水平，能显着升高E2水平，降低FSH、LH水平。3．滋补肝肾方能显着升高去势大鼠体内血清BGP、IGF-1的水平。4．滋补肝肾方对去势大鼠的子宫湿重和脏器指数有升高趋势；减轻去势大鼠的骨质疏松程度。5．滋补肝肾方能上调去势大鼠骨组织IGF-1、OPGmRNA的基因表达。结论：综上所述，滋补肝肾方具有调节去势大鼠的生殖内分泌，改善去势大鼠的血液骨代谢，减轻去势大鼠的骨质疏松程度，上调骨组织IGF-1、OPGmRNA的表达。从多途径、多靶点使去势大鼠引起的生殖内分泌、骨代谢指标及骨组织的变化等接近正常水平，避免了雌激素替代治疗带来的副作用。
金珉廷[6]（2009）在《补肾中药血清对成骨细胞骨形成蛋白的UPP-Smad蛋白信号网络调节机制研究》文中研究说明目的:探讨补肾中药吸收后血清对离体大鼠成骨细胞骨形成蛋白（BMP 6、BMP 7）、Smad 1、Smad 7、Smurf1、Smurf2等基因与蛋白表达,探讨骨形成蛋白的泛素-蛋白水解酶复合体通路（UPP）—Smad信号转导通路相关基因和蛋白表达的影响,研究肾虚骨质疏松症证候病机,观察补肾中药对其防治疗效及其作用机理。材料与方法:应用多次胶原酶消化法获得新生大鼠颅盖骨的成骨细胞进行培养,采用Gomori改良钙钴法测定其碱性磷酸酶表达;随机将实验大鼠分为正常组、补肾中药组、补脾中药组、骨疏康组,通过血清药理学方法,采用灌胃8天后各组大鼠血清,培养成骨细胞48小时;并且,另行加入UPP通路抑制剂MG132以及正常组、补肾中药组、补脾中药组、骨疏康组大鼠血清,培养成骨细胞48小时;用MTT法检测成骨细胞增殖,同时用RT-PCR法、Western印迹法检测成骨细胞BMP6、7、Smad1、7、Smurf1、2 mRNA与蛋白表达。结果:1.用酶消化法进行大鼠成骨细胞培养,方便易行,可培养大量高纯度成骨细胞供研究使用。2.补肾中药血清作用48小时后可明显促进成骨细胞的增殖（P＜0.01）,同时加MG132血清可诱导抑制成骨细胞的增殖率（P＜0.05）。3.成骨细胞BMP6 mRNA与蛋白表达情况:与正常组比较,补肾中药组基因表达水平无显着差异（P＞0.05）而蛋白表达增高（P＜0.05）,其它各组基因与蛋白表达水平明显降低（P＜0.05,P＜0.01）。使用药物血清各组比较,补肾中药组表达水平高于补脾中药组与骨疏康组（P＜0.01）。加入MG132药物血清组间,无明显差异（P＞0.05）。4.成骨细胞BMP7 mRNA与蛋白表达情况:与正常组比较,补肾中药组基因表达水平增高（P＜0.01）而蛋白表达无显着差异（P＞0.05）,其它各组基因与蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）,使用药物血清各组比较,补肾中药组表达水平高于补脾中药组与骨疏康组（P＜0.01）。加入MG132药物血清各组间,MG132+正常组表达水平最高（P＜0.05）。5.成骨细胞Smad1 mRNA与蛋白表达情况:与正常组比较,补肾中药组基因表达水平无显着差异（P＞0.05）而蛋白表达降低（P＜0.01）,其它各组基因与蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）。使用药物血清各组比较,补肾中药组表达水平高于补脾中药组与骨疏康组（P＜0.01）。加入MG132药物血清各组比较,MG132+补肾中药组基因与蛋白表达水平明显高于MG132+补脾中药组（P＜0.01,P＜0.05）。6.成骨细胞Smad7 mRNA与蛋白表达情况:与正常组比较,各组均可明显上调表达水平（P＜0.01,P＜0.05）。使用药物血清各组比较,补脾中药组基因与蛋白表达水平最高（P＜0.05）。加入MG132药物血清各组比较,MG132+补脾中药组基因表达水平明显低于其它加MG132药物血清各组（P＜0.01）,而MG132+补肾中药组蛋白表达水平明显上调其他加MG132药物血清各组（P＜0.01）。7.成骨细胞Smurf1 mRNA与蛋白表达情况:与正常组比较,其它各组表达水平明显下降（P＜0.01）,使用药物血清各组比较,补肾中药组表达水平明显高于补脾中药组与骨疏康组（P＜0.01）。加入MG132药物血清组间,MG132+正常组基因表达水平最高（P＜0.05）,MG132+骨疏康组蛋白表达水平最高（P＜0.05）。8.成骨细胞Smurf2 mRNA与蛋白表达情况:与正常组比较,补肾中药组基因表达水平上调（P＜0.01）而蛋白表达水平无明显差异（P＞0.05）,其它各组明显低于正常组（P＜0.01）。加入MG132药物血清组间,基因表达无明显差异（P＞0.05）,MG132+骨疏康组蛋白表达水平最高（P＜0.05）。结论:1.采用药物血清作用于体外培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞的方法是较为稳定可靠的血清药理学方法。2.体外培养新生大鼠颅盖骨成骨细胞中存在泛素-蛋白水解酶复合体通路（UPP）-Smad蛋白其信号转导通路。3.应用补肾中药血清可明显促进成骨细胞增殖,明显上调成骨细胞BMP6、BMP7、Smad1、Smurf1、Smurf2的基因与蛋白表达,下调抑制性信号转导因子Smad7的基因与蛋白表达。4.应用UPP通路抑制剂MG132可明显抑制成骨细胞增殖,并明显抑制成骨细胞中BMP6、BMP7、Smad1、Smad7、Smurf1、Smurf2的基因与蛋白表达。5.应用补肾中药血清具有干预MG132抑制对成骨细胞增殖的作用,对成骨细胞中BMP6、BMP7、Smad1、Smad7、Smurf1、Smurf2的基因与蛋白表达水平具有明显上调作用,明显优于MG132+补脾中药组。
罗晓[7]（2009）在《滋肾丸浸膏对去卵巢大鼠骨质疏松模型骨密度、骨髓OPG/RANK/RANKL系统的影响的实验研究》文中研究指明目的通过观察中药滋肾丸浸膏对去卵巢所致实验性骨质疏松大鼠骨密度、骨髓OPG/RANK/RANKL系统的影响,探讨其抗骨质疏松的可能机制,为中药滋肾丸浸膏临床预防和治疗绝经后骨质疏松症提供理论依据。方法将80只健康SD雌性大鼠随机分为两组,假手术模型组（Sham）14只,手术模型组（OVX）66只。将去卵巢术后状态最佳的60只大鼠随机分为手术模型组（OVX）、尼尔雌醇组（E2）、滋肾丸高（High）、中（Mid）、低剂量组（Low）,每组12只；淘汰假手术模型组（Sham）中两只术后精神状态较差者,选定12只健康大鼠纳入实验。分组1天后分别给予生理盐水、尼尔雌醇、滋肾丸浸膏高、中、低剂量,连续用药12周。给药12周后,全部大鼠处死后立即取右侧股骨备用。采用双能X线骨密度测定仪及其所附带的小动物测量软件,测定大鼠离体股骨的骨矿含量（BMC）和骨密度（BMD）。采用免疫组织化学方法结合病理图像分析仪进行半定量分析,测定骨保护素（OPG）和核因子NF-kB受体活化因子配体（RANKL）在骨髓中的表达及OPG/RANKL的相对比值。结果去卵巢大鼠骨矿含量和骨密度值明显下降（P<0.05）。治疗12周后,尼尔雌醇组和滋肾丸浸膏中剂量组模型大鼠股骨的骨矿含量和骨密度水平均升高（P<0.05）。去卵巢大鼠骨髓OPG的表达降低,RANKL的表达增加,OPG/RANKL的相对比值明显下降（P<0.05）。治疗12周后,尼尔雌醇组和滋肾丸浸膏各组模型大鼠骨髓OPG/RANKL的比值明显升高（P<0.05）。其中尼尔雌醇增加模型大鼠OPG表达的作用较滋肾丸浸膏各组明显,而滋肾丸浸膏中剂量组减少骨髓RANKL表达的作用则优于尼尔雌醇（P<0.05）。结论中药滋肾丸浸膏可以增加去卵巢大鼠的骨矿含量和骨密度水平,且存在明显的量效关系。滋肾丸浸膏通过明显降低去卵巢大鼠骨髓RANKL的表达,升高OPG/RANKL的相对比值,从而作用于OPG/RANK/RANKL系统,表明滋肾丸浸膏能明显促进骨形成,对绝经后骨质疏松症有一定的防治作用。
周亚娜[8]（2008）在《补肾化痰法影响骨髓间充质干细胞成脂和成骨分化的实验研究》文中研究说明目的:从形态学、标志物蛋白合成（LPL、ALP、OCN）的角度,分别观察补肾法、化痰法、补肾化痰法对BMSCs成脂分化和成骨分化的影响,探讨补肾化痰法治疗骨质疏松症的可能作用机制。方法:1.运用全骨髓贴壁法分离培养纯化Wsitar大鼠BMSCs,2.从细胞形态学、流式细胞仪检测细胞表面抗原等角度进行鉴定BMSCs。3.使用1μmol/L地塞米松、0.5mmol/L IBMX、0.2mmol/L吲哚美辛、10μg/mL胰岛素联合诱导BMSCs成脂分化,通过细胞形态学观察、油红O染色及定量和用RT-PCR检测脂蛋白脂酶（LPL）mRNA表达,探讨补肾中药、化痰中药和补肾化痰中药分别对BMSCs成脂分化的影响。4.使用0.1μmol/L地塞米松,10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠,50μg/mL Vitamin C联合诱导BMSCs成骨分化,通过检测茜素红染色及定量、碱性磷酸酶（ALP）活性和骨钙素（OCN）mRNA表达,探讨补肾中药、化痰中药和补肾化痰中药对BMSCs成骨分化的影响。结果:1.采用全骨髓贴壁法可稳定获得均质性良好的大鼠BMSCs。2.流式细胞仪检测大鼠BMSCs表面标志抗原CD29、CD44表达阳性,CD45表达阴性。3.化痰中药能使BMSCs诱导形成的脂肪细胞减少,并下调成脂相关基因LPL-mRNA表达。4.补肾化痰中药能促进BMSCs成骨诱导后细胞体外钙化,提高细胞内ALP活性,上调OCN-mRNA表达。结论:补肾化痰法治疗骨质疏松症的可能作用机制是:化痰法抑制BMSCs向脂肪细胞分化,补肾化痰法促进BMSCs向成骨细胞分化。
姜勇[9]（2008）在《补肾壮骨方剂对糖皮质激素所致大鼠骨质疏松的实验研究》文中研究表明目的:通过观察实验大鼠在血液生化指标上的变化,骨密度的改变,以及光镜下骨组织显微结构的变化,研究补肾壮骨方剂对糖皮质激素所致实验大鼠骨质疏松的治疗效果。方法:选用Wistar健康成年大鼠45只,体重200±20g。随机分4组,正常组12只,造模空白组,对照组,中药治疗组各11只。除正常组外均给予地塞米松注射液0.25mg/100g肌注2次/周（周一,周四）,一个月后形成骨质疏松动物模型,观测大鼠左股骨干骨密度,血液生化（血钙,血磷,碱性磷酸酶）指标变化,骨标本镜检组织形态学观察。中药治疗组给予补肾壮骨方剂水煎浓缩液5毫升/次,日二次,对照组给予钙尔奇D片50毫克/天,正常组和造模空白组给予等量的生理盐水。大鼠在安静,通风,干燥的饲养环境下各组再喂服一个月,观察中药治疗组与对照组各数据的变化。结果:中药治疗组与对照组比较在增加股骨密度方面有近似的效果,血液生化指标方面:血清碱性磷酸酶,血钙,血磷无明显差异,骨计量学方面:AOS（活性成骨表面百分比）中药治疗组为11.21%,对照组为8.86%（p<0.05）,TO（S骨小梁类骨质表面百分比）中药治疗组13.45%,对照组6.43%（p<0.05）。可见在这两组数据中,中药治疗组要明显好于对照组。结论:补肾壮骨方剂对于糖皮质激素所致大鼠的骨质疏松有明显的改善和治疗效果,特别在促进新生骨产生和激发成骨细胞活性方面优于对照药物---钙尔奇D.
李振卿,刘垒[10]（2008）在《绝经后骨质疏松症的药物治疗进展》文中进行了进一步梳理
二、补肾方药对地塞米松所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、补肾方药对地塞米松所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的影响（论文提纲范文）
（1）补肾中药与围绝经期女性激素的研究进展（论文提纲范文）
| 1 病因病机 |
| 2 治疗现状 |
| 3 补肾中药与女性激素之关系 |
| 3.1 补肾中药具有雌激素活性: |
| 3.2 补肾中药可影响下丘脑-垂体-卵巢轴: |
| 3.3 补肾中药可调节雌激素受体: |
| 4 现代临床研究进展 |
（2）基于Runx2相关基因表达级联调控对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾虚证候病机的研究（论文提纲范文）
| 中英文名词术语对照 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 综述一 Runx2研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 糖皮质激素性骨质疏松症肾虚病机与成骨细胞分化抑制关系探讨 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第一部分 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠模型的建立及评价 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 观察指标及测定方法 |
| 4 结果与分析 |
| 第一部分 实验小结 |
| 第二部分 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Runx2相关基因表达及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 实验一 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织 Runx2 mRNA 和蛋白表达以及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 实验二 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织 Osterix mRNA 和蛋白表达以及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 实验三 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠骨组织Msx2、Dlx5 mRNA 和蛋白表达以及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 第二部分 实验小结 |
| 第三部分 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Runx2相关基因表达及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 实验一 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织 Runx2 mRNA 和蛋白表达以及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 实验二 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织 Osterix mRNA 和蛋白表达以及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 实验三 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾组织Msx2、Dlx5 mRNA 和蛋白表达以及补肾益髓中药复方的调节作用 |
| 第三部分 实验小结 |
| 分析讨论 |
| 1 中医学对糖皮质激素性骨质疏松症病因病机的研究 |
| 2 现代医学对糖皮质激素性骨质疏松症发病机制的研究 |
| 3 补肾法防治糖皮质激素性骨质疏松症作用机制的研究 |
| 4 Runx2 相关基因与骨质疏松症 |
| 5 糖皮质激素性骨质疏松症大鼠模型评价 |
| 6 补肾填精、益髓壮骨法的建立以及补肾益髓中药复方的功效 |
| 7 GIOP 的证候病机以及补肾益髓中药复方的疗效机理 |
| 创新点与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（3）补肾法防治骨质疏松症的机理及临床研究现状与展望（论文提纲范文）
| 1 机理研究 |
| 2 临床研究 |
| 3 存在问题与展望 |
| 3.1 机理研究各自为营 |
| 3.2 临床评价标准没有突出中医优势 |
（4）滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠Wnt信号传导的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略表 |
| 综述一 Wnt信号转导通路研究进展 |
| 综述二 糖皮质激素性骨质疏松症的发病机制及中药对其的影响 |
| 前言 |
| 第一部分 体内实验 |
| 材料方法 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 结果 |
| 1 滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠骨组织形态计量学指标的影响 |
| 2 滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠胫骨OB及MSC Wnt1、LRP-5及β-catenin蛋白和mRNA表达的影响 |
| 3 滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠外周血血清中BGP、E2、PTH、IGF-Ⅰ含量的影响 |
| 讨论 |
| 1 糖皮质激素性骨质疏松症的中医机理探讨 |
| 2 滋阴补肾法对糖皮质激素性骨质疏松症的治疗作用 |
| 3 滋阴补肾法治疗糖皮质激素性骨质疏松症的作用机理 |
| 小结 |
| 第二部分 体外实验 |
| 材料方法 |
| 1 材料 |
| 2 方法 |
| 结果 |
| 1 MTT法测定不同实验条件对成骨细胞增殖的影响 |
| 2 左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin蛋白表达的影响 |
| 3 左归丸含药血清对成骨细胞Wnt3α、LRP-6、β-catenin mRNA表达的影响 |
| 讨论 |
| 1 Wnt信号传导通路与成骨细胞 |
| 2 糖皮质激素(GC)对成骨细胞的抑制作用及滋阴补肾法对其的调节 |
| 3 糖皮质激素(GC)对Wnt信号传导通路的影响及滋阴补肾法对其的调节 |
| 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 附图 |
（5）滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠治疗作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 一、中医经典文献对骨质疏松症的认识 |
| 二、中医对骨质疏松的研究 |
| 1 病因病机的研究 |
| 2 治则治法的研究 |
| 3 实验研究 |
| 4 结语 |
| 参考文献 |
| 实验一 滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠血清性激素的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物与分组 |
| 1.2 试剂、仪器与药品 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 各组大鼠血清性激素E_2、FSH、LH水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 模型的选择和给药 |
| 3.2 滋补肝肾方对血清性激素的影响 |
| 参考文献 |
| 实验二 滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠血清BGP、IGF-1的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物与分组 |
| 1.2 试剂、仪器与药品 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 各组大鼠血清BGP水平的影响 |
| 2.2 各组大鼠血清性激素IGF-1水平的影响 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验三 去卵巢骨质疏模型大鼠脏器指数及骨组织形态学的观察 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物与分组 |
| 1.2 试剂、仪器与药品 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 子宫湿重及脏器指数 |
| 2.2 各组大鼠骨大体解剖及HE染色光镜下形态学 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验四 去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织IGF-1-mRNA表达研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物与分组 |
| 1.2 试剂、仪器与药品 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 实验五 去卵巢骨质疏松模型大鼠骨组织OPG-mRNA表达研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 动物与分组 |
| 1.2 试剂、仪器与药品 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 一、立法依据 |
| 1 理论探讨 |
| 2 方义解析 |
| 3 现代药理作用研究 |
| 二、结论 |
| 三、问题与展望 |
| 综述 |
| 原发性骨质疏松症现代医学的研究进展 |
| 1 分类 |
| 2 发病机制 |
| 3 治疗 |
| 参考文献 |
| IGF-1在骨质疏松中的作用 |
| 参考文献 |
| OPG在骨质疏松中作用的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（6）补肾中药血清对成骨细胞骨形成蛋白的UPP-Smad蛋白信号网络调节机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 正文 |
| 实验一 补肾中药血清对体外培养成骨细胞增殖的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 结果 |
| 实验二 体外培养的大鼠成骨细胞中BMP6、BMP7 mRNA与蛋白表达 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 结果 |
| 实验三 体外培养的大鼠成骨细胞中Smad1、Smad7 mRNA与蛋白表达 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 结果 |
| 实验四 体外培养的大鼠成骨细胞中Smurf1、Smurf2 mRNA与蛋白表达 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 数据处理 |
| 4 结果 |
| 分析讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）滋肾丸浸膏对去卵巢大鼠骨质疏松模型骨密度、骨髓OPG/RANK/RANKL系统的影响的实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 关键词汇中英文对照表 |
| 前言 |
| 动物实验研究 |
| 1. 实验材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验动物 |
| 1.1.2 饲养环境 |
| 1.1.3 实验药物 |
| 1.1.4 主要试剂及仪器 |
| 1.1.4.1 主要试剂 |
| 1.1.4.2 主要仪器 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 第一次动物分组 |
| 1.2.2 动物造模 |
| 1.2.3 第二次动物分组 |
| 1.2.4 给药剂量与方法 |
| 1.2.4.1 给药剂量 |
| 1.2.4.2 给药方法 |
| 1.3 实验取材 |
| 1.4 观察指标及测定方法 |
| 1.4.1 一般情况 |
| 1.4.2 股骨骨矿含量(BMC)和骨密度(BMD)测定 |
| 1.4.3 骨组织骨保护素(OPG)表达 |
| 1.4.4 骨组织NF-kβ受体活化配体(RANKL)表达 |
| 1.5 统计学方法 |
| 2. 实验结果与分析 |
| 2.1 一般情况 |
| 2.2 各组大鼠股骨骨矿含量(BMC)和骨密度(BMD)比较 |
| 2.3 各组骨盆骨保护素(OPG)和NF-κβ受体活化配体(RANKL)表达结果的 比较 |
| 2.3.1 各组骨组织OPG表达结果比较 |
| 2.3.2 各组骨组织RANKL表达结果比较 |
| 2.3.3 各组骨组织OPG/RANKL比值的比较 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 本课题研究立论的必要性 |
| 3.2 本课题研究的理论依据 |
| 3.3 滋肾丸的立法组方分析 |
| 3.4 滋肾丸浸膏所含药物的相关现代药理研究 |
| 3.5 实验动物、造模方法与造模时间的选择 |
| 3.6 观察指标的选择及意义 |
| 3.7 阳性对照药物的选择及意义 |
| 3.8 滋肾丸对模型大鼠股骨骨矿含量、骨密度的影响 |
| 3.9 滋肾丸对模型大鼠骨组织OPG和RANKL表达的影响 |
| 4. 结论 |
| 5. 问题与展望 |
| 临床疗效观察部分:滋肾丸浸膏治疗绝经后骨质疏松症16例临床观察 |
| 1. 对象与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 诊断标准 |
| 1.2.1 西医诊断标准 |
| 1.2.2 中医诊断标准 |
| 1.3 纳入标准 |
| 1.4 排除标准 |
| 1.5 剔出病例标准 |
| 2. 观察方法 |
| 2.1 观察药物 |
| 2.2 用药方法 |
| 2.3 检验方法 |
| 2.3.1 中医症候计分法 |
| 2.3.2 实验指标的检测 |
| 2.3.3 临床疗效评价标准 |
| 2.3.4 安全性指标的观测 |
| 2.3.5 统计学方法 |
| 3. 结果与分析 |
| 3.1 脱落病例 |
| 3.2 治疗前后患者中医证候记分值比较 |
| 3.2.1 治疗前三个月前后患者中医证候记分值比较 |
| 3.2.2 治疗后三个月前后患者中医证候记分值比较 |
| 3.3 治疗前后患者雌二醇水平比较 |
| 3.4 治疗前后患者L_2-L_4侧位骨密度值的比较 |
| 3.5 治疗6个月后总疗效的统计 |
| 4. 毒副反应 |
| 5. 讨论 |
| 6. 结论 |
| 7. 问题和展望 |
| 综述:原发性骨质疏松症的中西医药研究进展 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（8）补肾化痰法影响骨髓间充质干细胞成脂和成骨分化的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略语 |
| 前言 |
| 第一部分 理论探讨 |
| 1 概述 |
| 2 中医经典文献对骨质疏松症的认识 |
| 3 现代中医对骨质疏松症的研究 |
| 4 问题与思考 |
| 5 参考文献 |
| 第二部分 立论依据 |
| 1. 骨衰老 |
| 2. 痰浊与衰老 |
| 3. 痰浊与骨质疏松症 |
| 4. 本课题的学术思想 |
| 5. 本课题研究思路与目的 |
| 6. 参考文献 |
| 第三部分 实验部分 |
| 实验一 Wsitar大鼠BMSCs分离、纯化、培养及鉴定 |
| 1 研究目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 5 讨论 |
| 6 小结 |
| 7 参考文献 |
| 附图 |
| 实验二 补肾化痰法对Wistar大鼠BMSCs成脂分化的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 6 参考文献 |
| 附图 |
| 实验三 补肾化痰法对Wistar大鼠BMSCs成骨分化的影响 |
| 1 实验目的 |
| 2 实验材料 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 6 参考文献 |
| 附图 |
| 第四部分 结论 |
| 第五部分 综述 |
| 综述一 骨质疏松症与骨髓间充质干细胞的关系 |
| 综述二 中药对骨髓间充质干细胞成脂和成骨分化的研究进展 |
| 致谢 |
（9）补肾壮骨方剂对糖皮质激素所致大鼠骨质疏松的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 前言 |
| 文献综述 |
| 实验部分 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.结果与分析 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附图 |
| 个人简历 |
四、补肾方药对地塞米松所致实验性骨质疏松大鼠卵巢功能的影响（论文参考文献）
- [1]补肾中药与围绝经期女性激素的研究进展[J]. 朱珍,顾江红. 浙江中医杂志, 2011(11)
- [2]基于Runx2相关基因表达级联调控对糖皮质激素性骨质疏松症大鼠肾虚证候病机的研究[D]. 王剑. 辽宁中医药大学, 2011(12)
- [3]补肾法防治骨质疏松症的机理及临床研究现状与展望[J]. 赵旭,高泓,吴加才,胡冬青,杨仁旭. 辽宁中医杂志, 2009(11)
- [4]滋补肾阴法对糖皮质激素所致骨质疏松大鼠Wnt信号传导的影响[D]. 刘梅洁. 中国中医科学院, 2009(11)
- [5]滋补肝肾方对去卵巢骨质疏松模型大鼠治疗作用及机制研究[D]. 周忠民. 湖北中医学院, 2009(10)
- [6]补肾中药血清对成骨细胞骨形成蛋白的UPP-Smad蛋白信号网络调节机制研究[D]. 金珉廷. 辽宁中医药大学, 2009(07)
- [7]滋肾丸浸膏对去卵巢大鼠骨质疏松模型骨密度、骨髓OPG/RANK/RANKL系统的影响的实验研究[D]. 罗晓. 成都中医药大学, 2009(S1)
- [8]补肾化痰法影响骨髓间充质干细胞成脂和成骨分化的实验研究[D]. 周亚娜. 湖北中医学院, 2008(09)
- [9]补肾壮骨方剂对糖皮质激素所致大鼠骨质疏松的实验研究[D]. 姜勇. 辽宁中医药大学, 2008(06)
- [10]绝经后骨质疏松症的药物治疗进展[J]. 李振卿,刘垒. 社区医学杂志, 2008(05)