一、0.1μm发光薄膜的表面压力分布测定法(论文文献综述)
李重宁[1](2021)在《适配体介导碳基纳米探针及其催化放大-金纳米溶胶SERS/RRS检测痕量铅和钾离子》文中进行了进一步梳理环境中有害重金属等可以通过多种途径污染食物、饮用水等,进而对人体健康及生态平衡构成威胁。对这些污染物进行快速检测和筛查是降低或避免环境污染危害的重要手段。相对需要大型仪器的检测方法而言荧光、拉曼等分子光谱方法经济且方便。但是大多数金属离子没有拉曼活性和荧光信号,或者散射截面小、信号弱,限制了表面增强拉曼散射(SERS)、荧光(FL)、共振瑞利散射(RRS)等分子光谱方法在检测中的应用。本论文拟以铅离子(Pb2+)、钾离子(K+)、亚砷酸根(As O2-)的检测为例,通过构建碳基纳米探针和碳基纳米酶催化纳米反应放大SERS信号;以碳点和碳化氮这两种纳米酶为研究对象:研究其合成路径、对生成纳米溶胶SERS指示反应的催化性能以及在分子光谱中的应用;同时利用适配体与靶分子的特异性结合以及对纳米酶催化活性的抑制-释放作用来调控催化反应,从而提出高选择性、高灵敏的无标记SERS定量检测痕量金属离子的新策略。分别用柠檬酸三铵(AC)和乙二胺四乙酸(EDTA)作前驱物,通过调节前驱物的摩尔比,采用微波加热法制备了荧光可调的掺氮碳量子点(CDN),并用透射电镜(TEM)、红外光谱(IR)、吸收光谱(Abs)、三维荧光光谱(3D-FL)等方法进行了表征。实验发现,制备的CDN在443 nm处有较强的荧光峰,其量子产率为0.42。分析体系中加入铅适配体(Apt)时,Apt能吸附在CDN表面上,抑制其荧光强度,而当体系中存在分析物时,分析物可以与对应的Apt特异性结合并释放出CDN,体系FL信号恢复增强。采用同步荧光法(SFL)检测,Pb2+浓度在10-100 nmol/L范围内与SFL强度ΔI368nm成线性,其线性方程为ΔI368nm=19.1 C+109.2(R2=0.9899),检测限为4.31 nmol/L。此外,该适配体荧光分析平台还适用于亚砷酸根快速简便的分析。As O2-浓度在10-100 nmol/L范围内与SFL强度ΔI368nm成线性,其线性方程为ΔI368nm=7.7 C+47.3(R2=0.9797),检测限为5.52 nmol/L。该方法简单、灵敏度高、选择性好,用于实际样品中Pb2+的测定,其相对标准偏差为0.77%-2.78%,回收率分别为96.22%-103.00%。探讨了水热法高效合成掺氮碳点的机理。作为纳米粒子的CDN能催化还原糖等如葡萄糖(GLc)、果糖(FLc)还原HAu Cl4生成金纳米粒子(Au NP)的反应。以孔雀石绿(MG)作探针,体系在1617 cm-1处的SERS强度随CDN的增加而线性增加;在375 nm处的RRS强度随CDN的增加而线性增加。体系中Apt能吸附在催化剂CDN表面,从而抑制CDN的催化能力。Apt与CDN和靶分子二个反应是竞争反应,但当体系中有与Apt结合更紧密的靶分子存在时,Apt随之脱附,CDN催化能力恢复增强。据此构建了一个适配体介导的纳米催化放大SERS/RRS定量检测金属离子的平台。对于Pb2+:SERS检测方法中,Pb2+浓度在0.5-120 nmol/L范围内与SERS强度ΔI1617cm-1成线性,其方程为ΔI1617cm-1=461.5 C+699.3(R2=0.9983),检测限0.11 nmol/L。RRS检测方法中,Pb2+浓度在50-400 nmol/L范围内与RRS强度ΔI375nm成线性,其方程为ΔI375nm=11.4 C+24.7,(R2=0.9829),检测限15.32 nmol/L。对于As O2-:SERS检测方法中,As O2-浓度在1-80 nmol/L范围内与SERS强度ΔI1617cm-1成线性,其方程为ΔI1617cm-1=206.4 C+793.7(R2=0.9849),检测限0.34 nmol/L。RRS检测方法中,As O2-浓度在50-350nmol/L范围内与RRS强度ΔI375nm成线性,其线性方程为ΔI375nm=4.1 C+103.9(R2=0.9791),检测限20.24 nmol/L。该分析平台利用CDN催化纳米反应生成SERS活性金纳米粒子产物作为基底,克服了Pb2+、As O2-无Raman活性的缺点,使得SERS和RRS检测金属离子成为可能。用于实际样品中Pb2+的测定,其相对标准偏差为0.94%-2.71%,回收率分别为99.00%-103.70%。我们的方法简单快速,灵敏度高,重现性好,具有很好的实用价值。此外,从机理层面探讨了CDN纳米酶非均相催化纳米金反应。用柠檬酸(CA)和硫脲(TU)作前驱物,硝酸银做掺杂剂,采用微波制备了掺银碳化氮量子点(Ag CNs),并用TEM、IR、SERS、RRS、FL、Abs等方法对该量子点进行了表征。实验发现,Ag CNs强烈催化葡萄糖(GLc)还原HAu Cl4生成Au NP,且Au NP具有较强的SERS活性和RRS效应。以维多利亚蓝B(VBB)作分子探针,它在1616 cm-1处的SERS强度随Ag CNs浓度的增加而线性增加;在370 nm处的RRS强度随Ag CNs浓度的增加而线性增加。当加入K+适配体(Apt)时,Apt吸附在Ag CNs表面上,抑制了其催化活性,SERS、RRS强度降低。当存在K+时,它可以与Apt结合形成稳定的G-四分体,并释放出Ag CNs催化剂,其SERS、RRS信号恢复增强。将非弹性SERS和弹性RRS两种散射光谱技术耦合,开发了一种超痕量K+的无标记的适配体耦合双模双散射定量分析方法,其线性范围为5-150 nmol/L,检测限为0.92 nmol/L K+。此外采用分子光谱技术详细研究了碳化氮催化纳米金反应,提出了一个合理的Ag CNs增强催化反应机理。本论文以碳化氮量子点和碳量子点等环境友好的绿色碳基纳米材料作为催化剂催化生成具有SERS活性的金纳米粒子,建立适配体调控纳米催化-分子光谱分析体系;同时利用碳量子点的高荧光特性,发展了一系列快速简便的检测痕量金属离子荧光分析新方法。结合SERS/RRS/FL等分子光谱研究结果,提出合理的纳米粒子催化机理,为提高分子光谱分析方法的选择性及灵敏度提供了指导。适配体介导纳米催化放大SERS定量分析平台的建立拓展了SERS方法检测痕量金属离子的应用范围,具有一定的实际意义。
杨巾栏[2](2021)在《增强发射荧光铜纳米簇基材料的制备及其在传感方面的应用》文中认为具有类分子结构的铜纳米簇(CuNCs)因其独特的光电特性而受到人们的关注,其中光致发光性质是目前研究最为广泛的性质之一。然而,由于受Cu元素自身易氧化性质的影响,大多数CuNCs存在量子产率(QY)低、化学稳定性差、尺寸控制困难等缺陷,极大限制了其在光学领域的应用。本文针对CuNCs在合成方法,光学性能调控,荧光传感应用方面存在的一系列问题,开展了如下研究工作:第二章,我们通过易于操作的紫外光诱导法制备高稳定性、增强发射的聚乙烯亚胺为模板的CuNCs(PEI-CuNCs),用于检测生物硫醇和乙酰胆碱酯酶(ACh E)。检测过程中Cu2+能有效猝灭PEI-CuNCs的荧光。生物硫醇所带有的-SH能够与Cu2+形成RSH-Cu2+复合结构,恢复被Cu2+猝灭的荧光。乙酰胆碱酯酶可水解硫代乙酰胆碱为硫代胆碱(TCh),TCh与Cu2+反应形成TCh-Cu2+络合物并开启荧光。这种简便的荧光关闭-开启法(turn-off-on)还可以用于ACh E抑制剂的筛选。此外,该方法还成功应用于人血清样品中生物硫醇和乙酰胆碱酯酶活性的检测。研究结果证明了该传感平台具有巨大潜力,并为探索广泛的生物传感应用提供新的途径。第三章,我们建立了一种基于银/铜双金属纳米团簇与氧化石墨烯(GO)集成的静电控制荧光分析方法。首先合成了带正电荷的聚乙烯亚胺保护银/铜双金属纳米簇(PEI-Ag/CuNCs),并考察了其独有的p H/温度依赖性荧光特性。引入带负电荷的GO通过内过滤效应猝灭PEI-Ag/CuNCs的荧光。基于不同的静电相互作用,检测了三种生物大分子,分别是带负电荷的肝素、带正电荷的鱼精蛋白和胰蛋白酶。这一策略为静电控制荧光法在生物传感中的应用提供了新的见解。第四章,我们将谷胱甘肽保护的CuNCs(GSH-CuNCs)通过限域作用覆载到层状双氢氧化物(LDH)表面,合成了具有优良QY和荧光寿命的GSH-CuNCs/LDH复合材料。此外,基于表面限域效应,我们提出了一种全新的、简单的、超灵敏的检测透明质酸酶的荧光方法。本研究首次开发了基于表面限域效应的生物酶传感平台,为生物酶传感领域开辟了新的途径。第五章,我们以比表面积大、电荷密度高的含锌羟基双盐(Zn-HDS)为主体材料,以谷胱甘肽保护的铜纳米团簇(GSH-CuNCs)为客体分子,基于表面限域效应,首次合成荧光复合材料GSH-CuNCs/Zn-HDS。与GSH-CuNCs相比,制备的GSH-CuNCs/Zn-HDS具有更高的QY、更长的荧光寿命和更好的稳定性。基于内过滤效应,我们开发了以GSH-CuNCs/Zn-HDS为探针的特异性生物酶传感平台,实现对β-葡萄糖醛酸酶的灵敏、可视化检测。我们还利用GSH-CuNCs/Zn-HDS固态粉末制备了一种稳定、低成本、环境友好的发光二极管。第六章,我们基于荧光铜纳米团簇(CuNCs)和碳点(CDs)组成的比率荧光探针,开发了一种快速、方便、低成本的有机溶剂中水含量检测方法。具有溶剂依赖效应的CuNCs在不同溶剂中对水有不同的反应,而CDs由于其优异的荧光稳定性而成为理想的荧光参比。随着有机溶剂中水含量的增加,比率荧光探针呈现明显的橙色到蓝色的颜色变化。智能手机作为便携式监测工具,通过获取图像、读取颜色、分析数据等方式对水含量检测的视觉结果进行定量分析。我们将所开发的传感平台应用于白酒和医用酒精样品的水含量检测,证明了其在实际应用中的巨大潜力。
蔡月圆[3](2021)在《香豆素敏化的环金属铱配合物在光电生化分析中的应用研究》文中进行了进一步梳理随着科技的发展,光电化学(Photoelectrochemical,PEC)分析渐渐成为了一种新兴且应用迅速的痕量分析技术。和其他传统电化学和光学检测技术相比,PEC分析具有制造成本低、检测速度快、操作简单和灵敏性高等特点,已被广泛应用于环境监测、药物分析检测、生物分析检测和食品安全监测等科学研究领域。光电化学生物分析的光电转换效率主要取决于光电活性材料。目前,运用于光电化学生物分析的光电活性材料仍然存在着带隙宽且吸收弱的缺点,在可见光区进一步限制了在PEC生物分析领域的应用。所以仍然面临着如何将光电活性材料的吸收范围扩大到可见光区域的巨大挑战。在众多的光电活性材料中,金属配合物由于其良好的光稳定性和热稳定性而成为了人们研究的热点。作为典型的金属配合物,环金属化的Ir(Ⅲ)配合物具有更吸引人的光电特性,目前,将铱配合物用于生化分析领域仍处于初步阶段。鉴于以上原因,本文基于环金属化Ir(Ⅲ)配合物可以在宽的范围内进行调节的光物理特性的优势,设计合成了两种在可见光范围的长波方向具有较高摩尔吸光度的环金属化Ir(Ⅲ)配合物。并构建了基于环金属化Ir(Ⅲ)配合物的阴极光电化学传感平台,将其运用于生命复杂体系中凝血酶、DNA甲基转移酶的高灵敏、高选择性检测。主要内容如下:1.基于香豆素敏化的环金属化Ir(Ⅲ)配合物用于凝血酶检测的光电化学传感器本体系设计合成了一种用于光电活性材料的阳离子型环金属化Ir(Ⅲ)配合物[(CHO-bpy)2Ir(C-phen)]+PF6-(CHO-bpy:4-(吡啶-2-基)苯甲醛;具有光捕获能力的主配体C-Phen:由香豆素共价键合到辅助配体邻菲罗啉上),其中香豆素部分的共价键合,改善了铱配合物在可见光区的吸收。并且环金属化配体中的醛基有利于配合物进行生物标记。通过紫外可见吸收光谱、光电化学和电化学的表征,表明该配合物是一种高效的光电活性材料,在可见光照射下具有稳定和可重复的阴极光电流。以所制备的[(CHO-bpy)2Ir(C-phen)]+PF6-配合物作为一种信号报告物,组装了基于金纳米粒子(Au NPs)的PEC纳米探针。通过适体/蛋白质邻近结合诱导效应触发的链置换和催化发夹自组装扩增策略(CHA),构建了一种简单、高灵敏的PEC生物传感器用于了凝血酶的检测。由于铱(Ⅲ)配合物出色的光子-电流转换特性、有效的扩增策略和良好的生物相容性,该PEC生物传感平台对凝血酶的检测有更高的灵敏度,在区间50 f M-20 p M有良好的线性范围,检测限为23 f M。并且在实际血清样品中也显示出高特异性。该生物传感平台具有良好的选择性、稳定性、重复性,并且在未来的医学领域具有一定的发展潜力。2.基于香豆素敏化的嵌插型环金属Ir(Ⅲ)配合物用于DNA甲基转移酶检测的光电阴极传感器本体系设计合成了一种用于光敏剂的嵌插型阳离子环金属铱配合物[Ir(C6)2(dppz)]+PF6-(环金属化主配体:C6=香豆素6和辅助配体:dppz=二吡吩并吩嗪),通过紫外可见吸收光谱(UV)、光电化学和电化学进行相关表征,表明在可见光区域,该配合物显示出高灵敏且稳定不衰减的光电流信号。鉴于该配合物优异的光捕获能力和良好的生物相容性,本文首次报道了这种高效的[Ir(C6)2(dppz)]+PF6-敏化Ni O光电阴极及其在阴极光电化学生物分析中的应用。这种铱配合物敏化的Ni O光电阴极能够显示出明显增强的阴极光电流。该传感平台结合催化发夹自组装(CHA)和杂交链反应(HCR)的无酶级联扩增策略,可以实现对DNA甲基转移酶(MTase)的高灵敏检测。研究表明,构建的光电生物传感平台在0.005-100 U/m L的范围有良好线性关系,检测限为0.0028 U/m L,同时还具备良好的选择性、稳定性和可重复性的优异性能。此外,本研究还进一步证明了该生物传感平台可以应用于DNA甲基转移酶(MTase)活性抑制剂的筛选。从而为新一代临床诊断癌症的进展提供可靠的生物分析方法。
邹舟诣奥[4](2020)在《基于声弹性效应的GIS盆式绝缘子应力超声检测理论和方法研究》文中指出盆式绝缘子是气体绝缘金属封闭开关设备(gas-insulated metal-enclosed switchgear,简称GIS)的绝缘子,具有电气绝缘作用外,还有机械支撑、固定导体和隔离气室的作用。盆式绝缘子在制造、运输、安装和运行中可能存在应力,当应力累积超过其机械强度时,会引起微小裂纹,造成绝缘子开裂,进而引发严重的绝缘故障。为预防绝缘故障的发生,目前通常利用水压试验来校验盆式绝缘子整体机械强度,但对其内部应力的检测研究尚未进行。因此,对盆式绝缘子内部应力检测进行研究,对预防绝缘子开裂,避免绝缘故障发生,对保障GIS安全稳定运行有重要意义。本文利用基于声弹性效应的超声应力检测方法对盆式绝缘子环氧复合材料试样次表面应力和内部应力检测的可行性进行了研究,提出了水压试验下126 k V GIS三相共箱盆式绝缘子内部应力的超声检测方法。主要内容如下:1)研究了GIS环氧试样次表面应力超声临界折射纵波检测方法。本文搭建了GIS环氧复合试样次表面应力超声临界折射纵波检测系统,使用对平行应力变化较灵敏的超声临界折射纵波研究了其传播时间与次表面应力的关系,发现两者呈良好的线性关系,验证了声弹性效应,计算出声弹性系数,验证了GIS环氧试样次表面应力超声临界折射纵波检测的可行性。2)研究了GIS环氧试样内部应力超声纵波穿透检测方法。本文搭建了GIS环氧复合试样压应力下内部应力超声纵波穿透法检测系统,研究了传播方向垂直于应力的纵波声速与压缩应力的关系,发现两者呈良好的线性关系,验证了声弹性效应,计算出声弹性系数,验证了GIS环氧试样内部应力超声检测的可行性。并分析了系统延时和应变对超声应力检测的影响,发现在忽略应变形变量时会对超声应力测量结果造成很大误差。3)研究了盆式绝缘子应力三个正交方向(法向、径向和周向)应力分量超声检测方法。推导出三正交应力分量下的超声纵波、横波声弹性方程(超声声速与应力的关系式),基于此方程,创新性地提出了盆式绝缘子三正交应力分量的超声纵波和横波联合检测方法,此方法消除了绝缘子沿厚度方向的形变对检测结果的影响。将上述方法应用于水压试验下三相共箱盆式绝缘子应力检测中,并研究了此绝缘子中超声传播时间测量方法,为后续研究水压试验下126 k V GIS三相共箱盆式绝缘子应力超声检测提供了理论基础。4)研究了上述三正交应力超声检测方法中所需的垂直、平行应力声弹性系数测量方法。本文搭建了GIS环氧试样垂直压应力、垂直拉应力和平行压应力下反射法声弹性系数测量系统,基于这三个系统分别研究了纵波、横波声速与应力的关系,计算出了传播方向垂直、平行于应力的超声纵波、横波声弹性系数。设计了用于测量传播方向平行于压应力的超声波声弹性系数的探头放置装置。5)对水压试验下126 k V GIS三相共箱盆式绝缘子三正交应力分量超声检测进行了试验研究,并将结果与仿真研究进行了对比和分析。使用上述超声纵波和横波联合检测方法,结合已获得的单轴应力声弹性系数,测量出水压试验下盆式绝缘子应力三正交的法向、径向和周向应力分量,获得应力分量分布规律,将检测结果与仿真结果对比,验证了试验方法的可行性。
唐晓倩[5](2020)在《农产品典型真菌毒素生物识别材料与快速检测方法研究》文中研究表明真菌毒素危害大、防控难,威胁农产品质量安全。开展农产品真菌毒素现场快速检测技术研究,及时发现污染,是防止真菌毒素进入食物链的重要手段。目前快检技术主要面临的挑战表现在:部分真菌毒素高亲和力抗体匮乏、多种类风险因子同步检测难、速测产品抗干扰性差。针对上述问题,本学位论文研制出高灵敏高特异性单克隆抗体、纳米抗体,改良了核酸模拟抗体(适配体)等生物识别材料;并基于三种识别材料依次建立了系列真菌毒素快速检测技术,用于粮油、乳品、水果等不同农产品中典型真菌毒素的高灵敏检测。论文最后,系统分析了这三类主要识别材料的应用特性及在快检产品开发中应用前景。具体研究结果如下:(1)研制出伏马毒素B1(FB1)、二乙酰镳草镰刀菌烯醇(DAS)等系列单克隆抗体(mAb),建立了粮油中FB1灰度成像、真菌毒素与农残同步侧向流层析,及基于新型纳米仿生催化材料的DAS免疫气压传感检测方法。(1)研制出FB1单克隆抗体7A11,半抑制浓度(IC50)为0.66 ng/mL。建立了两类结果输出方式的现场快速检测方法:基于纳米金比色定性方法与灰度成像定量方法,定量线性范围为0.24~15.0 ng/mL。可用于大米、玉米、花生、小麦等农产品中FB1检测,为粮油产品中FB1现场快速筛查提供了经济、快速、可定量的选择方案。(2)研制出甲萘威单克隆抗体1D2与克百威单克隆抗体G11,IC50值分别为0.80 ng/mL和127.6 ng/mL,特异性良好。针对农产品中不同种类小分子污染物并存的现状,以黄曲霉毒素、甲萘威和克百威为例,建立了时间分辨荧光免疫层析(TRFICA)同步快速分析方法。研究表明,该方法对黄曲霉毒素、甲萘威、克百威检测限依次为0.03、0.02、60.2 ng/mL,克服了真菌毒素与农药残留检测方法不同步、灵敏度低的难题。(3)研制出特异性DAS单克隆抗体5E7,亲和力常数Ka值达5.4×108,IC50值为3.08ng/mL;合成并表征了Au@PtNPs纳米颗粒及其与抗体标记探针,由此建立了免疫气压生物传感方法。研究结果表明,该方法检测限达0.46 ng/mL。攻克了DAS识别材料特异性差,缺乏灵敏、准确、便携现场快速筛查方法的技术瓶颈。(2)构建了噬菌体展示纳米抗体文库,研制出黄曲霉毒素M1(AFM1)抗独特型纳米抗体(AIdnb);将纳米抗体用作替代抗原分别开发了牛奶中AFM1电化学检测方法和多种真菌毒素TRFICA同步检测方法。(1)研制的AFM1抗独特型纳米抗体VHH 4-1-1表征结果显示,其对AFM1的IC50值为8.54 ng/mL;采用重氮盐电接枝方法,将VHH 4-1-1修饰在丝网印刷碳电极表面;再采用计时电流法,建立了基于纳米抗体替代抗原的免疫竞争电化学传感方法。研究结果表明,所建立方法对牛奶中AFM1的检测限为0.18 ng/mL,检测范围为0.25~5.0 ng/mL,特异性良好。为食品安全检测领域提供了新型绿色检测方法。(2)为研究抗独特型纳米抗体在TRFICA上作为无毒替代抗原的可行性,采用黄曲霉毒素B1(AFB1)抗独特型纳米抗体phage 2-5和ZEN抗独特型纳米抗体phage 8#为核心识别材料,分别研究了固定化AIdnb的TRFICA竞争分析模式(AIdnb-TRFICA)和固定化mAb的TRFICA竞争分析模式(mAb-TRFICA)。比对两种竞争分析模式的结果表明,AIdnb-TRFICA的灵敏度较高,检测AFB1、ZEN的IC50值分别为0.46和0.86ng/mL,是mAb-TRFICA的18.3和20.3倍。由此采用AIdnb-TRFICA建立了同步检测方法,对AFB1、ZEN检测限达0.13 ng/mL和0.20 ng/mL。结果表明,建立的AIdnb-TRFICA可用于粮食中多种真菌毒素的同步检测,为绿色无毒现场快速、准确定量检测提供了新方法。(3)改良修饰了展青霉素适配体探针,研究建立了基于适配体的苹果汁中展青霉素侧向流层析快速检测方法。以地高辛标记的展青霉素适配体互补链作为捕获探针,生物素标记的适配体作为识别探针,构建了基于“地高辛抗体-捕获探针-识别探针-纳米金信号因子”复合物侧向流层析检测方法,对展青霉素的检测限达2.3 ng/mL,检测范围为2.7~139.8 ng/mL,具有良好的特异性。检测结果与高效液相比对验证表明,该方法可用于苹果汁中展青霉素的快速检测,克服了缺少展青霉素高亲和识别元件导致的现场高灵敏检测技术缺乏的瓶颈难题。(4)系统分析了上述核酸适配体、单克隆抗体、纳米抗体等真菌毒素主要生物识别材料的特性开发与应用前景。研究比较了本文研制的适配体、单克隆抗体与纳米抗体与已报道同类抗体的灵敏度和特异性,结果表明,伏马毒素7A11为迄今报道灵敏度最高,DAS的5E7特异性最好,AFM1抗独特型纳米抗体为首次报道,为快速检测技术提供了高质量核心生物识别材料。通过比较研究各类识别材料发现:适配体的展青霉素分析方法虽然获得了灵敏、准确的定量检测结果,然而适配体与展青霉素的最佳孵育时间长达40 min,为了实现快速检测,该适配体结构仍需进一步优化以缩短反应时间。因此,在缺乏高亲和力抗体时,适配体可作为识别材料的有效选择。本文研制的FB1、DAS、甲萘威、克百威单克隆抗体具有良好的亲和力与特异性,在纳米金、TRFICA及气压传感器检测方法的建立与应用中均实现了灵敏、准确、快速的定量检测。因此,单克隆抗体仍是目前快速检测技术中识别材料的主流选择。纳米抗体是近年来发展起来的新兴识别材料,本文研制的抗独特型纳米抗体对2C9抗体具有特异性识别作用,经纳米抗体修饰后的丝网印刷碳电极具有出色的稳定性。另外,纳米抗体可吸附在硝酸纤维素膜表面,用作无毒替代抗原,在TRFICA方法建立中获得了较高的检测灵敏度,实现了真菌毒素的无毒快速现场检测。因此,纳米抗体在农产品快速检测应用中,既具备单克隆抗体的高亲和性与特异性,又表现出了适配体的稳定与易于修饰的特性。重要的是纳米抗体可作为替代抗原建立无毒快速检测技术,也是其他识别材料无法替代的独有特性。在未来发展方向中,纳米抗体可通过体外亲和力定向改造与结构功能化进一步提高亲和力,拓展新的检测方法与检测模式,在农产品危害物的快速检测领域将具有更为广阔的应用前景。综上所述,研制的系列单克隆抗体、纳米抗体等生物识别材料解决了农产品快速检测中部分真菌毒素高亲和力抗体匮乏难题,并被成功应用于真菌毒素的生物传感检测方法的构建;建立的真菌毒素与农药残留时间分辨荧光同步检测技术解决了多种类风险因子同步检测难的技术瓶颈;而基于纳米抗体无毒抗原生物传感方法的研究解决了农产品快检方法抗干扰性差的难题。因此,本文研制的基于三种识别材料的真菌毒素生物传感方法为目前农产品中面临的挑战提供了解决方案的方法参考。
郭亚文[6](2020)在《鸡肉、禽蛋中三种四环素类和两种氟喹诺酮类药物残留同时检测的UPLC-FLD的研究》文中认为本研究旨在建立鸡肉、禽蛋(鸡全蛋、鸡蛋清、鸡蛋黄、鸭全蛋、鸭蛋清和鸭蛋黄)中三种四环素类和两种氟喹诺酮类药物残留同时检测的超高效液相色谱-荧光检测(UPLC-FLD)方法。本试验以海扬黄鸡和高邮鸭为试验素材,采用液-液萃取(LLE)结合固相萃取(SPE)技术提取目标物,建立并优化鸡肉和禽蛋中土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星残留同时检测的UPLC-FLD方法。其主要研究结果如下:1.建立并优化了利用液-液萃取结合固相萃取(LLE-SPE)技术对鸡肌肉中的土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星残留同时提取的方法。即样品中加入乙腈-0.1 mol/L柠檬酸+100mmol/L氯化镁溶液(1:1,V/V,用氨水调pH值为5.0),涡旋、超声提取,离心去沉淀,收集上清液,重复提取1次,合并上清液,经Oasis PRiME HLB固相萃取小柱(60 mg/3 mL)净化,氮气吹干后加入初始流动相复溶。该提取方法回收率高,五种药物回收率均在87.33%以上。2.建立并优化了利用液-液萃取结合固相萃取(LLE-SPE)技术对禽蛋中的土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星残留同时提取的方法。即样品中加入乙腈:水溶液(90:10,V/V),涡旋、超声提取,离心去沉淀,收集上清液,重复提取1次,合并上清液,经Oasis PRiME HLB固相萃取小柱(60 mg/3 mL)净化,氮气吹干后加入初始流动相复溶。该提取方法回收率高,五种药物回收率均在83.50%以上。3.建立并优化了鸡肌肉、禽蛋中土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星残留同时检测的超高效液相色谱-荧光检测(UPLC-FLD)方法。使用ACQUITY UPLC BEH C18柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)为色谱柱,以乙腈-0.1 mol/L丙二酸+50 mmol/L氯化镁溶液(用氨水调pH值至5.5)为流动相,采用梯度洗脱的方式分离目标物,流速为0.2 mL/min,柱温为35℃,双通道检测,土霉素、四环素、多西环素均采用激发波长为416 nm、发射波长为518nm;环丙沙星和恩诺沙星均采用激发波长为274 nm、发射波长为428 nm。研究结果表明:在空白鸡肌肉中土霉素和四环素添加浓度在定量限(LOQ)-500.0 μg/kg范围内、在空白禽蛋中土霉素和四环素添加浓度在定量限(LOQ)-1000.0 μg/kg范围内、在空白鸡肌肉和空白禽蛋中多西环素、环丙沙星和恩诺沙星添加浓度在(LOQ)-300.0 μg/kg范围内,目标物的峰面积与其浓度均呈现良好的线性关系,决定系数R2均高于0.999 0。土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星在空白样品中添加浓度分别为LOQ、0.5最高残留限量(MRL)、1.0 MRL和2.0 MRL时,空白鸡肌肉中土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星的回收率分别为87.33%-96.90%、87.98%-94.58%、87.70%-93.83%、87.68%-90.73%、90.30%-94.53%,日内相对标准偏差(RSD)分别为 2.30%-4.91%、2.06%-4.74%、3.03%-4.36%、2.34%-3.88%、2.1 7%-3.84%,日间 RSD分别为2.43%-5.13%、2.12%-4.90%、4.06%-4.79%、3.03%-4.08%、2.52%-4.48%,检测限(LOD)分别为 6.1 μg/kg、10.2 μg/kg、13.1 μg/kg、0.2 μg/kg、0.1 μg/kg,定量限(LOQ)分别为 20.4 μg/kg、35.2 μg/kg、39.4 μg/kg、0.6 μg/kg、0.4 μg/kg;空白禽蛋中土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星的回收率分别为 85.30%-91.15%、84.10%-90.20%、83.50%-90.90%、85.53%-92.88%、86.15%-95.58%,日内 RSD 分别为 2.03%-4.52%、2.24%-4.91%、2.13%-3.98%、1.99%-4.70%、2.07%-4.67%,日间 RSD 分别为 2.32%-4.96%、2.57%-5.55%、2.37%-5.80%、2.10%-5.33%、2.81%-6.24%,LOD 分别为 5.2-7.7 μg/kg、8.9-11.8 μg/kg、9.6-13.4 μg/kg、0.2-0.5 μg/kg、0.1 μg/kg,LOQ 分别为 17.4-25.6 μg/kg、27.3-38.3 μg/kg、31.9-40.1 μg/kg、0.6-1.5 μg/kg、0.3-0.5μg/kg。该检测方法快速、高效、灵敏,为动物源性食品中土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星残留同时检测提供了新的检测方法。
陈敏瑞[7](2020)在《纳米团簇点阵复杂导电网络的电阻输运特性及柔性传感器件应用》文中认为密集纳米团簇渗流网络的导电能力对团簇面间距的变化高度敏感这一特性,可被用于构造多种传感器件。若采用柔性材料作为基底,纳米团簇渗流网络可以被用于制造新型的柔性力学传感器。由于在纳米团簇渗流网络中,电子输运同时还依赖于电子内能、隧道结的介电常数等,其电导对环境温度、湿度的变化亦会具有一定的响应。因此,基于密集纳米团簇渗流网络还能够获得多功能的柔性传感器件。随着智能终端的普及,可穿戴电子设备呈现出巨大的市场应用前景。柔性传感器作为核心部件之一,直接决定了可穿戴设备的功能设计与未来发展。通过遍布全身的多功能传感设备,人们将尽可能多地获取各式各样的数据,以供分析和判断包括周围环境、运动健康、药物治疗等在内的信息。力学传感器,特别是压力与应变传感器在这些数据获取的过程中起着至关重要的作用。由于应用环境的特殊性,力学传感器要求应至少对包括触摸、温度等人体皮肤基本感知量作出响应,并进一步扩展到对气压、湿度、振动等更多的感知功能。近年来,可穿戴可植入的力学传感器领域取得了显着的进步。基于纳米技术的柔性可穿戴力学传感器具有尺寸小、轻薄便携、电学性能优异、集成度高、成本低、能耗小等特点,使其成为最受关注的柔性传感器之一。然而,实现柔性可穿戴力学传感器的高分辨、高灵敏、快速响应、低成本制造和复杂信号检测仍然是一个很大的挑战。将低维纳米材料与弹性基底耦合是当前构筑柔性传感器件的普遍方法。本论文采用以紧密间距耦合的方式排列于柔性衬底上的纳米团簇复杂导电网络构造力学传感器。论文实现了多种团簇点阵复杂网络、团簇点阵-柔性基底复合结构的制备方案,对团簇点阵复杂导电网络的电子输运特性进行了探讨,并制备出对应变、压力和温度变化具有高灵敏响应的传感单元,探讨了其在气压精确测量、多功能电子皮肤等方面的应用。论文的主要研究结果如下:一、通过团簇束流沉积将可控尺寸的金属团簇沉积至叉指电极上。将叉指电极接入微电流监控回路可实时监测纳米团簇薄膜电导的演变,并据此可以控制团簇在衬底上的沉积量,制备出电导精确可控的密集纳米团簇渗流网络。此外,通过调制到微米束径团簇束流的程控扫描沉积,在平行电极间可制备出覆盖率呈定向梯度分布的非均匀纳米团簇渗流网络。二、分析了沉积组装的纳米团簇网络的电导随温度的变化关系:随着温度升高,纳米团簇网络的导电能力有所增强,表明了电子在纳米团簇网络中的量子输运行为。电流-电压曲线的发展符合标度理论,显现出明显的非线性。由于库仑阻塞作用,使得在较低温度段的曲线存在阈值电压。纳米团簇网络电导随温度的变化关系证明了:在低温段,电子的输运模式以变程跳跃为主;而在高温阶段,电导随温度的变化关系更符合热激活隧穿模型。测量梯度纳米团簇网络的电流-电压曲线时,发现了电子输运的不对称性,即电子以较低纳米团簇覆盖区域指向较高覆盖区域方向运动时的电导要远高于反方向时的电导。三、由沉积组装的纳米团簇网络与不同高分子聚合物衬底复合而成的柔性传感单元,能够对触感压力、温度等刺激具有响应特性。随着所选择衬底的机械特性不同,传感单元所表现出的感应能力各不相同。采用杨氏模量较低的PDMS作为衬底的传感单元灵敏度最高可达21.3k Pa-1,且能够分辨0.5 Pa的微小压力,响应时间大约为33 ms。而采用PET薄膜作为衬底的传感单元灵敏度为0.25 k Pa-1,但是在上万次的重复性试验中仍然保持着稳定的响应能力。而传感单元的电导对温度的响应灵敏度约为0.00126 K-1,能够轻易分辨1 K以上的环境温度变化。在同一衬底上下表面对应位置组装传感单元,可以根据温度与触感压力导致同组内传感单元电导的不同变化趋势,分别解耦出温度与触感压力的变化,从而实现传感器的多功能化。将多功能的柔性传感器穿戴于身体表面,能够准确识别人体行为动作,并有效降低传感器对于触感信号的测量失真。四、将传感单元密封于一个参考空腔上可制备用于感应环境气压变化的传感器。当该柔性气压传感器以一层0.05 mm厚的PET薄膜作为衬底时,其灵敏度约为0.13 k Pa-1,分辨率约为0.5 Pa,响应范围约为0-1 k Pa。当以更厚的PET薄膜作为衬底时,传感器的灵敏度和分辨率都有所降低,但其测量范围更大。这种分辨率极高的气压传感器能够分辨不同楼层高度的环境大气压之间的差异,因此,气压传感器又可以制作成高度传感器。在作为高度传感器时,其灵敏度约为0.00026 m-1,能够分辨1 m的高度变化。
彭科[8](2020)在《右美托咪定调控HIF-1α信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤的分子机制研究》文中研究说明第一部分 右美托咪定后处理减轻原代乳鼠心肌细胞的缺氧复氧损伤目的:探讨右美托咪定(dexmedetomidine,DEX)后处理对原代乳鼠心肌细胞缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)过程中心肌细胞损伤的影响。方法:(1)新生乳鼠原代心肌细胞的提取和培养。选取新生48小时内的Sprague Dawley(SD)大鼠提取和原代培养心肌细胞,并运用免疫荧光染色法鉴定心肌细胞的纯度。(2)不同浓度的右美托咪定对正常培养的原代心肌细胞的影响。将原代心肌细胞随机分为5组(每组n=6):对照组,0.1、1、10、50μM不同浓度的右美托咪定处理24小时组。与对照组相比,观察不同浓度的右美托咪定对正常状态下培养的心肌细胞是否存在细胞毒性。(3)不同缺氧复氧时间对原代心肌细胞活力的影响。将原代心肌细胞随机分为7组(每组n=6):对照组和6个H/R组。H/R组通过氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)建立细胞 H/R 模型,分别于缺氧 3、6、12 小时+复氧3小时(H3R3、H6R3、H12R3组)以及缺氧6小时+复氧6、12、24小时(H6R6、H6R12、H6R24组)的不同缺氧复氧时间点使用cell counting kit-8(CCK-8)试剂盒检测心肌细胞活力,确定本实验条件下细胞缺氧复氧模型的作用时间点。(4)不同浓度右美托咪定后处理对原代心肌细胞H/R损伤后细胞活力和细胞毒性的影响。将原代心肌细胞随机分为5组(每组n=6):对照组、H/R组,3个右美托咪定处理组。处理组中分别给予0.1、1、10μM不同浓度的右美托咪定后处理(即在复氧开始时加入到细胞培养基),使用CCK-8和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测心肌细胞活力和细胞毒性,以确定本实验中最佳的右美托咪定后处理浓度。(5)右美托咪定后处理对原代心肌细胞H/R损伤时细胞凋亡的影响。将原代心肌细胞随机分为3组(每组n=6):对照组、H/R组、H/R+DEX组。在复氧开始时给予1 μM的右美托咪定后处理,复氧结束后采用Annexin V-FITC/PI双染法和流式细胞技术检测心肌细胞的凋亡率。(6)右美托咪定后处理对原代心肌细胞H/R损伤时缺氧诱导因子-1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)、凋亡相关基因 B 淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,BCL-2)和BCL2样蛋白X(BCL2-Associated X,BAX)蛋白表达水平影响。将原代心肌细胞随机分为3组(每组n=6):对照组、H/R组、H/R+DEX组。使用Western Blot检测各组HIF-1α、BCL-2、BAX蛋白水平的表达。(7)右美托咪定后处理对原代心肌细胞H/R损伤时HIF-1α和BAX在细胞内的定位的影响。将原代心肌细胞随机分为3组(每组n=6):对照组、H/R组、H/R+DEX组。使用双标免疫荧光法检测各组心肌细胞内HIF-1α和BAX蛋白在细胞中的定位情况和表达水平。以上各组数据以均值±标准误表示,使用GraphPad 7软件进行统计学分析处理。结果:(1)乳鼠原代心肌细胞正常培养至72小时,经免疫荧光染色鉴定其心肌细胞纯度达98%,可稳定供以下实验使用。(2)0.1、1、1 0 μM的右美托咪定对于正常培养的心肌细胞活力均无显着影响,而高浓度的右美托咪定(50μM)则使得细胞活力降低至对照组的82.42±2.39%(P<0.01),说明右美托咪定大于50μM的浓度时会对原代心肌细胞产生一定的细胞毒性。(3)心肌细胞的活力在H3R3、H6R3、H12R3、H6R6、H6R12、H6R24的各个不同时间点和对照组细胞相比均明显下降(P<0.01),选取缺氧6小时复氧3小时用于后续的细胞实验(此时细胞活力下降至对照组的63.21±1.74%)。(4)与H/R组相比,使用0.1、1、10μM的右美托咪定后处理显着改善H/R损伤后的心肌细胞活力,减少LDH释放量(P<0.01)。其中浓度为1 μM的右美托咪定后处理效果最好,细胞活力与H/R组相比为75.21±2.23%vs.60.00±1.11%(P<0.01),培养基中 LDH 释放量与 H/R 组相比为 200.8±7.37%vs.267.5 ± 5.57%(P<0.01)。因此,选取1μM的右美托咪定用于后续的细胞实验。(5)流式细胞凋亡率检测结果显示,与对照组相比,缺氧复氧过程显着增高原代心肌细胞的凋亡率至38.60±0.90%(P<0.01),而使用1 μM右美托咪定后处理可以使H/R损伤后的心肌细胞凋亡率降低至20.94±0.96%(P<0.01)。(6)Western Blot结果显示,H/R组细胞HIF-1α和BAX的蛋白表达水平显着升高(P<0.01),而BCL-2蛋白表达和BCL-2/BAX的比值显着降低(P<0.01)。右美托咪定后处理显着降低了 HIF-1α和BAX蛋白的表达水平(P<0.01),并且翻转了 BCL-2蛋白表达(P<0.05)以及BCL-2/BAX的比值(P<0.01)。(7)双标免疫荧光实验结果显示,HIF-1α与BAX蛋白的表达在原代心肌细胞内存在共定位关系。在H/R组中,HIF-1α和BAX的荧光表达强度较对照组显着升高(P<0.01),右美托咪定后处理显着降低了H/R损伤时HIF-1α和BAX的荧光表达水平(P<0.01)。结论:1 μM右美托咪定后处理可以显着减轻乳鼠原代心肌细胞缺氧复氧损伤,具体表现为改善H/R损伤导致的细胞活力下降、减轻细胞毒性、抑制LDH释放量、以及降低细胞凋亡率。右美托咪定后处理在细胞水平上减轻缺氧复氧损伤的保护作用很可能与其抑制HIF-1α蛋白的表达,调节凋亡相关蛋白的水平,从而抑制H/R损伤导致的心肌细胞凋亡有关。第二部分 右美托咪定后处理通过在转录后水平抑制HIF-1α信号减轻缺氧复氧过程中心肌细胞凋亡的分子机制目的:进一步探讨右美托咪定后处理是否通过调控HIF-1α的转录活性、抑制细胞凋亡、从而减轻缺氧复氧导致的心肌细胞损伤及其分子机制。方法:(1)HIF-1α 脯氨酰羟化酶 2(prolyl hydroxylase-2,PHD2)抑制剂 IOX2 对原代心肌细胞常氧和H/R状态下HIF-Iα和凋亡相关蛋白表达的影响。将原代心肌细胞随机分为4组(每组n=6):对照组、对照+IOX2组、H/R组、H/R+IOX2组。IOX2是一种特异性的HIF-1α PHD2抑制剂,可通过抑制HIF-1α的降解从而增强其转录活性。IOX2的使用浓度为50μM,在复氧开始时使用右美托咪定前加入到细胞培养基之中。使用Western Blot方法检测HIF-1α、Bcl-2/adenovirus E1B 19kDa相互作用蛋白3(Bcl-2/adenovirus E1B 19kD interacting protein 3,BNIP3)、半胱氨酸蛋白酶-3 剪切体(cleaved caspase-3)蛋白水平的表达。(2)IOX2对右美托咪定后处理的原代心肌细胞H/R损伤时细胞活力的影响。将原代心肌细胞随机分为6组(每组n=6):对照组、对照+IOX2组、H/R组、H/R+DEX组、H/R+DEX+IOX2组、H/R+DEX+溶剂组。其中溶剂为0.1%的二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO),用于溶解IOX2。使用CCK-8试剂盒检测各组心肌细胞的活力。(3)IOX2对右美托咪定后处理的原代心肌细胞H/R损伤时线粒体膜电位的影响。将原代心肌细胞随机分为5组(每组n=6):对照组、H/R组、H/R+DEX组、H/R+DEX+IOX2组、H/R+DEX+溶剂组。使用JC-1荧光染色法检测各组心肌细胞线粒体膜电位(ΔΨm)水平。正常线粒体膜中,JC-1以聚合体的形式出现,在荧光显微镜下呈现出红色荧光;而凋亡细胞的线粒体膜电位ΔΨm下降或消失,JC-1以单体的形式出现,在荧光显微镜下呈现出绿色荧光。通过分析不同状态下JC-1红色/绿色荧光的比值可以得到细胞线粒体膜电位的相对数值,线粒体膜电位下降提示线粒体的结构性损伤。(4)IOX2对右美托咪定后处理的原代心肌细胞H/R损伤时HIF-1α和凋亡相关蛋白表达的影响。将原代心肌细胞随机分为4组(每组n=6):H/R组、H/R+DEX组、H/R+DEX+IOX2 组、H/R+DEX+溶剂组。使用 Western Blot 检测各组细胞 HIF-1α和 BCL-2、BAX、BNIP3、cleaved caspase-3、聚 ADP-核糖聚合酶 1 剪切体(cleaved poly ADP-ribose polymerase 1,cleaved PARP-1)蛋白水平的表达。(5)右美托咪定后处理对原代心肌细胞H/R损伤时HIF-1α及其靶基因BNIP3的mRNA表达水平的影响。将原代心肌细胞随机分为3组(每组n=6):对照组、H/R组、H/R+DEX 组。使用荧光定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测各组细胞内HIF-1α及其靶基因BNIP3的mRNA表达水平。(6)通过质粒转染正常培养的原代心肌细胞以证实HIF-1α对BNIP3启动子的激活情况。合成目的基因 HIF-1α DNA,将其构建到质粒载体 pLenti-GⅢ-CMV-GFP-2A-Puro上:并合成启动子BNIP3 promoter和BNIP3启动子突变体,将其构建到双荧光酶素报告质粒载体 pLenti-miniCMV-RenLuc-PGK-Luc-SV40-GFP-2A-Puro 上。将原代心肌细胞随机分为4组(每组n=6):BNIP3启动子组、BNIP3启动子+空载质粒组、BNIP3启动子+HIF-1α质粒组、BNIP3启动子突变+HIF-1α质粒组。将质粒转染正常培养的心肌细胞24小时后,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达强度,并使用双荧光素酶报告基因试剂盒检测转录因子HIF-1α对BNIP3启动子的激活情况。(7)IOX2对右美托咪定后处理的原代心肌细胞H/R损伤时BNIP3启动子活性的影响。将原代心肌细胞随机分为6组(每组n=6):对照组、对照+DEX组、H/R组、H/R+DEX 组、H/R+DEX+IOX2 组、H/R+DEX+溶剂组。将报告基因 BNIP3 promoter质粒分别转染以上细胞24小时之后,按照分组情况对细胞进行H/R、DEX、IOX2的处理。使用双荧光素酶报告基因试剂盒检测BNIP3启动子的活性。以上各组数据以均值±标准误表示,使用GraphPad 7软件进行统计学分析处理。结果:(1)Western Blot结果显示,IOX2使正常培养的原代心肌细胞HIF-1α蛋白表达水平明显着升高为对照组的254.4±22.37%(P<0.01)。在H/R状态下,IOX2仍有进一步升高HIF-1α的趋势,但差异不具有统计学意义(431.1±37.86%vs.353.2±35.61%,P>0.05)。同时,IOX2并不影响BNIP3和cleaved caspase-3在正常培养的细胞和H/R状态下细胞中的表达。该结果说明IOX2可以有效的稳定HIF-1α的表达水平而并不增加细胞凋亡。(2)IOX2对于正常培养的心肌细胞活力没有明显影响。H/R造成细胞活力显着下降至对照组的60.26 ± 2.17%(P<0.01),使用1 μM的右美托咪定后处理使细胞活力升高为77.72±1.63%(P<0.01),而IOX2使用后细胞活力又下降为63.10±2.36%(P<0.01)。因此,IOX2逆转了右美托咪定后处理的作用,说明右美托咪定后处理通过调控HIF-1α减轻H/R导致的心肌细胞活力下降。(3)线粒体膜电位JC-1染色结果显示,H/R使原代心肌细胞的线粒体膜电位ΔΨm显着下降,即较高的绿色JC-1单体/红色JC-1聚合体比值。1μM的右美托咪定后处理减轻了线粒体膜电位ΔΨm的下降,使得红色JC-1聚合体增加,绿色JC-1单体减少。然而,IOX2的使用逆转了右美托咪定对线粒体膜电位ΔΨm的效果(P<0.01)。这提示右美托咪定后处理通过调控HIF-1α减轻H/R导致心肌细胞凋亡过程中线粒体结构损伤。(4)Western Blot结果显示,1 μM的右美托咪定后处理使H/R时原代心肌细胞的HIF-1α、BNIP3、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1 蛋白表达水平显着减少(P<0.01),而BCL-2/BAX蛋白表达比值显着增加(P<0.01),IOX2则逆转了右美托咪定对上述蛋白的效果(P<0.05或P<0.01)。该结果证实右美托咪定后处理通过调控HIF-1α减轻H/R导致心肌细胞凋亡相关蛋白的改变。(5)qPCR结果显示,H/R时HIF-1α和BNIP3的mRNA表达水平显着升高(P<0.01)。1μM的右美托咪定后处理显着降低了 H/R时的BNIP3的激活(P<0.01),但并没有明显改变HIF-1α的mRNA表达水平。该结果提示右美托咪定后处理在HIF-1α的转录后水平而非mRNA水平抑制了 HIF-1α蛋白对靶基因BNIP3的激活。(6)正常培养的心肌细胞转染BNIP3启动子/启动子突变体、HIF-1α质粒24小时后,双荧光酶素报告基因结果显示BNIP3启动子+HIF-1α质粒组的荧光素酶活性显着升高(P<0.01),BNIP3启动子突变+HIF-1α DNA质粒组的荧光素酶活性与之相比则显着降低(P<0.01)。该结果说明合成的BNIP3启动子可以被HIF-1α DNA激活,该质粒系统的构建有效。(7)双荧光酶素报告基因结果显示,H/R时荧光素酶活性显着升高、BNIP3启动子被激活(P<0.01),1 μM的右美托咪定后处理则降低了 H/R引起的高荧光素酶活性(P<0.01)。然而,IOX2的使用逆转了右美托咪定对BNIP3启动子活性的抑制作用(P<0.01)。该结果证实右美托咪定后处理通过调控HIF-1α的转录活性抑制了 H/R导致的BNIP3启动子的激活。结论:特异性HIF-1α脯氨酰羟化酶-2抑制剂IOX2可以稳定HIF-1α蛋白的表达水平,同时对乳鼠原代心肌细胞的活性和细胞凋亡没有不良影响。1 μM的右美托咪定后处理可以改善H/R后原代心肌细胞的活力、恢复线粒体膜电位、减轻线粒体结构损伤、调控凋亡相关蛋白 BCL-2、BAX、BNIP3、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1 的表达水平、并在转录后水平抑制了 HIF-1α对靶基因BNIP3的激活。然而,IOX2逆转了上述效果,阻断了右美托咪定后处理对原代心肌细胞缺氧复氧的保护作用。综合本部分机制研究的结果,右美托咪定后处理通过在转录后水平作用于HIF-1α此关键靶点,抑制其对下游靶基因的激活,抑制凋亡级联反应,减少细胞凋亡,从而在细胞水平减轻原代心肌细胞缺氧复氧损伤。第三部分 右美托咪定后处理通过调控HIF-1α信号抑制细胞凋亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤目的:阐明右美托咪定后处理对大鼠心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)过程中心肌损伤和凋亡相关蛋白表达的影响,并进一步证实右美托咪定后处理通过调控HIF-1α信号通路发挥对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:(1)大鼠心肌缺血再灌注过程中HIF-lα蛋白表达随再灌注时间的变化。取24只健康成年雄性SD大鼠随机分为4组(每组n=6):假手术组、心肌缺血30分钟再灌注2小时、6小时、和24小时组。使用Western Blot检测再灌注2、6、24小时大鼠左心室组织中HIF-1α的蛋白表达水平,取其表达变化最显着的时刻作为后续实验的观察时间点。(2)右美托咪定后处理和IOX2对心肌缺血再灌注过程中大鼠心率的影响。使用MedLab生物医学信号处理系统监测大鼠心电图的变化。取42只健康成年雄性SD大鼠随机分为7组(每组n=6):假手术组、假手术+DEX组、I/R组、I/R+IOX2组、I/R+DEX组、I/R+DEX+IOX2组、I/R+DEX+溶剂组。其中溶剂为5%二甲基亚砜(DMSO)+30%聚乙二醇300(PEG300),用于溶解IOX2。再灌注开始时,经过右颈内静脉泵注右美托咪定负荷剂量6 μg/kg/h持续10分钟,追加维持剂量0.7μg/kg/h持续15分钟。IOX2组中,使用右美托咪定前经大鼠腹腔给予25μg/mg的IOX2。记录基础值、缺血15和30分钟、再灌注15、30、60分钟的心率值,并比较心率随时间变化的曲线下面积以观察心率在此期间整体的变化。(3)右美托咪定后处理和IOX2对大鼠心肌缺血再灌注过程中动脉血气、电解质、酸碱平衡的影响。上述7组大鼠于再灌注6小时经腹主动脉取血,行动脉血pH、动脉血氧分压(partial pressures of oxygen,PaO2)、动脉血二氧化碳分压(partial pressures of carbon dioxide,PaCO2)、动脉氧饱和度(arterial oxygen saturation,SaO2)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、红细胞压积(hematocrit,Hct)、Na+、K+、Ca2+、Cl-、HCO3-、碱剩余(base excess,BE)的分析,以了解各组动物在实验过程中内环境的是否稳定。(4)IOX2对右美托咪定后处理的大鼠心肌缺血再灌注过程中血清心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)的影响。取36只健康成年雄性SD大鼠随机分为6组(每组 n=6):假手术组、假手术+DEX 组、I/R 组、I/R+DEX 组、I/R+DEX+IOX2组、I/R+DEX+溶剂组。给药方式同第(2)部分。于再灌注6小时取下腔静脉血,使用酶联免疫吸附测定法(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)检测血清cTnI的水平,以明确各组大鼠心肌损伤的程度。(5)IOX2对右美托咪定后处理的大鼠心肌缺血再灌注导致的心肌组织凋亡的影响。上述6组大鼠于再灌注6小时取左心室组织,行冰冻切片。并使用原位末端标记法(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL)标记凋亡细胞断裂基因组 DNA的3’-OH末端,在荧光显微镜下检测各组大鼠心肌绀织的凋亡情况。(6)IOX2对右美托咪定后处理的大鼠心肌缺血再灌注导致的心肌梗死面积的影响。取36只健康成年雄性SD大鼠随机分为6组(每组n=6):假手术组、I/R组、I/R+IOX2 组、I/R+DEX 组、I/R+DEX+IOX2 组、I/R+DEX+溶剂组。于再灌注 6小时,左心室组织行2%伊文氏蓝/1%氯化二苯四氮唑(Evans blue/2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色,分析心肌组织缺血危险区(area at risk,AAR)和心肌梗死区(infarct area,IA)的面积,心肌切片后以称重法分别记录其重量,心肌梗死面积最终以IA 区的承量占AAR区的市量的百分比(IA总重量/AAR总重量×100%)来表示。(7)IOX2对右美托咪定后处理的大鼠心肌缺血再灌注过程中HIF-1α和凋亡相关蛋白表达的影响。取36只雄性SD大鼠随机分为6组(每组n=6):假手术组、I/R组、I/R+IOX2 组、I/R+DEX 组、I/R+DEX+IOX2 组、I/R+DEX+溶剂组。使用 Western Blot检测缺血再灌注、右美托咪定、IOX2干预后各组大鼠心肌组织中HIF-1α和凋亡相关蛋白 BCL-2、BAX、BNIP3、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1 的表达水平的变化。(8)心肌缺血再灌注实验过程中各组大鼠死亡率的比较。记录和比较以上所有7部分实验中,在未达到实验终点前由于任何原因引起的的大鼠死亡情况。以上各组数据以均值±标准误表示,使用GraphPad 7软件进行统计学分析处理。结果:(1)Western Blot结果显示,缺血30分钟再灌注2、6、24小时的三组大鼠心肌组织内HIF-1α蛋白表达均较假手术组显着升高(P<0.01),且再灌注6小时组的表达量显着高于2小时组(P<0.01)和24小时组(P<0.05)。因此,选取缺血30分钟再灌注6小时作为最佳时间点应用于后续大鼠实验。(2)心电图及心率监测结果显示,心肌缺血再灌注过程引起了大鼠心电图的显着变化,即缺血时ST段显着抬高、再灌注时出现快速型心律失常如室性心动过速、甚至室颤。右美托咪定后处理对于ST段变化和心律失常没有显着影响。实验过程中右美托咪定组的大鼠心率有减慢的趋势,但组内和组间比较的差异都不具有统计学意义(P>0.05),各组的曲线下面积(心率×时间)也相似。(3)血气、电解质、血红蛋白的结果显示,再灌注6小时各组大鼠的动脉血pH、Pa02、PaCO2、SaO2、Hb、Hct、Na+、K+、Ca2+、Cl-、HCO3-、BE 数值都在正常范围。与假手术组相比,经受心肌I/R的大鼠PaCO2、HCO3-、BE的数值偏低,但组间比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。因此,实验过程中大鼠的内环境保持稳定。(4)血清cTnI检测结果显示,I/R组大鼠血清cTnI浓度显着升高为9.78±0.42 ng/ml(P<0.01),右美托咪定后处理则使cTnI降低至5.07±0.33 ng/ml(P<0.01),但I/R+DEX+IOX2组又升高为8.19±0.43 ng/ml(P<0.01)。右美托咪定后处理显着减少了大鼠心肌I/R导致的cTnI释放,该保护作用被IOX2逆转,提示右美托咪定后处理通过调控HIF-1α减轻I/R导致的大鼠心肌组织损伤。(5)TUNEL凋亡检测结果显示,I/R组大鼠心肌组织凋亡率为36.67±1.97%(P<0.01),右美托咪定后处理组则降低至15.59±0.80%(P<0.01),而I/R+DEX+IOX2组又升高为28.74±1.38%(P<0.01)。此结果证明右美托咪定后处理通过调控HIF-1 α减轻I/R导致大鼠心肌组织的凋亡。(6)Evans Blue/TTC双染检测结果显示,除假手术组外的各组大鼠心肌缺血危险区AAR的面积在45%左右,组间具有可比性(P>0.05)。I/R组和I/R+IOX2组大鼠的心肌梗死面积显着升高为39.27±0.72%和41.53±1.50%(P<0.01),右美托咪定后处理显着降低梗死面积至20.20±2.07%(P<0.01),而IOX2又使梗死面积增加至33.90±2.06%(P<0.01)。因此,右美托咪定后处理通过调控HIF-1α减轻I/R导致的大鼠心肌梗死面积。(7)Western Blot的结果显示,右美托咪定后处理使I/R时心肌组织的HIF-1α、BNIP3、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1 蛋白表达水平显着减少(P<0.01),BCL-2/BAX蛋白表达比值显着增加(P<0.01),而IOX2则逆转了右美托咪定对上述蛋白的效果(P<0.05或P<0.01)。该结果证实右美托咪定后处理通过调控HIF-1α蛋白减轻I/R导致大鼠心肌凋亡相关蛋白的改变。(8)整个实验过程中总共有9只大鼠在实验终点前死亡。死亡原因包括失血、严重心律失常(室性心动过速和室颤)、呼吸衰竭。死亡率分别为:假手术组(1/25,即4.0%)、假手术+DEX组(0/6,即0%)、I/R组(2/38,即5.26%)、I/1R+IOX2组(2/20,即 10%)、I/R+DEX 组(1/1 9,即 5.26%)、I/R+DEX+IOX2 组(2/20,即10%)、I/R+DEX+溶剂组(1/19,即5.26%)。各组死亡率的组间比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:右美托咪定后处理可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,表现为降低血清cTnl水平、减轻心肌组织凋亡、减少心肌梗死面积、调控凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、BNIP3、cleaved caspase-3、cleaved PARP-1 的表达水平。特异性 HIF-1α 脯氨酰羟化酶-2抑制剂IOX2则逆转了右美托咪定后处理的心肌保护作用和以上指标的变化。综合本部分研究结果,右美托咪定后处理通过作用于HIF-1α此关键靶点减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。
聂荣彬[9](2020)在《新型化学发光免疫传感器的构建与应用》文中指出免疫传感器是基于抗体和抗原之间的特异性识别功能而构建的一类生物传感器,在临床诊断、食品安全和环境监测等领域有着广阔的应用前景。作为传统免疫检测方法和生物传感技术的结合,免疫传感器不仅具有极高的特异性,而且简化了分析过程,因而引起了诸多研究者的关注。目前,免疫传感器的研究重点和热点主要集中在提高检测灵敏度、扩展检测范围以及实现现场快速检测(Point-of-Care Testing,POCT)等方面。近年来,基于石英毛细管和光纤的免疫传感器发展十分迅速。作为生物识别分子的固相载体,石英毛细管和光纤具有独特的优势:1)其主要成分为二氧化硅,可以通过丰富的硅化学方法将抗体或抗原固定在其表面;2)具有优异的导光性能,是构建光学免疫传感器的理想材料,如化学发光免疫传感器;3)极大降低了试剂和样品的消耗,尤其适合少量生物样品的分析。然而,石英毛细管和光纤固有的微纳尺寸和一维结构限制了生物识别分子的固载量,进而制约了免疫传感器检测灵敏度的提高和线性范围的改善。本论文围绕新型化学发光毛细管和光纤免疫传感器的构建和应用,提出了一系列改善其分析性能的有效策略,并对免疫分析仪器系统进行了集成化研究。具体内容如下:(1)提出了将信号放大系统与基于毛细管的免疫分析相结合的策略,构建了一种具有超高灵敏度的化学发光毛细管免疫传感器。在本项研究中,我们以石英毛细管为免疫识别分子的固相载体,利用链霉亲和素(SA)和生物素化辣根过氧化物酶(B-HRP)自组装形成的SA-B-HRP纳米复合物对化学发光信号进行放大,实现了人血清中降钙素原(PCT)的定量检测。结果表明,所构建的毛细管免疫传感器不仅具有较高的特异性,且兼具了极少的样品消耗和超高的灵敏度等优势。与常规的毛细管免疫传感器相比,其灵敏度提高了至少两个数量级。此外,利用该方法对实际血清样品中PCT的测定结果与临床方法相符,表现出极高的准确度。因此,所构建的新型化学发光信号放大-毛细管免疫传感器在PCT以及其它低含量生物标志物的检测中具有潜在应用价值。(2)构建了一种线性范围可调的化学发光光纤免疫传感器,用于牛奶样品中氯霉素、磺胺嘧啶、新霉素三种兽药残留的快速灵敏检测。在本项研究中,光纤探针同时作为生物识别分子的固相载体和信号传导元件,极大地降低了仪器的复杂性。更重要的是,通过对光纤进行调制(包括传感响应纤芯长度和光纤探针根数),可以实现免疫传感器线性范围从pg/mL至μg/mL的可控调节,以满足不同浓度目标物的检测需求。此外,SA-B-HRP纳米复合物与光纤免疫传感器的结合进一步提高了其检测灵敏度。所构建的线性范围可调的化学发光光纤免疫传感器采用了集成化设计,方便现场操作,可实现低丰度和高丰度目标物的多重定量检测。(3)构建了一种便携式铅笔型免疫传感器(PPS)分析平台,用于炎症标志物的现场即时检测。集成化的PPS平台由四部分组成:铅笔型光纤免疫传感器、浸入式免疫反应试剂带、紧凑型电池供电光子计数器以及数据处理系统。铅笔型光纤免疫传感器采用类似自动铅笔结构的设计,通过旋转可以实现光纤探针的可控伸缩,旋出的探针依次浸入免疫反应试剂带上各个试剂瓶中,可完成样品中目标物检测涉及的所有反应;电池供电、持久续航的高灵敏光子计数器,可用于现场环境中化学发光信号的检测;数据处理由触屏电脑完成。整个平台尺寸为32 cm*23 cm*11 cm,重量仅为3 kg。此外,PPS所使用的光纤探针可进行多达10次连续分析,降低了实验成本并避免了探针的频繁更换。所构建的PPS平台具有设计简明、灵活便携、功能集成且操作简单等优点,符合现场即时检测的要求,在疾病的早期诊断与筛查,以及监测治疗效果方面具有广阔的应用前景。(4)构建了一种全方位化学发光采集-光纤免疫传感器,实现了痕量生物标志物的超灵敏检测。在本项研究中,采用凹面镜和同轴管状镜分别作为瓶底和瓶壁,制作了全光学化学发光采集瓶(CC vial),显着增加了化学发光的采集效率,提高了光纤免疫传感器的灵敏度。以心肌肌钙蛋白I(cTnI)为分析物模型,通过CC vial进行全方位化学发光采集,其检出限比普通化学发光光纤免疫传感器降低了约两个数量级。此外,所提出的提高灵敏度的策略既不依赖复杂的仪器,也无需额外的化学试剂,经济实用,为痕量生物标志物的超灵敏检测提供了有力的工具。
支绍韬[10](2020)在《基波模式微型正交磁通门传感器及其生物检测应用研究》文中研究指明高精度微型磁传感器广泛应用于地质勘探、空间磁场探测、环境监测、交通控制、磁性存储、消费电子和生物医学等领域。正交磁通门传感器作为一种特殊类型的磁通门器件,除了拥有常规磁通门传感器高灵敏度、高线性度、低温度漂移和可在室温下工作等特点外,还具有两个独特的优势:一方面由于不需要激励线圈,使得传感器的结构非常简单,具有更好的微型化潜力;另一方面可以在基波模式下工作,有效抑制了巴克豪森噪声,使得传感器的输出噪声非常低。采用非晶薄带或电镀FeNi薄膜材料作为正交磁通门传感器的磁芯,并结合微机电系统(Micro-Electro-Mechanical System,MEMS)技术可以使正交磁通门传感器探头微型化。磁芯结构直接影响微型正交磁通门传感器的性能,本文设计了曲折磁芯结构,在保证高灵敏度和低噪声的同时,提高了传感器的线性工作范围,这可以进一步拓展微型正交磁通门传感器的应用领域。近年来,基于磁标签的磁生物传感器在生物医学检测领域得到了大力发展,但仍然存在灵敏度低、稳定性差和需要较高外加磁场等缺点,还无法得到广泛应用。高灵敏度、低噪声、宽线性范围的微型正交磁通门传感器非常适合磁生物传感器的应用要求,在生物检测领域具有很好的应用潜力。基于以上考虑,本文开展了基于基波模式微型正交磁通门传感器的器件研制和生物检测应用研究,一方面发展一种高性能的基于MEMS技术的微型正交磁通门传感器,另一方面将该微型正交磁通门传感器应用于生物检测领域,为建立一套相对完善的基于微型正交磁通门传感器的生物检测系统打下基础。本论文的主要研究工作如下:1.提出了一种新型的基于曲折薄带磁芯结构的基波模式正交磁通门传感器,并开展理论研究。根据法拉第电磁感应定律和磁导率调制机制,在基波工作模式下,推导了单条薄带磁芯正交磁通门传感器的输出电压数学计算公式。建立了正交磁通门曲折磁芯结构的退磁模型,通过有限元仿真和理论计算,分析讨论了曲折磁芯条数、线宽和间距变化对传感器灵敏度的影响,为后续的MEMS工艺制备微型正交磁通门传感器提供理论支持。2.开展了基于Co基非晶薄带的磁芯结构和磁场退火的实验研究。以Co基非晶薄带作为正交磁通门传感器的磁芯材料,采用微加工工艺制备了不同结构的曲折磁芯,通过在曲折磁芯上缠绕感应线圈的方式组建简易的正交磁通门传感器,实验上研究了曲折薄带磁芯结构变化对正交磁通门传感器性能的影响。实验结果与仿真结果非常符合,证明了仿真数学模型的正确性,同时获得了优化的磁芯结构。对Co基非晶薄带材料进行磁场退火研究,讨论了不同磁场退火温度和方向对非晶薄带材料磁特性和传感器性能的影响。采用振动样品磁强计(VSM)、X射线衍射仪(XRD)和磁光克尔效应(MOKE)显微镜等多种材料测试工具测试退火薄带磁特性。研究结果表明,Co基非晶薄带300°C退火时可以获得较高的材料软磁特性和传感器性能,纵向磁场退火使得传感器的灵敏度更高,横向磁场退火使得传感器的噪声更低。该研究为研制高性能的微型正交磁通门传感器提供了磁芯结构和材料方面的保障。3.开展了基于MEMS技术的微型正交磁通门传感器制备工艺研究和性能测试。利用MEMS工艺分别制备了基于Cu/FeNi磁芯和Co基非晶薄带磁芯的三维微线圈正交磁通门传感器。通过所搭建的基波模式正交磁通门传感器测试系统,对制备的微型正交磁通门传感器的性能进行测试与分析。在不同的激励条件下分别测试了微型正交磁通门传感器的灵敏度、线性范围、噪声、剩磁误差和稳定性等性能指标。研制的Co基非晶薄带磁芯微型正交磁通门传感器的尺寸控制在0.4 cm2以下,灵敏度达到660 V/T,线性范围为0~600μT,最小噪声低至0.05 n T/√Hz@1 Hz。与同类别微型磁通门相比,在线性范围、灵敏度和噪声水平等方面均有较大提高。4.开展了基于微型正交磁通门传感器的生物检测应用研究。首先利用研制的微型正交磁通门传感器对直径1μm的My One超顺磁珠进行检测,成功实现在0.1~50μg/m L浓度范围内对磁珠进行定量检测。然后利用超顺磁珠标记技术、自组装膜工艺和双抗夹心等方法分别制备了甲胎蛋白AFP和大肠杆菌O157:H7生物样品,并开展灵敏性和特异性检测研究。实验结果表明,对AFP抗原的检测极限可以达到0.1 ng/m L,在0.1~10 ng/m L浓度范围内,输出信号差值与浓度对数具有很好的线性关系。对大肠杆菌O157:H7的检测极限可以达到100 CFU/m L,在100~1000 CFU/m L浓度范围内,具有较好的线性关系。基于微型正交磁通门传感器的分离式生物检测方法具有快速简便、灵敏度高、特异性高和稳定性好等优点。
二、0.1μm发光薄膜的表面压力分布测定法(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、0.1μm发光薄膜的表面压力分布测定法(论文提纲范文)
(1)适配体介导碳基纳米探针及其催化放大-金纳米溶胶SERS/RRS检测痕量铅和钾离子(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
1 绪论 |
1.1 纳米等离子体分子光谱分析进展 |
1.1.1 光的吸收与散射 |
1.1.2 SERS定量分析进展 |
1.2 纳米酶催化放大 |
1.2.1 纳米酶研究进展 |
1.2.2 纳米酶在分子光谱中的应用 |
1.2.3 适配体分析 |
1.3 分子光谱双模方法 |
1.3.1 纳米溶胶的荧光双模方法 |
1.3.2 SERS双模方法 |
1.4 铅离子钾离子等分析进展 |
1.4.1 铅离子分析进展 |
1.4.2 砷分析进展 |
1.4.3 钾离子分析进展 |
1.5 本课题研究主要内容 |
1.6 本课题研究主要意义 |
2 简便灵敏的掺氮碳量子点适配体荧光传感器测定痕量铅离子 |
2.1 前言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 仪器 |
2.2.2 试剂 |
2.2.3 碳量子点(CDs)的制备 |
2.2.4 实验方法 |
2.3 结果讨论 |
2.3.1 分析原理 |
2.3.2 荧光光谱(FL) |
2.3.3 透射电镜(TEM) |
2.3.4 粒度分析 |
2.3.5 碳点稳定性 |
2.3.6 吸收光谱(Abs) |
2.3.7 红外光谱(IR) |
2.3.8 三维荧光光谱(3D-FL) |
2.3.9 掺氮碳点合成分析 |
2.3.10 分析条件的选择 |
2.3.11 工作曲线 |
2.3.12 干扰离子的影响 |
2.3.13 样品测定 |
2.4 结论 |
3 适配体介导掺氮碳量子点纳米催化纳米金SERS/RRS检测铅离子 |
3.1 前言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 仪器 |
3.2.2 试剂 |
3.2.3 碳量子点(CDs)的制备 |
3.2.4 实验方法 |
3.3 结果讨论 |
3.3.1 分析原理 |
3.3.2 催化及分析体系的表面增强拉曼(SERS)光谱 |
3.3.3 分析体系的共振瑞利散射(RRS)光谱 |
3.3.4 透射电镜及能谱(TEM,EDS) |
3.3.5 粒度分析 |
3.3.6 掺氮碳点的催化特性 |
3.3.7 分析条件的选择 |
3.3.8 工作曲线 |
3.3.9 干扰离子的影响 |
3.3.10 样品测定 |
3.4 结论 |
4 掺银碳化氮催化纳米金放大用于适配体散射光谱双模检测超痕量钾离子 |
4.1 前言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 仪器 |
4.2.2 试剂 |
4.2.3 碳化氮量子点的制备 |
4.2.4 实验方法 |
4.3 结果讨论 |
4.3.1 分析原理 |
4.3.2 催化及分析体系的表面增强拉曼散射光谱(SERS) |
4.3.3 催化分析体系的共振瑞利散射光谱(RRS) |
4.3.4 透射电镜及EDS |
4.3.5 XRD |
4.3.6 掺银碳化氮的分子光谱表征 |
4.3.7 掺银碳化氮的催化增强作用 |
4.3.8 催化分析体系的粒度分布 |
4.3.9 分析条件的影响 |
4.3.10 工作曲线 |
4.3.11 干扰离子的影响 |
4.3.12 样品测定 |
4.4 结论 |
5 全文总结及展望 |
参考文献 |
攻读博士学位期间科研成果 |
致谢 |
(2)增强发射荧光铜纳米簇基材料的制备及其在传感方面的应用(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第1章 绪论 |
1.1 荧光纳米簇的概述 |
1.2 CuNCs的制备方法 |
1.2.1 自下而上合成法 |
1.2.2 自上而下合成法 |
1.3 CuNCs的光学性质 |
1.3.1 CuNCs的电致发光性质 |
1.3.2 CuNCs的光吸收性质 |
1.3.3 CuNCs的荧光性质 |
1.4 环境因素对CuNCs荧光性质调控 |
1.4.1 pH |
1.4.2 溶剂 |
1.4.3 温度 |
1.4.4 离子 |
1.5 CuNCs基荧光复合材料的合成 |
1.5.1 静电吸附法 |
1.5.2 共价合成法 |
1.5.3 金属掺杂法 |
1.5.4 限域合成法 |
1.6 CuNCs相关的荧光应用 |
1.6.1 荧光传感 |
1.6.1.1 金属阳离子 |
1.6.1.2 无机阴离子 |
1.6.1.3 小分子 |
1.6.1.4 生物大分子 |
1.6.2 生物成像 |
1.6.3 发光二极管 |
1.7 本论文的设计思路和主要研究内容 |
参考文献 |
第2章 紫外光诱导法合成增强发射CuNCs用于荧光传感研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 材料和设备 |
2.2.2 紫外光诱导法合成PEI-CuNCs |
2.2.3 搅拌法合成PEI-CuNCs |
2.2.4 考察Cu2+对PEI-CuNCs荧光的影响 |
2.2.5 检测生物硫醇 |
2.2.6 检测乙酰胆碱酯酶及其抑制剂 |
2.2.7 检测实际样品 |
2.3 结果讨论 |
2.3.1 PEI-CuNCs的合成和表征 |
2.3.2 Cu2+对PEI-CuNCs荧光的猝灭作用 |
2.3.3 荧光turn-off-on法检测生物硫醇 |
2.3.4 荧光turn-off-on法检测ACh E |
2.3.5 人血清样品中生物硫醇和ACh E的测定 |
2.4 小结 |
参考文献 |
第3章 金属掺杂法合成增强发射银铜双金属纳米簇构建多目标传感平台 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 材料和设备 |
3.2.2 PEI-Ag/CuNCs的制备 |
3.2.3 GO对PEI-Ag/CuNCs荧光的影响 |
3.2.4 肝素检测 |
3.2.5 鱼精蛋白检测 |
3.2.6 胰蛋白酶检测 |
3.2.7 实际样品检测 |
3.3 结果讨论 |
3.3.1 PEI-Ag/CuNCs的合成和表征 |
3.3.2 PEI-Ag/CuNCs的p H和温度依赖性质 |
3.3.3 静电控制法检测肝素、鱼精蛋白和胰蛋白酶 |
3.3.4 人血清样品中肝素、鱼精蛋白和胰蛋白酶的测定 |
3.3.5 传感机理讨论 |
3.4 小结 |
参考文献 |
第4章 基于CuNCs表面限域增强发射效应构建荧光传感平台 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 材料和设备 |
4.2.2 GSH-CuNCs的制备 |
4.2.3 LDH的制备 |
4.2.4 GSH-CuNCs/LDH的制备 |
4.2.5 基于表面限域效应检测HAase |
4.2.6 尿液中检测HAase |
4.3 结果讨论 |
4.3.1 GSH-CuNCs、LDH和GSH-CuNCs/LDH的表征 |
4.3.2 GSH-CuNCs/LDH的荧光性质 |
4.3.3 基于表面限域效应的HAase检测 |
4.3.4 人尿液中HAase检测 |
4.4 小结 |
参考文献 |
第5章 基于表面限域效应合成增强发射CuNCs基材料并开发其荧光传感应用 |
5.1 引言 |
5.2 实验部分 |
5.2.1 材料和设备 |
5.2.2 GSH-CuNCs的制备 |
5.2.3 Zn-HDS和GSH-CuNCs/Zn-HDS的制备 |
5.2.4 基于GSH-CuNCs/Zn-HDS检测GLU |
5.2.5 血清中GLU检测 |
5.2.6 基于GSH-CuNCs/Zn-HDS的LED制备 |
5.3 结果讨论 |
5.3.1 GSH-CuNCs、Zn-HDS和GSH-CuNCs/Zn-HDS表征 |
5.3.2 GSH-CuNCs/Zn-HDS的荧光性质 |
5.3.3 GSH-CuNCs/Zn-HDS检测GLU的性能 |
5.3.4 GSH-CuNCs/Zn-HDS在血清中检测GLU的性能 |
5.3.5 基于GSH-CuNCs/Zn-HDS的LED性能 |
5.4 小结 |
参考文献 |
第6章 基于CuNCs的溶剂诱导增强发射构建比率荧光传感平台 |
6.1 引言 |
6.2 实验部分 |
6.2.1 材料和设备 |
6.2.2 合成GSH-CuNCs,CDs,和CDs-CuNCs |
6.2.3 基于CDs-CuNCs在有机溶剂中检测水含量 |
6.2.4 在实际样品中的应用 |
6.3 结果讨论 |
6.3.1 GSH-CuNCs,CDs和CDs-CuNCs的表征。 |
6.3.2 GSH-CuNCs的溶剂依赖效应 |
6.3.3 基于CDs-CuNCs检测有机溶剂中痕量水 |
6.3.4 基于智能手机的痕量水检测 |
6.3.5 实际样品中的痕量水检测 |
6.4 小结 |
参考文献 |
作者简介及在读期间科研成果 |
作者简介 |
发表论文情况 |
致谢 |
(3)香豆素敏化的环金属铱配合物在光电生化分析中的应用研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
第一章 绪论 |
1.1 光电化学分析技术 |
1.2 光电化学分析技术基本原理 |
1.2.1 光电化学分析主要组件 |
1.2.2 阳极光电流产生的机理 |
1.2.3 阴极光电流产生的机理 |
1.3 光电活性材料 |
1.3.1 无机半导体材料 |
1.3.2 有机半导体材料 |
1.3.3 复合半导体材料 |
1.4 光电化学生物检测应用 |
1.4.1 光电化学酶促生物分析 |
1.4.2 光电化学DNA检测分析 |
1.4.3 光电化学免疫检测分析 |
1.4.4 光电化学细胞检测分析 |
1.5 本课题立题依据 |
第二章 基于香豆素敏化的环金属化Ir(Ⅲ)配合物用于凝血酶检测的光电化学传感器 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 实验仪器设备 |
2.2.2 实验试剂 |
2.2.3 DNA试剂预处理 |
2.2.4 配合物[(CHO-bpy)_2Ir(C-phen)]~+PF_6~-的合成 |
2.2.5 [(CHO-bpy)_2Ir(C-phen)]~+PF_6~-的光电性质检测 |
2.2.6 金纳米粒子的合成 |
2.2.7 基于金纳米粒子的PEC探针的制备 |
2.2.8 凝血酶识别过程 |
2.2.9 PEC生物传感器构建 |
2.2.10 聚丙烯凝胶电泳 |
2.2.11 实际样品分析 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 配合物的紫外吸收光谱 |
2.3.2 配合物的电化学性质探究 |
2.3.3 配合物的光电性质探究 |
2.3.4 金纳米探针相关表征 |
2.3.5 PEC生物传感器组装原理 |
2.3.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳验证 |
2.3.7 PEC平台的实验条件优化 |
2.3.8 PEC传感器检测凝血酶(TB) |
2.3.9 PEC分析平台的特异性 |
2.3.10 实际样品检测分析 |
2.4 本章小结 |
第三章 基于香豆素敏化的嵌插型环金属Ir(Ⅲ)配合物用于DNA甲基转移酶检测的光电阴极传感器 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 实验仪器设备 |
3.2.2 实验试剂 |
3.2.3 DNA前处理过程 |
3.2.4 NiO纳米薄膜修饰ITO电极的制备 |
3.2.5 光电活性材料[Ir(C6)_2(dppz)]~+PF6~-的合成 |
3.2.6 [Ir(C6)_2(dppz)]~+PF6~-的光电性质检测 |
3.2.7 ITO/NiO/[Ir(C6)_2(dppz)]~+PF_6~-电极的可行性检测 |
3.2.8 PEC生物传感器制备原理 |
3.2.9 聚苯烯酰胺凝胶电泳评估甲基化 |
3.2.10 Dam MTase的抑制评估 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 NiO形貌结构表征 |
3.3.2 AuNPs的表征 |
3.3.3 [Ir(C6)_2(dppz)]~+PF_6~-性能的相关探究 |
3.3.4 [Ir(C6)_2(dppz)]~+PF_6~-敏化NiO/ITO电极的光电性能探究 |
3.3.5 电子转移机理研究 |
3.3.6 PEC生物传感器构建原理 |
3.3.7 PEC生物传感器可行性探究 |
3.3.8 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 |
3.3.9 PEC平台的实验条件优化 |
3.3.10 PEC传感器检测Dam MTase |
3.3.11 PEC传感器选择性和稳定性研究 |
3.3.12 Dam MTase抑制剂筛选 |
3.4 本章小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
(4)基于声弹性效应的GIS盆式绝缘子应力超声检测理论和方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 研究背景和意义 |
1.2 国内外研究现状 |
1.2.1 盆式绝缘子应力研究现状 |
1.2.2 内部应力检测研究现状 |
1.3 主要研究路线 |
1.4 主要研究内容 |
第二章 GIS环氧次表面应力超声临界折射纵波检测技术 |
2.1 超声临界折射纵波应力检测方法 |
2.1.1 超声临界折射纵波传播模型 |
2.1.2 超声临界折射纵波应力检测原理 |
2.2 超声临界折射纵波应力检测系统 |
2.2.1 试样 |
2.2.2 试验系统及试验检测 |
2.2.3 仿真建模 |
2.3 单轴压应力下超声临界折射纵波声弹性系数测量 |
2.3.1 长方体试样压应力下应力均匀性验证 |
2.3.2 检测波形 |
2.3.3 传播时间-应力关系及声弹性系数 |
2.4 单轴压应力下超声临界折射纵波应力检测 |
2.5 本章小结 |
第三章 GIS环氧内部应力超声纵波穿透法检测技术 |
3.1 纵波穿透法垂直压应力检测方法 |
3.1.1 纵波穿透法传播模型 |
3.1.2 垂直压应力纵波检测原理 |
3.2 纵波穿透法应力检测系统 |
3.2.1 试样 |
3.2.2 试验系统及试验检测 |
3.3 单轴压应力下超声纵波声弹性系数测量 |
3.3.1 检测波形 |
3.3.2 系统延时 |
3.3.3 应变 |
3.3.4 声速-应力关系 |
3.3.5 延时和应变对声速-应力关系的影响 |
3.3.6 声弹性系数 |
3.4 单轴压应力下超声纵波应力检测 |
3.4.1 结果与分析 |
3.4.2 延时和应变对应力检测的影响 |
3.5 本章小结 |
第四章 盆式绝缘子三正交应力分量超声检测方法研究 |
4.1 盆式绝缘子柱坐标下应力三正交方向分解 |
4.2 三正交应力分量下纵波、横波声弹性方程 |
4.2.1 纵波声弹性方程 |
4.2.2 横波声弹性方程 |
4.3 盆式绝缘子三正交应力分量超声检测方法 |
4.3.1 检测原理 |
4.3.2 三正交应力分量求解 |
4.4 水压试验下盆式绝缘子超声应力检测 |
4.4.1 盆式绝缘子应力检测类型选择 |
4.4.2 三相共箱盆式绝缘子超声传播时间测量方法 |
4.5 本章小节 |
第五章 三正交应力分量超声检测法中单轴应力声弹性系数测量 |
5.1 超声探头参数选择 |
5.2垂直应力声弹性系数K~(1)_(113)、K~(2)_(113)、K_(133)、K_(132) |
5.2.1 检测原理 |
5.2.2 声弹性系数测量系统及试验检测 |
5.2.3 结果 |
5.3平行压应力声弹性系数K~(1)_(111)、K~(2)_(111)、K_(131) |
5.3.1 检测原理 |
5.3.2 声弹性系数测量系统及试验检测 |
5.3.3 结果 |
5.4 本章小结 |
第六章 盆式绝缘子水压试验下三正交应力分量超声检测技术 |
6.1 盆式绝缘子水压试验下应力超声检测系统 |
6.1.1 待测盆式绝缘子 |
6.1.2 检测区域 |
6.1.3 试验系统 |
6.1.4 试验检测 |
6.2 盆式绝缘子水压试验下应力仿真研究 |
6.2.1 模型建立与导入 |
6.2.2 网格划分与仿真载荷 |
6.3 检测与仿真对比研究 |
6.3.1 零受力下声程 |
6.3.2 超声检测波形 |
6.3.3 耦合剂层超声传播时间 |
6.3.4 超声传播时间 |
6.3.5 应力仿真结果 |
6.3.6 应力检测结果 |
6.5 本章小结 |
第七章 结论与展望 |
7.1 结论 |
7.2 展望 |
参考文献 |
附录1 :主要试验数据 |
附录2 :水压试验下126kVGIS三相共箱盆式绝缘子三正交应力分量超声检测结果 |
攻读博士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
附件 |
(5)农产品典型真菌毒素生物识别材料与快速检测方法研究(论文提纲范文)
附件 |
摘要 |
abstract |
主要符号对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 食品中真菌毒素研究现状 |
1.1.1 毒性 |
1.1.2 限量 |
1.1.3 常规检测方法 |
1.2 真菌毒素生物传感分析技术及研究进展 |
1.2.1 识别元件 |
1.2.2 纳米材料与纳米结构用于信号响应及信号放大 |
1.2.3 真菌毒素的生物传感检测方法 |
1.3 本研究的目的和意义 |
1.4 本课题的主要研究内容 |
1.5 本课题的技术路线 |
第二章 基于单抗的光学与气压生物传感方法研究 |
第一节 伏马毒素单克隆抗体研制与灰度成像快速检测技术研究 |
2.1 引言 |
2.2 材料 |
2.2.1 实验仪器及耗材 |
2.2.2 实验试剂 |
2.2.3 融合用细胞、实验动物及器材 |
2.2.4 主要溶液与培养基的配制 |
2.3 方法 |
2.3.1 伏马毒素B_1完全抗原的合成 |
2.3.2 伏马毒素B_1的动物免疫与杂交瘤细胞的制备 |
2.3.3 伏马毒素B_1抗原免疫效果评价 |
2.3.4 伏马毒素B_1阳性杂交瘤筛选方法 |
2.3.5 伏马毒素B_1抗体的生产 |
2.3.6 伏马毒素B_1抗体的特异性鉴定 |
2.3.7 伏马毒素B_1的酶联免疫吸附方法的建立 |
2.3.8 伏马毒素B_1的酶联免疫方法标准曲线的建立 |
2.3.9 纳米金探针的制备 |
2.3.10 伏马毒素B_1灰度成像纳米金试纸条的原理 |
2.3.11 灰度成像纳米金试纸条标准曲线的建立 |
2.3.12 灰度成像纳米金试纸条的检测 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 伏马毒素B_1抗原的免疫学鉴定 |
2.4.2 伏马毒素B_1杂交瘤细胞的筛选结果 |
2.4.3 伏马毒素B_1单克隆抗体7A11的特异性鉴定 |
2.4.4 伏马毒素B_1的ic ELISA条件的优化 |
2.4.5 伏马毒素B_1灰度成像方法的建立 |
2.4.6 伏马毒素B_1灰度成像方法与ic ELISA方法评价 |
第二节 基于单抗的真菌毒素与其他危害物同步检测技术研究 |
2.5 引言 |
2.6 材料 |
2.6.1 实验仪器及耗材 |
2.6.2 主要试剂及溶液 |
2.6.3 融合用细胞、实验动物及器材 |
2.6.4 主要溶液与培养基的配制 |
2.7 方法 |
2.7.1 甲萘威、克百威杂交瘤细胞制备 |
2.7.2 甲萘威、克百威阳性杂交瘤筛选 |
2.7.3 甲萘威、克百威单抗制备与纯化 |
2.7.4 Eu/Tb(Ⅲ)标记探针的制备 |
2.7.5 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法建立 |
2.7.6 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法原理 |
2.7.7 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法评价 |
2.8 结果 |
2.8.1 甲萘威、克百威杂交瘤筛选结果 |
2.8.2 甲萘威、克百威单克隆抗体特性表征 |
2.8.3 Eu/Tb(Ⅲ)纳米探针的表征 |
2.8.4 样品前处理方法 |
2.8.5 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法的优化 |
2.8.6 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法特异性评价 |
2.8.7 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法定量曲线 |
2.8.8 时间分辨荧光免疫纸层析同步传感方法回收率和实际样品检测 |
第三节 二乙酰镳草镰刀菌烯醇单克隆抗体研制与气压法免疫传感方法研究 |
2.9 引言 |
2.10 材料 |
2.10.1 实验仪器及耗材 |
2.10.2 实验试剂 |
2.10.3 融合用细胞、实验动物及器材 |
2.10.4 主要溶液与培养基的配制 |
2.11 方法 |
2.11.1 二乙酰镳草镰刀菌烯醇完全抗原的合成 |
2.11.2 二乙酰镳草镰刀菌烯醇动物免疫与杂交瘤细胞的制备 |
2.11.3 二乙酰镳草镰刀菌烯醇阳性杂交瘤细胞的筛选 |
2.11.4 二乙酰镳草镰刀菌烯醇单抗制备与纯化 |
2.11.5 铂金纳米仿生催化材料与识别探针的合成 |
2.11.6 气压免疫传感器的构建 |
2.11.7 气压免疫传感检测体系的优化 |
2.11.8 小麦样品的前处理 |
2.11.9 免疫气压法实际样品应用 |
2.11.10 高效液相色谱质谱联用法检测二乙酰镳草镰刀菌烯醇 |
2.12 结果 |
2.12.1 二乙酰镳草镰刀菌烯醇免疫效果与杂交瘤细胞研制 |
2.12.2 铂金纳米仿生催化材料与识别探针的鉴定 |
2.12.3 电化学方法对铂金纳米仿生催化材料催化活性的鉴定 |
2.12.4 铂金纳米催化材料探针标记条件的优化 |
2.12.5 免疫气压传感检测原理 |
2.12.6 免疫气压传感检测条件优化 |
2.12.7 免疫气压传感特异性 |
2.12.8 免疫气压传感回收率测定 |
2.12.9 免疫气压传感的应用 |
2.13 讨论 |
2.13.1 伏马毒素B_1与二乙酰镳草镰刀菌烯醇两种毒素半抗原设计与合成 |
2.13.2 真菌毒素单克隆抗体的研制 |
2.13.3 灰度成像纳米金免疫层析技术 |
2.13.4 气压免疫传感器的设计与条件优化 |
2.14 小结 |
第三章 基于纳米抗体无毒替代抗原传感分析方法研究 |
第一节 黄曲霉毒素M_1纳米抗体研制与丝网印刷电化学传感方法研究 |
3.1 引言 |
3.2 材料 |
3.2.1 实验仪器及耗材 |
3.2.2 主要试剂 |
3.2.3 实验溶液 |
3.2.4 引物 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 免疫羊驼与血清效价测定 |
3.3.2 总RNA的提取 |
3.3.3 cDNA第一链合成 |
3.3.4 重链可变区基因片段扩增 |
3.3.5 纳米抗体基因与pComb3X质粒的酶切与连接 |
3.3.6 重组的噬菌粒电转 |
3.3.7 纳米抗体文库的库容量与多样性鉴定 |
3.3.8 噬菌体展示文库的构建与滴度测定 |
3.3.9 噬菌体展示纳米抗体文库的构建 |
3.3.10 阳性纳米抗体竞争筛选和富集 |
3.3.11 阳性纳米抗体的鉴定 |
3.3.12 纳米抗体的表达与纯化 |
3.3.13 纳米抗体的特性鉴定 |
3.3.14 黄曲霉毒素M_1免疫传感器的构建 |
3.3.15 工作电极修饰的表征方法 |
3.3.16 无毒替代抗原免疫传感方法条件优化 |
3.3.17 免疫传感标准曲线与加标回收 |
3.4 结果 |
3.4.1 羊驼血总RNA的提取与重链基因扩增 |
3.4.2 纳米抗体片段和载体pComb3X酶切鉴定 |
3.4.3 噬菌体纳米抗体文库的多样性鉴定 |
3.4.4 阳性噬菌体的筛选 |
3.4.5 阳性噬菌体的鉴定 |
3.4.6 纳米抗体VHH4-1-1和VHH2-3-1 的表达 |
3.4.7 纳米抗体VHH4-1-1和VHH2-3-1 特异性测定 |
3.4.8 丝网印刷碳电极检测原理 |
3.4.9 工作电极的修饰与电极表征 |
3.4.10 免疫电极的制备及工作条件优化 |
3.4.11 电化学传感器特异性、稳定性与准确度评价 |
第二节 基于无毒抗原AFB_1与ZEN时间分辨荧光混合污染检测技术 |
3.5 引言 |
3.6 材料 |
3.6.1 实验仪器及耗材 |
3.6.2 主要试剂 |
3.7 实验步骤 |
3.7.1 纳米抗体phages2-5和phages8#的纯化 |
3.7.2 Eu/Tb(Ⅲ)纳米颗粒探针的合成与鉴定 |
3.7.3 两种竞争模式的建立与优化 |
3.7.4 基于无毒替代抗原混合毒素时间分辨同步检测方法优化 |
3.8 结果与讨论 |
3.8.1 Eu/Tb(Ⅲ)纳米颗粒与探针的鉴定 |
3.8.2 Eu/Tb(Ⅲ)纳米探针偶联条件优化 |
3.8.3 两种竞争模式的结果比对 |
3.8.4 时间分辨荧光多毒素同步检测技术原理 |
3.8.5 基于无毒替代抗原时间分辨荧光检测技术准确度、重复性评价 |
3.8.6 玉米实际样品的检测 |
3.9 讨论 |
3.9.1 抗独特型纳米抗体替代抗原用于电化学免疫传感器 |
3.9.2 抗独特型纳米抗体替代抗原用于时间分辨荧光免疫层析技术 |
3.10 小结 |
第四章 基于适配体展青霉素侧向层析分析方法研究 |
4.1 前言 |
4.2 材料 |
4.2.1 实验仪器及耗材 |
4.2.2 实验试剂 |
4.2.3 主要溶液 |
4.3 方法 |
4.3.1 适配体序列及前处理方法 |
4.3.2 适配体试纸条的制备 |
4.3.3 适配体试纸条原理 |
4.3.4 适配体试纸条的检测步骤 |
4.3.5 适配体的选择 |
4.3.6 适配体检测模式的选择 |
4.3.7 适配体浓度的优化 |
4.3.8 适配体试纸条条件优化 |
4.3.9 适配体检测缓冲液条件优化 |
4.3.10 适配体试纸条方法的鉴定 |
4.3.11 适配体试纸条检测样品前处理 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 适配体与竞争模式的选择 |
4.4.2 生物素-适配体与地高辛-互补链的浓度优化 |
4.4.3 适配体试纸条条件优化 |
4.4.4 适配体检测缓冲液配方优化 |
4.4.5 适配体试纸条的性能参数评价 |
4.5 本章小结 |
第五章 三类生物识别材料用于农产品快速检测的性能比较 |
5.1 系列生物识别材料的研制 |
5.1.1 两种展青霉素适配体的比对结果 |
5.1.2 四类单克隆抗体的筛选结果 |
5.1.3 四种单抗与国内外报道同类抗体特性进行比较 |
5.1.4 抗独特型纳米抗体的筛选结果 |
5.1.5 适配体、单抗、纳抗的研制比较 |
5.2 系列生物传感器的开发 |
5.2.1 建立的生物传感器涉及到的农产品类别 |
5.2.2 建立的生物传感器固定化技术的选择 |
5.2.3 建立的生物传感器识别元件的选择 |
5.2.4 检测方法的选择 |
5.3 农产品中生物传感器发展趋势展望 |
第六章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(6)鸡肉、禽蛋中三种四环素类和两种氟喹诺酮类药物残留同时检测的UPLC-FLD的研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
符号说明 |
第1章 文献综述 |
1.1 土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星的理化性质 |
1.1.1 土霉素、四环素和多西环素的理化性质 |
1.1.2 环丙沙星和恩诺沙星的理化性质 |
1.2 土霉素、四环素、多西环素、环丙沙星和恩诺沙星的作用机理、毒副作用及应用 |
1.2.1 土霉素、四环素和多西环素的作用机理 |
1.2.2 土霉素、四环素和多西环素的毒副作用 |
1.2.3 土霉素、四环素和多西环素的应用 |
1.2.4 环丙沙星和恩诺沙星的作用机理 |
1.2.5 环丙沙星和恩诺沙星的毒副作用 |
1.2.6 环丙沙星和恩诺沙星的应用 |
1.3 样品前处理技术 |
1.3.1 液-液萃取技术 |
1.3.2 固相萃取技术 |
1.3.3 QuEChERS方法 |
1.3.4 加速溶剂萃取技术 |
1.4 残留检测方法 |
1.4.1 免疫分析法 |
1.4.1.1 酶联免疫吸附测定法 |
1.4.1.2 免疫胶体金技术 |
1.4.1.3 化学发光免疫分析法 |
1.4.2 仪器检测法 |
1.4.2.1 毛细管电泳法和毛细管电泳-质谱联用法 |
1.4.2.2 薄层色谱法 |
1.4.2.3 气相色谱法和气相色谱-质谱联用法 |
1.4.2.4 超临界流体色谱法 |
1.4.2.5 液相色谱法 |
1.4.2.6 液相色谱-质谱联用法 |
1.5 研究目的和意义 |
1.5.1 研究目的 |
1.5.2 研究意义 |
第2章 鸡肉中三种四环素类和两种氟喹诺酮类药物残留同时检测的UPLC-FLD的研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 试剂与材料 |
2.1.2 主要仪器 |
2.1.3 主要溶液的配制 |
2.1.3.1 标准储备液 |
2.1.3.2 标准工作液 |
2.1.3.3 提取溶剂 |
2.1.3.4 流动相 |
2.1.4 实验动物与样品采集 |
2.1.5 样品前处理 |
2.1.5.1 样品提取 |
2.1.5.2 样品净化与浓缩 |
2.1.5.3 样品复溶 |
2.1.6 超高效液相色谱条件 |
2.1.7 检测方法的考察 |
2.1.7.1 基质标准曲线的绘制 |
2.1.7.2 样品回收率的测定 |
2.1.7.3 样品精密度的测定 |
2.1.7.4 检测限与定量限的测定 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 激发波长和发射波长的确定 |
2.2.2 色谱图 |
2.2.3 标准曲线、线性范围和决定系数 |
2.2.4 空白添加回收率和精密度 |
2.2.5 检测限和定量限 |
2.3 讨论 |
2.3.1 标准品稳定性 |
2.3.2 样品前处理方法的比较和选择 |
2.3.3 液相色谱条件的优化 |
2.3.3.1 检测波长的确定 |
2.3.3.2 流动相的选择 |
2.3.3.3 色谱柱的选择 |
2.3.3.4 其他色谱条件的确定 |
2.3.4 与其他方法的比较 |
2.4 小结 |
第3章 禽蛋中三种四环素类和两种氟喹诺酮类药物残留同时检测的UPLC-FLD的研究 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 试剂与材料 |
3.1.2 主要仪器 |
3.1.3 主要溶液的配制 |
3.1.3.1 标准储备液 |
3.1.3.2 标准工作液 |
3.1.3.3 提取溶剂 |
3.1.3.4 流动相 |
3.1.4 试验动物饲养与样品采集 |
3.1.5 样品前处理 |
3.1.5.1 样品提取 |
3.1.5.2 样品净化与浓缩 |
3.1.5.3 样品复溶 |
3.1.6 超高效液相色谱条件 |
3.1.7 检测方法的考察 |
3.1.7.1 基质标准曲线的绘制 |
3.1.7.2 样品回收率的测定 |
3.1.7.3 样品精密度的测定 |
3.1.7.4 检测限与定量限的测定 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 色谱图 |
3.2.2 标准曲线、线性范围和决定系数 |
3.2.3 空白添加回收率和精密度 |
3.2.4 检测限和定量限 |
3.3 讨论 |
3.3.1 样品前处理方法的比较和选择 |
3.3.2 超高效液相色谱条件的优化 |
3.3.3 与其他方法的比较 |
3.4 小结 |
全文结论 |
参考文献 |
攻读学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
(7)纳米团簇点阵复杂导电网络的电阻输运特性及柔性传感器件应用(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 团簇及纳米粒子 |
1.2 单电子学 |
1.3 团簇点阵及其复杂导电网络 |
1.4 基于团簇/纳米粒子点阵的传感技术 |
1.4.1 气氛传感器 |
1.4.2 生物传感器 |
1.4.3 力学传感器 |
1.4.4 温度传感器 |
1.5 基于团簇或纳米粒子及其点阵的柔性传感器 |
1.6 本文结构与内容 |
参考文献 |
第二章 纳米团簇点阵导电网络的电子输运特性 |
2.1 引言 |
2.2 密集纳米团簇点阵导电网络的电子输运模型 |
2.3 纳米团簇点阵导电网络结构的制备 |
2.3.1 叉指微电极的准备 |
2.3.2 磁控等离子体气体聚集法制备纳米团簇 |
2.3.3 纳米团簇点阵导电网络结构可控沉积 |
2.3.4 纳米团簇点阵导电网络结构的形态学表征 |
2.4 纳米团簇密集点阵导电网络的输运特性 |
2.4.1 输运性质的测量系统 |
2.4.2 纳米团簇密集网络的电子输运特性 |
2.5 纳米团簇密集网络梯度结构的非对称输运 |
2.5.1 纳米团簇梯度点阵导电网络结构的制备与表征 |
2.5.2 纳米团簇梯度点阵导电网络结构的非对称输运特性 |
2.6 本章小结 |
参考文献 |
第三章 基于密排团簇点阵导电网络的多功能电子皮肤 |
3.1 引言 |
3.2 通过多层纳米团簇点阵实现复合传感功能的原理 |
3.3 基于纳米团簇点阵的柔性传感单元的制备 |
3.4 柔性传感单元的显微形态表征 |
3.5 柔性传感单元的力学响应特性 |
3.5.1 柔性传感单元对应变的响应特性 |
3.5.2 柔性传感单元对压力的响应特性 |
3.6 柔性传感单元对温度的响应特性 |
3.7 多功能电子皮肤——基于团簇点阵导电网络的柔性温敏压力传感器 |
3.8 多功能电子皮肤的应用演示 |
3.9 本章小结 |
参考文献 |
第四章 基于密集纳米团簇点阵的气压传感器 |
4.1 引言 |
4.2 纳米团簇点阵气压传感器的工作原理与结构 |
4.3 纳米团簇点阵气压传感器的响应特性 |
4.3.1 气压传感器响应特性的测量 |
4.3.2 传感器对气压的响应行为 |
4.3.3 传感器性能调控 |
4.4 高度传感应用 |
4.5 本章小结 |
参考文献 |
第五章 总结与展望 |
攻读博士学位期间取得成果 |
致谢 |
(8)右美托咪定调控HIF-1α信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤的分子机制研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
前言 |
参考文献 |
第一部分 右美托咪定后处理减轻原代乳鼠心肌细胞的缺氧复氧损伤 |
研究目的 |
材料与方法 |
实验结果 |
讨论与小结 |
参考文献 |
第二部分 右美托咪定后处理通过在转录后水平抑制HIF-1α信号减轻缺氧复氧过程中心肌细胞凋亡的分子机制 |
研究目的 |
材料与方法 |
实验结果 |
讨论与小结 |
参考文献 |
第三部分 右美托咪定后处理通过调控HIF-1α信号抑制细胞凋亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤 |
研究目的 |
材料与方法 |
实验结果 |
讨论与小结 |
参考文献 |
结论和展望 |
综述 (第一部分)心肌缺血再灌注损伤和右美托咪定心肌保护作用的相关研究进展 |
参考文献 |
综述 (第二部分)A systematic Review: Effects of Perioperative Dexmedetomidine Use on Postoperative Mortality and Major Morbidity in Adult Patients Who undergo Cardiac and Non-cardiac Surgery |
References |
附录 |
个人简历及博士研究生期间发表的学术论文 |
致谢 |
(9)新型化学发光免疫传感器的构建与应用(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
第一章 前言 |
1.1 免疫传感器简介 |
1.2 免疫传感器的基本原理 |
1.2.1 生物识别机制 |
1.2.2 免疫分析策略 |
1.3 免疫传感器的分类及特点 |
1.3.1 电化学免疫传感器 |
1.3.2 光学免疫传感器 |
1.3.3 压电免疫传感器 |
1.3.4 热学免疫传感器 |
1.4 化学发光免疫传感器的应用 |
1.4.1 炎症标志物 |
1.4.2 心脏病标志物 |
1.4.3 癌症标志物 |
1.4.4 小分子检测 |
1.5 新型化学发光免疫传感器 |
1.5.1 基于毛细管的化学发光免疫传感器 |
1.5.2 基于光纤的化学发光免疫传感器 |
1.6 本论文的工作设想 |
第二章 新型化学发光信号放大-毛细管免疫传感器的研究与应用 |
2.1 前言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 试剂和仪器 |
2.2.2 免疫传感器的构建 |
2.2.3 特异性和回收率考察 |
2.2.4 实际样品检测 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 免疫传感器的表征 |
2.3.2 参数优化 |
2.3.3 免疫传感器的分析性能 |
2.3.4 实际应用 |
2.3.5 讨论 |
2.4 小结 |
第三章 线性范围可调的光纤免疫传感器用于兽药残留的多目标分析 |
3.1 前言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 试剂和仪器 |
3.2.2 B-Ab和 SA-B-HRP纳米复合物的制备 |
3.2.3 光纤探针的制备 |
3.2.4 兽药残留检测流程 |
3.2.5 传统ELISA检测流程 |
3.2.6 实际样品检测 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 免疫传感器的表征和优化 |
3.3.2 兽药残留的多目标检测 |
3.3.3 特异性考察 |
3.3.4 实际应用 |
3.4 小结 |
第四章 便携式铅笔型免疫传感器(PPS)的构建 及应用 |
4.1 前言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 试剂和仪器 |
4.2.2 生物素化检测抗体和SA-B-HRP纳米复合物的制备 |
4.2.3 PPS平台的构建 |
4.2.4 PPS平台的免疫分析流程 |
4.2.5 实际样品检测 |
4.3 结果和讨论 |
4.3.1 PPS平台的表征 |
4.3.2 PPS平台的分析性能 |
4.3.3 实际应用 |
4.4 小结 |
第五章 全方位化学发光采集-光纤免疫传感器的构建及应用 |
5.1 前言 |
5.2 实验部分 |
5.2.1 试剂和仪器 |
5.2.2 全方位化学发光采集策略以及免疫传感器的构建 |
5.2.3 实际样品检测 |
5.3 结果和讨论 |
5.3.1 全方位化学发光采集的优势 |
5.3.2 免疫传感器的性能评价 |
5.3.3 实际应用 |
5.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
在读期间公开发表论文情况 |
(10)基波模式微型正交磁通门传感器及其生物检测应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.1.1 磁场测量 |
1.1.2 磁传感器 |
1.2 磁通门传感器 |
1.3 正交磁通门传感器研究现状 |
1.3.1 基波模式正交磁通门传感器研究 |
1.3.2 无线圈正交磁通门传感器研究 |
1.3.3 磁芯材料与退火研究 |
1.3.4 磁芯结构研究 |
1.3.5 基于MEMS工艺的微型化研究 |
1.3.6 应用研究 |
1.4 基于磁标签的磁生物传感器 |
1.4.1 生物传感器 |
1.4.2 磁标签生物检测方法 |
1.4.3 磁通门传感器生物检测特点及应用 |
1.5 本论文设计思想与研究内容 |
第二章 微型正交磁通门传感器理论模型与仿真计算 |
2.1 磁通门传感器工作原理 |
2.1.1 磁通门磁调制器 |
2.1.2 平行激励磁通门传感器 |
2.1.3 正交激励磁通门传感器 |
2.1.4 正交磁通门传感器两种工作模式 |
2.2 基波模式正交磁通门传感器模型与仿真 |
2.2.1 基于旋转磁化的磁导率调制模型 |
2.2.2 激励条件仿真计算 |
2.3 曲折磁芯结构设计与仿真分析 |
2.3.1 曲折磁芯结构设计 |
2.3.2 曲折磁芯结构退磁模型 |
2.3.3 曲折磁芯结构参数变化仿真分析 |
2.4 本章小结 |
第三章 微型正交磁通门传感器磁芯结构与磁场退火研究 |
3.1 磁芯材料选择及磁特性测试 |
3.1.1 电镀FeNi薄膜材料 |
3.1.2 Co基非晶薄带材料 |
3.2 曲折薄带磁芯结构正交磁通门传感器实验研究 |
3.2.1 曲折薄带磁芯制备工艺 |
3.2.2 正交磁通门传感器测试系统 |
3.2.3 正交磁通门传感器基波和二次谐波模式性能比较 |
3.2.4 曲折磁芯条数对传感器性能的影响 |
3.2.5 曲折磁芯线宽对传感器性能的影响 |
3.2.6 曲折磁芯间距对传感器性能的影响 |
3.3 Co基非晶薄带磁芯磁场退火研究 |
3.3.1 磁场退火实验方法 |
3.3.2 磁场退火温度对非晶薄带材料磁特性影响 |
3.3.3 磁场退火温度对传感器性能影响 |
3.3.4 磁场退火方向对非晶薄带材料磁特性影响 |
3.3.5 磁场退火方向对传感器性能影响 |
3.4 本章小结 |
第四章 MEMS微型正交磁通门传感器制备工艺与性能测试 |
4.1 MEMS微加工工艺 |
4.1.1 溅射工艺 |
4.1.2 光刻工艺 |
4.1.3 电镀工艺 |
4.1.4 刻蚀工艺 |
4.1.5 聚酰亚胺工艺 |
4.1.6 薄带微装配工艺 |
4.2 微型正交磁通门传感器的制备工艺 |
4.2.1 Cu/FeNi磁芯微型正交磁通门传感器制备工艺 |
4.2.2 Co基非晶薄带磁芯微型正交磁通门传感器制备工艺 |
4.3 微型正交磁通门传感器性能测试指标 |
4.3.1 灵敏度和线性范围 |
4.3.2 噪声 |
4.3.3 剩磁误差 |
4.3.4 稳定性 |
4.4 Cu/FeNi磁芯微型正交磁通门传感器性能测试与分析 |
4.4.1 激励频率对灵敏度的影响 |
4.4.2 激励电流对灵敏度的影响 |
4.4.3 不同结构Cu/FeNi磁芯微型正交磁通门传感器性能参数比较 |
4.4.4 Cu/FeNi磁芯微型正交磁通门传感器剩磁误差测试 |
4.4.5 Cu/FeNi磁芯微型正交磁通门传感器稳定性测试 |
4.5 Co基非晶薄带磁芯微型正交磁通门传感器性能测试与分析 |
4.5.1 激励频率对传感器灵敏度和噪声的影响 |
4.5.2 激励电流对传感器灵敏度和噪声的影响 |
4.5.3 Co基非晶薄带磁芯微型正交磁通门传感器剩磁误差测试 |
4.5.4 Co基非晶薄带磁芯微型正交磁通门传感器稳定性测试 |
4.5.5 微型正交磁通门传感器性能比较与分析 |
4.6 本章小结 |
第五章 基于微型正交磁通门传感器的生物检测应用研究 |
5.1 基于微型正交磁通门传感器的超顺磁珠检测 |
5.1.1 研究背景 |
5.1.2 磁珠样品制备 |
5.1.3 基于微型正交磁通门传感器的磁珠检测方法 |
5.1.4 结果与讨论 |
5.2 基于微型正交磁通门传感器的甲胎蛋白AFP抗原检测 |
5.2.1 研究背景 |
5.2.2 实验材料 |
5.2.3 AFP生物样品制备 |
5.2.4 AFP的灵敏性检测与量化分析 |
5.2.5 AFP检测的特异性分析 |
5.2.6 生物检测系统的稳定性测试 |
5.3 基于微型正交磁通门传感器的大肠杆菌O157:H7检测 |
5.3.1 研究背景 |
5.3.2 实验材料 |
5.3.3 大肠杆菌O157:H7检测生物样品制备 |
5.3.4 大肠杆菌O157:H7的灵敏性检测与量化分析 |
5.3.5 大肠杆菌O157:H7检测的特异性分析 |
5.4 本章小结 |
第六章 总结与展望 |
6.1 总结 |
6.2 主要创新点 |
6.3 展望 |
参考文献 |
致谢 |
攻读博士学位期间发表的论文 |
四、0.1μm发光薄膜的表面压力分布测定法(论文参考文献)
- [1]适配体介导碳基纳米探针及其催化放大-金纳米溶胶SERS/RRS检测痕量铅和钾离子[D]. 李重宁. 广西师范大学, 2021(09)
- [2]增强发射荧光铜纳米簇基材料的制备及其在传感方面的应用[D]. 杨巾栏. 吉林大学, 2021(01)
- [3]香豆素敏化的环金属铱配合物在光电生化分析中的应用研究[D]. 蔡月圆. 青岛科技大学, 2021(01)
- [4]基于声弹性效应的GIS盆式绝缘子应力超声检测理论和方法研究[D]. 邹舟诣奥. 华南理工大学, 2020(02)
- [5]农产品典型真菌毒素生物识别材料与快速检测方法研究[D]. 唐晓倩. 中国农业科学院, 2020
- [6]鸡肉、禽蛋中三种四环素类和两种氟喹诺酮类药物残留同时检测的UPLC-FLD的研究[D]. 郭亚文. 扬州大学, 2020
- [7]纳米团簇点阵复杂导电网络的电阻输运特性及柔性传感器件应用[D]. 陈敏瑞. 南京大学, 2020(04)
- [8]右美托咪定调控HIF-1α信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤的分子机制研究[D]. 彭科. 苏州大学, 2020(06)
- [9]新型化学发光免疫传感器的构建与应用[D]. 聂荣彬. 东北师范大学, 2020(01)
- [10]基波模式微型正交磁通门传感器及其生物检测应用研究[D]. 支绍韬. 上海交通大学, 2020(01)