尿凝血酶原片段1及其对草酸钙晶体形成的抑制作用

一、尿凝血酶原片段1及其对草酸钙结晶形成的抑制作用（论文文献综述）

曾磊^[1]（2021）在《299例上尿路结石成分分析及预防结石复发的研究》文中研究指明目的:分析中国医科大学附属第一医院泌尿外科1.5年内收治的299例上尿路结石患者的结石成分,了解沈阳市及周边地区上尿路结石的成分特点,并观察基于分析结果的建议指导方案预防不同成分结石复发的效果。方法:统计2017年10月至2019年3月于中国医科大学附属第一医院就诊行手术治疗的上尿路结石患者,按照严格的纳入和排除标准执行后得到299例上尿路结石患者的临床资料,重点收集患者的结石成分分析结果。基于结石成分分析结果,给予患者相应的预防建议方案,并嘱患者定期复查。电话随访是否严格执行方案,严格执行方案者为实验组,术后未严格执行方案者为对照组。结果:结石成分分析显示沈阳市及周边地区上尿路结石多数为混合型结石,占总数的71.2%。一水草酸钙（86.3%）、二水草酸钙（66.6%）、碳酸磷灰石（51.8%）为沈阳地区上尿路结石中最常见的三种成分。分析每种结石成分与性别之间的关系,结果表明碳酸磷灰石更常在女性患者体内出现（p=0.000<0.05）,而其他成分的检出率差异无统计学意义。将各类结石进行整合分为六大类,将患者按年龄分为四组。分别对各年龄段中六类成分行统计学分析,发现每个年龄段中六类成分的检出率不完全相同（p=0.009<0.05;p=0.000<0.05;p=0.000<0.05;p=0.000<0.05）。分别对六类成分进行年龄组的组间比较,除胱氨酸结石外（p=0.020<0.05）,其他类别结石检出率在不同年龄段中的差异无统计学意义（p=0.321>0.05;p=0.676>0.05;p=0.299>0.05;p=0.059>0.05;p=0.583>0.05）。实验组213例,对照组86例。实验组结石复发率（6.57%）低于对照组结石复发率（13.95%）,对比有统计学意义（p=0.040<0.05）。草酸钙类结石（p=0.018<0.05）、磷酸钙类结石（p=0.025<0.05）在实验组中复发率低于对照组。结论:草酸钙结石和碳酸磷灰石是沈阳及周边地区主要的上尿路结石成分,并且常以混合型结石的形式出现,碳酸磷灰石更常在女性上尿路结石患者体内检出。基于结石成分分析结果的预防建议能明显降低上尿路结石复发率,特别是对于草酸钙结石和磷酸钙类结石,值得在临床应用中进一步推广。

刘萧^[2]（2020）在《羟基枸橼酸抑制小鼠肾脏草酸钙结晶沉积的作用及机理初探》文中研究指明目的:初步研究羟基枸橼酸（hydroxycitric acid,HCA）能否抑制小鼠高草酸尿模型中草酸钙结晶的形成及可能机制。材料和方法:雄性C57BL/6J小鼠被分为对照组,乙醛酸（glyoxylate,GOX）组,低剂量HCA（GOX+HCA 100mg/kg）组和高剂量HCA（GOX+HCA 200mg/kg）组,每组10只。在第7天收集血液样品和肾脏标本。使用HE染色和Pizzolato染色在光学显微镜下判断各组肾脏标本草酸钙结晶生成状况;检测肾脏标本中丙二醛（MDA）,超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平评估氧化应激状况;利用定量逆转录-聚合酶链反应（q RT-PCR）方法检测单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）,核因子-κB（NF-κB）,白细胞介素-1β（IL-1β）,白细胞介素-6（IL-6）信使RMA（m RNA）的表达水平;通过免疫组织化学染色和q RT-PCR检测骨桥蛋白（OPN）和CD44的表达。此外,采用高碘酸希夫（PAS）染色和TUNEL法评估肾小管损伤和细胞凋亡情况。结果:HCA治疗可降低肾功能损害的标志物（血尿素氮和血清肌酐）。HCA处理组的小鼠肾脏中,草酸钙晶体沉积数量明显减少。草酸钙晶体沉积会诱导活性氧类物质的大量产生,降低了抗氧化防御酶的活性。HCA可减轻草酸钙结晶引起的氧化应激反应。HCA对草酸钙结晶诱导表达的炎性细胞因子具有抑制作用。此外,HCA还能减轻草酸钙晶体引起的肾小管损伤和细胞凋亡状况。结论:HCA可通过抗氧化和抗炎作用抑制小鼠高草酸尿模型中肾脏损伤和草酸钙结晶沉积。

江弘炀^[3]（2019）在《大鼠肾脏内草酸转运体Slc26a6的表达对实验性草酸钙结石形成的作用研究》文中提出第一部分大鼠肾脏内不同的Slc26a6表达引起形成草酸钙结晶的差异研究目的:溶质相关载体26基因家族6号蛋白（Solute-linked carrier 26 gene family 6,Slc26a6）主要在肠道和肾脏中表达,它是一种在草酸阴离子转运中至关重要的多功能阴离子转运蛋白。本部分研究旨在探讨肾脏内不同Slc26a6蛋白的表达对肾脏在高草酸环境下产生结晶数量的影响。方法:在临床上收集由于高草酸尿引起的草酸钙结石患者的切除肾脏标本作为结石组,收集肾脏肿瘤或者肾脏结核患者的切除肾脏标本作为对照组。通过Western blot和免疫组织化学的方式对两组肾脏的Slc26a6蛋白表达水平进行比较。分别构建带有Slc26a6基因序列的慢病毒（Lentivirus-Slc26a6）和带有干扰Slc26a6表达功能的siRNA-Slc26a6序列的慢病毒（Lentivirus-siRNA-Slc26a6）将构建完成的病毒通过肾包膜下注射的方式稳定感染至大鼠肾脏内。通过Westernblot和免疫组织化学的方式对大鼠肾脏和肠道Slc26a6表达情况进行鉴定。随后,通过饲喂乙二醇的方式,构建高草酸尿大鼠模型。经过乙二醇饲喂一个月后,检测大鼠的高草酸尿情况和肾脏内结晶形成数量差异。结果:免疫组织化学和Western blot分析表明,与对照组相比,结石形成者在肾脏中具有显着更高的Slc26a6表达水平。慢病毒感染后,慢病毒-Slc26a6感染大鼠的尿草酸浓度和结石形成率显着增加,而慢病毒-siRNA-Slc26a6感染的大鼠晶体较少。结论:结果显示,肾脏内Slc6a6的高表达水平可能是促成肾结石形成的原因之一。下调Slc26a6在肾脏中的表达可能是预防或治疗肾结石的潜在治疗靶点。第二部分Slc26a6蛋白表达对大鼠肾小管上皮细胞功能的影响目的:本部分旨在研究肾小管上皮细胞内Slc26a6表达差异对草酸盐诱导的细胞氧化和晶体形成的影响。方法:分别构建带有Slc26a6基因序列的慢病毒（Lentivirus-Slc26a6）和带有干扰Slc26a6表达功能的siRNA-Slc26a6序列的慢病毒（Lentivirus-siRNA-Slc26a6）通过慢病毒稳定感染肾小管上皮细胞（NRK-52E）以上调或下调细胞中Slc26a6的表达。通过qPCR、Western blot和免疫荧光的方法对细胞内Slc26a6蛋白表达进行测定。通过CCK8方法检测细胞活力,Annexin V/PI流式细胞学检测细胞凋亡情况,DCFH-DA流式细胞学测量活性氧（Reactive oxygen species,ROS）。检测丙二醛（Malonaldehyde,MDA）生成。使用光学显微镜观察晶体粘附情况,并通过透射电子显微镜观察细胞的超微结构。随后利用Lentivirus-siRNA-Slc26a6感染SD大鼠肾脏,通过1.0%乙二醇和0.5%氯化铵饲喂2周后,分别测量不同组内大鼠肾脏的超氧化物产生情况、细胞凋亡情况以及肾脏内结晶产生情况。结果:在体外研究中,与对照组相比,上调Slc26a6表达的NRK-52E细胞在高草酸盐环境下细胞活力降低更显着,细胞凋亡率显着增加,ROS产生增加,MDA产生增加。下调Slc26a6表达的NRK-52E细胞在暴露高草酸盐环境后的晶体粘附和细胞内囊泡明显少于未感染的对照组。体内研究中,感染Lentivirus-siRNA-Slc26a6的大鼠在肾中表现出活性氧生成量、细胞凋亡和晶体形成均减少。同时NFκB磷酸化增强和OPN的磷酸化增加在病理过程中都起到重要作用。结论:本部分的研究结果表明,降低肾脏中Slc26a6的表达可能是预防结石形成的潜在策略。第三部分实验性高草酸尿大鼠肾脏microRNA的表达变化目的:全面了解实验性高草酸尿大鼠形成结石过程中大鼠肾脏miRNA的表达变化。方法:采用高通量micro-RNA生物芯片技术,寻找在高草酸尿结石形成SD大鼠与正常SD大鼠肾脏内miRNA表达谱的差异。通过miRNA数据库,预测miRNA的靶基因,并通过生物信息学GO分析和KEGG Pathways分析查找差异miRNA可能的富集功能和信号通路,并最终根据差异miRNA和预测靶基因构建miRNA-靶基因相互作用网络。结果:进行芯片分析以评估实验造模和对照组的肾组织中miRNA的表达差异,选择组间表达>2倍或<0.5倍的miRNA进行差异筛选。采用实时定量聚合酶链反应（qPCR）分析验证芯片分析结果。为了预测miRNA在病理生理过程中的潜在作用,进行了GO分析、KEGG Pathway分析和靶基因预测。观察到总共28个miRNA在实验造模组和对照组之间显着差异表达（>2倍）。在这些miRNA中,有20个被显着上调,另外8个被显着下调。GO和Pathway分析显示这些miRNA的变化可能与PI3K/AKT等信号通路的激活有关。结论:本部分发现多种miRNA的表达在乙二醇诱导的高草酸尿症大鼠的肾组织中发生改变。生物信息学的方法预测了多个与上述miRNA相关的细胞功能和信号通路。高草酸尿发病的潜在机制可能是miRNA对其靶基因表达调控所致。

闫晓煜^[4]（2018）在《泌尿系统结石患者尿中THP和OPN的检测及其预测价值探讨》文中认为目的通过研究TH蛋白和骨桥蛋白在泌尿系结石临床患者尿液中的表达和变化,进一步探讨尿液TH蛋白、骨桥蛋白的水平变化对预测泌尿系结石的可能性,为早期预防泌尿系结石寻找可靠的生物学指标。方法收集2017年6月至2017年12月临床泌尿系结石患者清晨中段尿标本90例,同时收集65例健康人的清晨中段尿标本,作为对照,运用酶联免疫吸附试验检测其TH蛋白、骨桥蛋白的变化情况;另收集对应的临床泌尿系结石患者24小时尿标本50例,同时收集35例健康人的24小时尿标本,作为对照,分别检测其枸橼酸、草酸、钙、镁及磷等传统生化指标。结果1)结石组患者尿液中TH蛋白浓度为（29.41±2.02）mg/L,骨桥蛋白浓度为（170.59±9.32）μg/mL,对照组的尿液TH蛋白为（26.01±1.25）mg/L,骨桥蛋白浓度为（192.70±11.44）μg/mL,两组差异具有统计学意义（P<0.05）。经Pearson相关性分析,TH蛋白与骨桥蛋白在尿液中的水平呈弱相关性（r=0.254,P<0.05）。2)结石组患者24小时尿枸橼酸水平为（224.26±107.63）mg/24h,对照组人群为（434.58±180.89）mg/24h,二者差异具有统计学意义（P<0.05）,结石组24小时尿草酸含量为（48.41 ± 10.22）mg/24h,显着高于正常组（32.34±5.26）mg/24h,差异具有统计学意义（P<0.05）。尿草酸分别与尿TH蛋白、骨桥蛋白的Pearson相关性分析结果显示,尿草酸与尿TH蛋白的相关系数r=0.306,P<0.01,尿草酸与尿骨桥蛋白的相关系数r=-0.341,P<0.01;尿枸橼酸与TH蛋白、骨桥蛋白的相关性分析结果显示,尿枸橼酸与尿TH蛋白的相关系数r=-0.264,P<0.01,尿枸橼酸与尿骨桥蛋白的相关系数r=0.345,P<0.01。结石组患者24小时尿液中的枸橼酸/钙比值,显着低于正常人,差异具有统计学意义（P<0.05）,尿草酸与尿枸橼酸在尿液中的水平呈负相关（r=-0.572,P<0.05）。3)经Logistic回归分析,建立受试者工作曲线图,尿液中TH蛋白与骨桥蛋白联合检测的曲线下面积为0.907。结论1)泌尿系结石患者尿液中TH蛋白浓度明显高于正常人,骨桥蛋白浓度则明显降低,两者在尿液中的水平呈负相关,与尿路结石病存在关联性。2)泌尿系结石患者24小时尿液中枸橼酸、草酸、钙等指标的水平与正常人相比有明显改变,提示三者可能均与尿路结石形成存在相关性。3)TH蛋白和骨桥蛋白在泌尿系结石患者尿液中的水平的受试者工作曲线显示,两者联合检测能提高诊断的特异度,其在尿石症的诊断中有一定的效能。

陶婷婷,吕伯东,黄晓军,傅骏,马寅锋^[5]（2016）在《金钱草总黄酮提取液抑制大鼠草酸钙结石形成机制的研究》文中研究说明目的探讨金钱草总黄酮提取液抑制大鼠草酸钙结石形成机制的研究。方法常规饲养大鼠1周,采用乙二醇饮水和氯化铵灌胃造模草酸钙结石大鼠模型,将30只SD大鼠随机分为空白对照组（A组）、草酸钙结石模型组（B组）和金钱草总黄酮组（C组）。给药4周后收集各组大鼠24 h尿液,检测尿p H值及24 h尿钙、尿草酸、尿酸、尿葡胺聚糖和尿凝血酶原片段-1的含量。结果金钱草总黄酮组大鼠24 h尿量较草酸钙结石模型组增加,差异有统计学意义（P<0.05）,与空白对照组比较差异无统计学意义（P>0.05）。金钱草总黄酮组大鼠与草酸钙结石模型组大鼠比较,其24 h尿钙和尿草酸含量均降低,而尿凝血酶原片段-1的含量增加,差异均有统计学意义（P<0.05）。而三组间尿p H值、尿酸经比较均无明显差异（P>0.05）。结论金钱草总黄酮提取液可能通过增加大鼠24 h尿量,降低尿液中成石因子-尿钙和尿草酸的含量,增加尿液中抑石因子-尿凝血酶原片段-1含量,从而抑制草酸钙结石的形成。

高筱松^[6]（2016）在《化瘀健脾防石汤对泌尿系结石患者尿中主要结石抑制物影响的研究》文中研究指明泌尿系结石是最常见的泌尿科疾病之一。近年来,随着气候变暖及高血脂、高血糖、高血压等代谢性疾病患者的增加,泌尿系路结石发病率呈明显增长趋势。泌尿系结石是一个高复发疾病,10年复发率达到50%。如此高的复发率不但增加了患者的痛苦及经济负担,多次的ESWL及手术治疗可导致输尿管狭窄、肾萎缩、及肾脏功能损害等并发症。因此,针对其病因的诊断和预防性治疗越来越受到重视。由于泌尿系结石的病因非常复杂,是多种因素共同作用的结果。所以结石的预防是一个系统工程,很多人非常注意基础预防,但结石仍然复发,长期服用枸橼酸盐类药物会造成胃肠道刺激等副作用,无法长期坚持。中草药对泌尿系结石的预防确有疗效,且副作用小,并可以整体调理,改善患者的易成石体质,但仍然需要系统的临床及基础研究进行验证。基于中医“治未病”的思想,继承发展名老中医防治泌尿系结石的经验,我们将刘猷枋教授、张亚强教授破血行气、化瘀软坚的治疗尿石症的思想与高荣林教授调理脾胃、化湿消滞的防治泌尿系结石经验加以总结综合。在化瘀尿石汤的基础上化裁出化瘀健脾防石汤。在临床应用中表现出良好的预防泌尿系结石的疗效。传统观点认为尿液结晶盐过饱和是结石形成的首要因素。然而,目前大量研究表明,人体内的一些成分在抑制尿液中晶体的成核,聚集和生长方面起到了至关重要的作用,称为结石抑制物。在正常人的尿液中结石抑制物具有较高的浓度及活性,所以结石不容易形成。但当尿中结石抑制物浓度下降或结构改变时,对成石的抑制能力就会下降,就容易导致结石的生成。尿中枸橼酸盐、尿镁离子的浓度及THP, OPN和ITIH3的表达在结石的发生、发展过程中起重要作用。而化瘀健脾防石汤也是以活血化瘀,健脾利湿为立法,通过整体调理改善患者的易成石体质。基于此,我们推测化瘀健脾防石汤对尿路结石的防治机理可能与调控结石抑制物的浓度及表达有关。因此,在高荣林老师、张亚强老师的指导下设计了以下临床试验进行验证。研究目的：验证化瘀健脾防石汤对泌尿系结石患者尿中主要小分子结石抑制物枸橼酸盐、镁,大分子结石抑制物THP蛋白、骨桥蛋白（0PN）、间α-胰蛋白酶抑制物重链H3（ITIH3）的影响。探索化瘀健脾防石汤预防泌尿系结石的作用机制。为临床用药及进一步研究提供依据。研究方法：总体设计采用随机单盲安慰剂对照的方法,选择广安门医院2015年1月至2015年8月期间,60例经治疗后结石全部排出的临床痊愈患者,随机分成化瘀健脾防石汤治疗组和安慰剂对照组,每组30人。经过4周的治疗,进入最后的疗效分析。1.纳入病例标准：（1）年龄18-60岁（2）曾诊断为泌尿系结石（上尿路）（3）符合泌尿系结石（上尿路）治愈标准（4）符合气滞血瘀脾虚湿阻证的辩证标准（5）签署知情同意书2.排除病例标准：（1）合并肾或输尿管畸形、输尿管狭窄的患者（2）合并泌尿系统肿瘤的患者（3）合并肾盂肾炎及输尿管炎等上尿路感染的患者（4）合并有严重心脑血管疾病,肝肾及造血系统严重原发病的患者（5）甲状旁腺功能亢进的患者（6）过敏体质者3.治疗方法：（1）治疗组：化瘀健脾防石汤一次1袋一日2次。连续服用4周（2）对照组：化瘀健脾防石汤安慰剂一次1袋一日2次。连续服用4周4.疗程：4周5.观测指标（1）主要疗效指标（入组、服药4周后各检测、记录一次）：①24小时尿尿枸橼酸、尿镁②ELISA检尿液中THP、OPN、ITIH3的蛋白表达③中医证侯评分（2）次要疗效指标（入组、服药4周后各检测一次）①尿PH值②24小时尿尿钙、尿磷、尿草酸、尿尿酸③血钙、血磷、血镁、血尿酸研究结果：1.可比性分析：入选时两组间年龄、病程、男女比例、尿TH蛋白、骨桥蛋白、间a-胰蛋白酶抑制物重链H3、尿PH值、24小时尿钙、尿磷、尿草酸、尿尿酸、尿镁、尿枸橼酸、血钙、血磷、血镁、血尿酸及中医证候评分比较,差异均无统计学意义（P均>0.05）,具有可比性。2.疗效分析结论：2.1主要疗效指标2.1.1对主要结石抑制物疗效24小时尿枸橼酸的排泄总量治疗组组内治疗前后比较差别有统计学意义（P<0.01）,治疗组与对照组疗后比较差别有统计学意义（P<0.01）。24小时尿枸橼酸的排泄总量较疗前明显增加。24小时尿镁的总量治疗组与对照组治疗前后组内比较差别无统计学意义（P>0.05）,治疗后两组组间比较差别无统计学意义（P>0.05）。说明本方对24小时尿镁的排泄量无影响。尿TH蛋白的浓度在治疗组组内治疗前后的比较中,表现出统计学差异（P<0.01）。治疗组与对照组疗后比较的差异也有统计学意义（P<0.05）。TH蛋白的浓度较治疗前有所下降。尿OPN蛋白浓度在治疗组治疗前后的组内比较中,差别无统计学意义（P>0.05）。疗后治疗组与对照组比较差别无统计学意义（P>0.05）。尿间α-胰蛋白酶抑制物重链H3浓度在治疗组组内治疗前后的比较中,表现出统计学差异（P<0.01）。治疗组与对照组疗后比较的差异也有统计学意义（P<0.05）。间α-胰蛋白酶抑制物重链H3浓度较治疗前下降说明化瘀尿石汤确实有预防结石复发的作用。化瘀健脾防石汤可以增加小分子结石抑制物尿枸橼酸的排泄量,可以下调泌尿系结石治愈患者尿TH蛋白和尿间α-胰蛋白酶抑制物重链H3的异常表达。2.1.2中医证候评分疗效化瘀健脾防石汤能够明显降低治疗组患者的中医证候评分,总有效率达到79.3%,与安慰剂对照组28.6%的有效率比较,差别有显着统计学意义（P<0.01）。说明化瘀健脾防石汤可改善气滞血瘀脾虚湿阻证患者的主要临床症状,降低中医证候评分,纠正患者血瘀、脾虚、湿阻的易成石体质。从根本上预防泌尿系结石的复发。2.2次要疗效指标疗后治疗组尿PH值呈上高趋势,与治疗前组内比较,差异有统计学意义意义（P<0.01）；治疗组与对照组疗后比较差异有统计学意义（P<0.01）。疗后治疗组尿钙呈下降趋势。治疗组尿钙组内治疗前后比较,差异有统计学意义（P<0.01）；疗后治疗组与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.01）。对24小时尿草酸、尿尿酸、尿磷、血钙、血磷、血镁、血尿酸的疗效,治疗组治疗前后的组内比较中,差别无统计学意义（P>0.05）。疗后治疗组与对照组比较差别无统计学意义（P>0.05）。说明本药物对以上指标物无影响。研究结论：从整个临床试验看,化瘀健脾防石汤可以增加小分子结石抑制物尿枸橼酸的排泄量,可以下调泌尿系结石治愈患者尿TH蛋白和尿间α-胰蛋白酶抑制物重链H3的异常表达。并有提高患者尿PH值,降低24小时尿钙总排泄量的作用。同时,化瘀健脾防石汤能够改善气滞血瘀、脾虚湿阻证患者的主要临床症状,降低中医证候评分,纠正患者血瘀、脾虚、湿阻的易成石体质。说明化瘀健脾防石汤可以调节泌尿系结石患者尿中主要结石抑制物的浓度及表达。并有一定的代谢调节作用。这些作用都对泌尿系结石复发的预防有重要的积极意义。说明化瘀健脾防石汤有进一步观察研究的价值。下一步针对化瘀健脾防石汤的研究应该从两方面入手,首先,本方虽然组方时间仅有3年,但在临床应用中也表现出了很好的预防结石复发的疗效。但观察的病例数和观察的时间都有欠缺。所以其疗效需要一个大样本、多中心、随机对照、观察时间在3年以上的临床试验的支持。其次,本试验只是初步观察了化瘀健脾防石汤对人尿中主要结石抑制物的影响。无法了解其对肾组织内结石抑制物表达的影响及其调控结石抑制物的主要机理。也不了解其是否对肾小管上皮细胞的损伤有修复作用。因此需要一个设计完善的模型动物试验及体外晶体模型抑制试验的支持。只有这样才能全面评价化瘀健脾防石汤对泌尿系结石复发的预防作用。

田爱民,安瑞华,杨磊,林洋,余彪^[7]（2014）在《草酸钙肾结石成因的研究现状》文中进行了进一步梳理肾结石是一种全球性疾病,同时也是泌尿外科最常见的疾病之一。近年来,肾结石在我国的发病率有逐渐上升趋势,大约5%-15%的人群一生中会罹患肾结石,其中约80%为草酸钙肾结石。多数草酸钙肾结石患者没有发现伴有其他系统疾病的存在,称为特发性草酸钙肾结石;一些患者存在原发性甲状旁腺功能亢进或其他钙代谢异常性疾病;一些患者主要表现为高草酸尿症等。虽然近年来体外冲击波碎石和内腔镜技术的发展使本病的治疗取得了很大的进展,然而,肾结石的复发率仍居高不下,10年复发率可达50%,20年的复发率可达75%。因此,如何有效地预防结石发生和降低复发率,成为当前研究的重点内容。这对于制定恰当的、个性化的预防方案有重要价值。

刘东锋,吴希庆,萨音白钢^[8]（2013）在《泌尿系结石主要抑制物的研究进展》文中认为泌尿系结石是现代人们常见病、多发病,其形成主要受到两方面因素影响:一是尿液内晶体物质饱和度过高;二是尿液中结石抑制物含量减少。正常人尿液晶体成分经常处于过饱和状态,正常人之所以不产生尿结石,是其尿液中存在的抑制物抑制尿石的形成。尿石形成过程复杂,包括结石晶体的成

胡波^[9]（2011）在《草酸钙尿石症患者肾脏组织中维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1的初步研究》文中进行了进一步梳理第一部分草酸钙尿石症患者肾脏组织中维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1）基因的表达研究目的对维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1在草酸钙尿石症患者肾脏组织中的表达进行检测,探讨维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1）与草酸钙尿石形成之间的关联性。方法收集2004年11月至2010年4月武汉同济医院肾脏组织标本155例,分成3组：结石组、对照组A（非结石性肾积水组）和对照组B（正常对照组）,应用免疫组织化学分析法、免疫荧光显微镜检查法、蛋白质印迹法（western blot）和SYBR GreenI荧光实时逆转录聚合酶链反应（realtime RT-PCR）技术对肾脏组织中VKORC1蛋白进行定位和表达差异的研究。结果免疫组织化学分析法和免疫荧光显微镜检查发现在结石组和对照组肾脏组织中都有VKORC1表达,主要存在于肾小管上皮细胞的细胞质内；蛋白质印迹法提示在结石组患者肾脏组织中VKOR1蛋白的表达（0.327±0.055）明显低于其他2个对照组（0.913+0.090、0.983+0.117）,差异具有统计学意义（P<0.05）,对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）; SYBR Green I荧光实时逆转录聚合酶链反应提示结石组患者肾脏组织中的VKORC1 mRNA （倍数：6.063±5.275）表达明显低于2个对照组（倍数：26.324±10.632、27.167±14.248）,差异具有统计学意义（P0.05）,对照组间的差异无统计学意义（P>0.05）。结论VKORC1主要在肾小管上皮细胞胞质内表达,草酸钙尿石症患者肾脏组织中VKORC1的表达降低,可能与草酸钙尿石的形成有关。第二部分维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1）基因剪接异构体在草酸钙尿石症患者肾脏组织中的表达和鉴定目的对维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1）基因剪接异构体在草酸钙尿石症患者肾脏组织中的表达和鉴定进行分析研究。方法收集2004年11月至2010年4月武汉同济医院草酸钙尿石症患者肾脏组织标本65例,应用逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法对肾脏组织中的VKORC1基因进行扩增,将PCR产物进行纯化回收后,通过直接测序和克隆测序的方法对得到的肾脏组织中VKORC1基因剪接异构体进行分析。结果应用逆转录聚合酶链式反应的方法成功在草酸钙尿石症患者肾脏组织中扩增出VKORC1基因,并且得到2个剪接异构体,经过3%琼脂糖凝胶电泳显示一条约500bp的电泳条带（V1）和另一条约400bp的电泳条带（V2）,经过测序鉴定后发现二者碱基序列相差110bp,二者其余序列完全一致。结论草酸钙尿石症患者肾脏组织中存在VKORC1基因的剪接异构体。第三部分草酸钙尿石症患者肾脏组织中维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1）基因3’-非翻翻译区（3,-UTR）和5,-非翻译区（5’-UTR）的扩增和鉴定目的对草酸钙尿石症患者肾脏组织中维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1（VKORC1）基因的3’-非翻译区（3’-UTR）和5’-非翻译区（5’-UTR）进行扩增和鉴定,探讨维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1基因3’-非翻译区和5,-非翻译区的分子变异与草酸钙尿石形成之间的关系。方法收集2004年.11月至2010年4月武汉同济医院草酸钙尿石症患者肾脏组织标本65例,提取肾脏组织中的总RNA进行逆转录生成cDNA后,应用cDNA末端快速扩增（RACE）方法扩增维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1 （VKORC1）基因3’-非翻译区和5’-非翻译区,将扩增得到的产物进行纯化后测序。测序结果与NCBI核酸数据库进行在线比较,应用生物信息学分析得到的VKORC1基因碱基序列,核苷酸序列则通过Sequencher软件进行分析,并且使用BLAST程序进行碱基比对。结果草酸钙尿石症患者肾脏组织中VKORC1扩增后分别在3’端和5’端得到299bp和422bp的碱基片段,经过排序和拼接,得到草酸钙尿石症患者肾脏组织中VKORC1基因的cDNA全长,测序后得到证实。获得的VKORC1基因cDNA全长1174bp,包含492bp的开放阅读框（ORF,+398～+889）,终止密码子下游279bp的3’UTR以及起始密码子上游397bp的5’UTR。将得到的核苷酸序列进行比对分析后,发现在得到的VKORC1的3’和5’UTR没有发现有碱基的插入或缺失,但在5’UTR新发现171bp的碱基序列。结论VKORC1基因的3’-非翻译区与草酸钙尿石症患者肾脏组织中VKORC1的表达减少无明显相关,新发现的VKORC1基因5’端UTR序列上游区的171bp碱基序列对VKORC1活性的影响还有待于进一步研究。

杨俊锋^[10]（2010）在《化瘀尿石汤对实验性肾草酸钙结石形成的影响》文中研究表明目的：在既往研究的基础上,运用现代基础科学理论和研究方法,进一步观察化瘀尿石汤对肾草酸钙结石形成的影响,并通过测定各组大鼠血肌酐、尿素氮指标,来观察该方剂在保护肾功能上的作用,以深入揭示刘猷枋教授经验的科学内涵,为更好地继承刘猷枋教授经验及创造新的治疗方法启发思路,并为该方剂及其包含的行气活血、化瘀软坚治则在临床防治尿石症上的应用提供科学依据,为中医药在防治该病上发挥重要协同作用提供理论支持。方法：将每毫升含生药2.28g的化瘀尿石汤悬浊液加蒸馏水稀释成3种剂量后,将分析纯乙二醇液每5.693ml及分析纯氯化铵每5g溶于500ml自来水中,制成含1.25%乙二醇、1%氯化铵的诱石液。选用清洁级健康雄性Wistar大鼠60只,体重180-220g,适应环境后,随机分为模型组、化瘀尿石汤高、中、低剂量组,石淋通对照组及空白对照组,每组10只,各组大鼠均以正常饲料喂养,除空白组外,其余大鼠均以上述诱石液为饮水液,使其自由摄取,连续6周。造模的同时,化瘀尿石汤各剂量组、石淋通组按1ml／100g体重灌胃给药,每日一次,空白组予生理盐水按1ml／100g体重灌胃,每日一次,连续6周。各组大鼠在饲养的第6周末,断颈处死大鼠,解剖,下腔静脉穿刺取血3ml；并分离、提取双肾。称取左肾湿重,烘干,称重,经处理后用原子吸收光谱法测定各组肾钙含量。将右肾取冠状面切开,一半组织用解剖显微镜观察结晶沉积情况,另一半组织放入液氮中,冰冻切片后用偏光显微镜观察,并按文献的方法,对结晶沉积情况分级。下腔静脉穿刺取血,离心后取上层血清,进行血肌酐、尿素氮测定。对实验数据,多个样本均数两两之间全面比较采用SNK（Student-Newman-Keuls）检验,等级资料以Ridit分析,用SPSS 17.0统计软件分析,拟定P<0.05为有统计学差异,P<0.01为有显着差异。结果：各组大鼠一般情况比较：空白组无异常；模型组一般情况在各组中为最差,体重、毛色、精神、食欲、眼球色泽等均出现异常,并随造模时间延长而加重,死亡2只；石淋通组一般情况较差,但各项体征均模型组减轻,而明显较其余各组严重；化瘀尿石汤各剂量组一般情况较好,各项体征较模型组及石淋通组减轻,并随剂量增加而接近空白组。各组大鼠肾钙含量比较,空白对照组为1.708mg／g,而模型组可高达14.26mg／g,石淋通组使肾钙含量降低至11.449 mg／g,化瘀尿石汤高、中、低剂量组分别使肾钙含量降低至7.011mg／g、8.524 mg／g、10.221mg／g,两两组间比较,差异均有统计学意义,其中化瘀尿石汤低剂量组与石淋通组比较,P<0.05,其余各组比较,P<0.01。各组大鼠解剖显微镜下肾脏结晶沉积情况比较,模型组明显严重于空白组、石淋通组及化瘀尿石汤高、中剂量组（P<0.01或P<0.05）,高剂量组效果明显优于石淋通组（P<0.01）,中、低剂量组与石淋通组无明显差异（P>0.05）。各组大鼠偏光显微镜下肾脏结晶沉积情况比较,模型组明显严重于其余各组（P<0.01或P<0.05）,化瘀尿石汤高、中剂量组疗效明显优于石淋通组（P<0.01）,低剂量组与石淋通组无明显差异（P>0.05）。各组大鼠血肌酐值比较,空白组为60.305μmol／L,模型组可高达123.705u mol／L,石淋通组使其恢复至82.266μmol／L,化瘀尿石汤高剂量组恢复至64.425μmol／L,中剂量组为78.101μmol／L,低剂量组为80.895μmol／L,低剂量组与石淋通组差异无统计学意义（P>0.05）,高、中剂量组明显优于石淋通组（P<0.01）。⑥各组尿素氮值比较,空白组为5.236mmol／L,模型组可高达26.144mmol／L,石淋通组使其下降至9.883mmol／L,化瘀尿石汤高、中、低剂量组分别为5.722 mmol／L、8.194 mmol／L、9.520 mmol／L,化瘀尿石汤各剂量组均优于石淋通组（P<0.01）。结论：化瘀尿石汤能使草酸钙结石模型大鼠肾钙含量明显减少,且各剂量组效果均优于石淋通组；显微镜观察各组大鼠肾脏结晶沉积严重程度分级评分可见,解剖镜下高、中剂量组与模型组比较及偏光镜下各剂量组与模型组比较均有显着减轻。说明了该方剂及所包含的行气活血、化瘀软坚治则能减少乙二醇诱导的尿石症模型大鼠肾脏钙含量,从而影响草酸钙结石的形成。化瘀尿石汤能使肾结石模型大鼠的血清肌酐、尿素氮值降低,并随着给药剂量的增加而趋于正常值。说明该方剂在减轻结石所致的肾功能损害上,亦具有显着的疗效。化瘀尿石汤对尿石症是一首有效的方剂,其所包含的行气活血、化瘀软坚治则对尿石症尤其是上尿路结石,是一种有效的治则,能显着影响尿石的形成,并保护肾功能,其内在机制之一可能为改善肾组织供血供氧,防止结晶刺激引起肾组织损伤,从而阻止结晶附着,达到抑制结石形成的作用。以行气活血、化瘀软坚为治则组方化瘀尿石汤,是对尿石症中医治则理论的补充和丰富,亦是对《黄帝内经》中“谨守病机”古训的遵守和发挥。

二、尿凝血酶原片段1及其对草酸钙结晶形成的抑制作用（论文开题报告）

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、尿凝血酶原片段1及其对草酸钙结晶形成的抑制作用（论文提纲范文）

（1）299例上尿路结石成分分析及预防结石复发的研究（论文提纲范文）

（2）羟基枸橼酸抑制小鼠肾脏草酸钙结晶沉积的作用及机理初探（论文提纲范文）

（3）大鼠肾脏内草酸转运体Slc26a6的表达对实验性草酸钙结石形成的作用研究（论文提纲范文）

（4）泌尿系统结石患者尿中THP和OPN的检测及其预测价值探讨（论文提纲范文）

（5）金钱草总黄酮提取液抑制大鼠草酸钙结石形成机制的研究（论文提纲范文）

（6）化瘀健脾防石汤对泌尿系结石患者尿中主要结石抑制物影响的研究（论文提纲范文）

（7）草酸钙肾结石成因的研究现状（论文提纲范文）

（8）泌尿系结石主要抑制物的研究进展（论文提纲范文）

（9）草酸钙尿石症患者肾脏组织中维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1的初步研究（论文提纲范文）

（10）化瘀尿石汤对实验性肾草酸钙结石形成的影响（论文提纲范文）

四、尿凝血酶原片段1及其对草酸钙结晶形成的抑制作用（论文参考文献）

• [1]299例上尿路结石成分分析及预防结石复发的研究[D]. 曾磊. 中国医科大学, 2021(02)
• [2]羟基枸橼酸抑制小鼠肾脏草酸钙结晶沉积的作用及机理初探[D]. 刘萧. 华中科技大学, 2020(01)
• [3]大鼠肾脏内草酸转运体Slc26a6的表达对实验性草酸钙结石形成的作用研究[D]. 江弘炀. 华中科技大学, 2019(01)
• [4]泌尿系统结石患者尿中THP和OPN的检测及其预测价值探讨[D]. 闫晓煜. 湖南师范大学, 2018(01)
• [5]金钱草总黄酮提取液抑制大鼠草酸钙结石形成机制的研究[J]. 陶婷婷,吕伯东,黄晓军,傅骏,马寅锋. 中国现代医生, 2016(18)
• [6]化瘀健脾防石汤对泌尿系结石患者尿中主要结石抑制物影响的研究[D]. 高筱松. 中国中医科学院, 2016(01)
• [7]草酸钙肾结石成因的研究现状[J]. 田爱民,安瑞华,杨磊,林洋,余彪. 现代生物医学进展, 2014(27)
• [8]泌尿系结石主要抑制物的研究进展[J]. 刘东锋,吴希庆,萨音白钢. 包头医学院学报, 2013(03)
• [9]草酸钙尿石症患者肾脏组织中维生素K环氧化物还原酶复合物亚单位1的初步研究[D]. 胡波. 华中科技大学, 2011(10)
• [10]化瘀尿石汤对实验性肾草酸钙结石形成的影响[D]. 杨俊锋. 中国中医科学院, 2010(01)

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