一、禽、兔的抗球虫药得合理使用(论文文献综述)
杨玉娟[1](2021)在《聚醚类抗生素与恩诺沙星在鸡上基于CYP酶的相互作用研究》文中认为聚醚类抗生素主要用于预防和治疗鸡球虫病,其抗球虫谱广,同时具有促生长、提高饲料利用率,增加养殖效益等优点,因此在畜禽养殖业中被广泛使用,据估计45%的饲料添加有聚醚类抗生素。恩诺沙星(ENR)为广谱抗菌药,对由大肠杆菌、巴氏杆菌和支原体等引起禽的肠道或呼吸道感染均有良好的治疗效果。其口服吸收好,生物利用度高,常用于畜禽养殖业中细菌性疾病的治疗。由于两者在兽医临床的广泛应用,经常存在同时使用的情况。CYP450是药物在体内代谢的主要酶系,同时也可能受到药物的诱导和抑制。因此,两者联合使用可能会对代谢酶活性产生影响,从而影响两者在动物体内的代谢。若加快代谢则会影响药效的发挥;若减缓代谢则会加大对动物的毒性,延长单药的休药期,造成药物在动物可食性产品中残留超标的风险,从而影响消费者的健康。据报道,ENR与盐霉素(SAL)均可抑制代谢酶CYP3A活性,而CYP3A是ENR与SAL的主要代谢酶。我们推测,若ENR与SAL在临床上同时使用很有可能会因CYP3A酶活性被抑制产生相互作用,但聚醚类抗生素和ENR对鸡CYP450酶活性影响及共同使用后的药物相互作用尚未见报道。因此,本课题以莫能菌素(MON)、马杜拉霉素(MAD)、拉沙菌素(LAS)、SAL和ENR为研究对象,采用鸡肝微粒体体外代谢模型,分别研究聚醚类抗生素和ENR对鸡代谢酶的诱导或抑制作用。通过在鸡体内进行SAL和ENR联合给药的药动学研究,阐明两个药物合用是否会对彼此在鸡体内的处置过程产生影响,并进一步对鸡肝脏中代谢酶基因和蛋白的表达水平进行研究,以阐明两者相互作用的分子机制。本研究将有助于阐明SAL和ENR的联合用药的风险,对指导聚醚类抗生素和ENR临床合理应用和配伍具有重要的意义,也对其他药物的相互作用提供理论依据。1鸡肝微粒体体外孵育系统及检测方法的建立通过差速离心法制备鸡肝微粒体,并对蛋白浓度、反应时间、底物浓度进行优化,确定最佳反应条件。建立了4种底物及其代谢物的高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)检测方法和两种底物的高效液相色谱(HPLC)检测方法。结果显示6种探针药物在制备的肝微粒体系统中均可被代谢为目标代谢物,表明鸡肝微粒体系统构建成功。2 4种聚醚类抗生素与ENR对鸡肝微粒体代谢酶活性影响在预反应5 min时,SAL和LAS对鸡肝微粒体CYP2A6可产生诱导作用,诱导率分别是17%和25%;SAL在不经预反应和在预反应时间为5min时,对CYP2E1产生诱导作用,诱导率为37%和23%;LAS在不经预反应时,对CYP2E1产生诱导作用,诱导率为64%;MAD在不经预反应时对CYP2D6和CYP2E1起诱导作用,诱导率分别为12%和13%。在预反应30min时,SAL、LAS、MON和MAD均可对鸡肝微粒体CYP2D6、CYP2C23a、CYP2C45、CYP2E1和CYP3A4产生抑制作用,且为时间依赖性抑制作用,最大抑制率均超过50%。ENR可对CYP3A4产生抑制作用,且为时间依赖性抑制作用,在预反应30 min时抑制率为30%;但在不经预反应和预反应时间为5 min时,对CYP3A4产生诱导作用,诱导率为38%和25%;但对CYP2D6、2C23a、2C45和2E1酶活性无显着影响。结果表明,ENR和SAL均可对其主要代谢酶产生抑制作用,提示两者联合给药时有药物相互作用风险。3 SAL与ENR在鸡体内药动学影响研究与ENR单独给药组相比,单次联合给药组中ENR的AUC0-36h和AUC0-∞分别增加了31%和29%;在SAL 5 d预处理组中ENR的AUC0-36h和AUC0-∞分别增加了20%和19%。这表明共同给予SAL和ENR时,SAL会增加ENR在体的暴露量与暴露时间,结合肝微粒体孵育试验结果,这可能是由于SAL抑制了ENR主要代谢酶CYP3A的表达,导致ENR的代谢减慢。与SAL单独给药组相比,单次联合给药组中SAL的AUC0-48h、AUC0-∞和Cmax分别减少了32%、42%和33%,MRT0-48h和MRT0-∞分别增加了14%和15%;ENR 5 d预处理组中SAL的AUC0-48h、AUC0-∞、MRT0-48h、Cmax、MRT0-∞和t1/2分别增加了87%、87%、118%、64%、141%和16%。这表明共同给予SAL和ENR时,短时间内ENR会减少SAL在体的暴露量与暴露时间,而较长时间后,SAL的暴露水平会增加。结合肝微粒体孵育试验结果,这可能是由于ENR对SAL主要代谢酶CYP3A表达抑制效应呈现时间依赖性特征,短时间内ENR会诱导CYP3A的表达,而长时间接触后的ENR则会抑制CYP3A的表达,从而导致SAL的代谢先变快而后减慢。以上结果表明ENR和SAL共同给药时会增加ENR在鸡体内的暴露水平;而单次联合给药会减少SAL在体的暴露水平,长时间连续给药则会增大SAL在体的暴露水平。证明ENR与SAL确实存在相互作用,且长时间的共同给药会显着增加两者在体的暴露水平,这提示在临床共同使用时不仅会增加彼此对鸡的毒性,还可能延长两者在鸡可食性组织内的休药期,对人体健康产生威胁。4 SAL与ENR相互作用机制与ENR单独给药组相比,SAL 5d预处理组中CYP2D6、CYP1A2、CYP2C23a和CYP2C45的mRNA表达分别显着降低了76.92%、97.45%、95.25%和93.58%,CYP3A4的蛋白表达没有显着性差异;而单次联合给药的代谢酶mRNA和蛋白表达均无显着性差异。该结果正好支撑了药动学结果,进一步表明ENR与SAL共同给药后,SAL会抑制ENR次要代谢酶基因的表达,导致ENR的代谢减慢,在体暴露量增加。与SAL单独给药组相比,单次联合给药组中CYP3A4、CYP2D6、CYP1A2和CYP2C45的mRNA表达分别显着增加了353%、391%、548%和356%,CYP3A4的蛋白表达显着增加了49%;而ENR 5 d预处理组中只有CYP2C45的mRNA表达增加了155%,代谢酶CYP3A4的mRNA表达无显着性差异,但CYP3A4蛋白表达降低了30%。该结果与药动学结果一致,进一步揭示了当ENR和SAL共同给药时,单次联合给药的情况下ENR会诱导代谢酶mRNA的表达,从而促进CYP3A的蛋白表达,CYP3A酶活性增强,SAL代谢增加,从而减少SAL的暴露量;ENR连续给药时会抑制SAL主要代谢酶CYP3A的蛋白表达,CYP3A酶活性减弱,SAL代谢减少,从而增加SAL的暴露量。综上,本课题建立了肝微粒体代谢系统及探针底物的检测方法,确定了SAL和ENR在鸡上的主要代谢酶以及聚醚类抗生素和ENR对鸡CYP450代谢酶活性影响,阐明了SAL与ENR联合使用时将会增加彼此在体的暴露水平,提示两种药物在临床共同给药时会增加毒性和残留超标的风险,进而影响消费者的健康。此外,通过检测联合用药后肝脏中CYP450的mRNA或CYP3A蛋白的表达进一步阐明了基于CYP450代谢酶相互作用的分子机制。本研究为ENR与SAL以及其它聚醚类抗生素的相互作用提供了风险建议,为两者在临床的合理使用提供了参考。
张小龙[2](2021)在《帕托珠利溶液在鸡体内的生物利用度及其与妥曲珠利溶液的比较药动学》文中研究指明鸡球虫病是一种危害养鸡业的全球性寄生性原虫病,化学合成类抗球虫药目前仍是防治鸡球虫病的一种重要手段。现有的抗球虫药因长期低浓度预防用药甚至滥用,球虫不可避免对其产生一定程度的耐药性,因此开发新型高效抗球虫药具有重要的实际意义。作为妥曲珠利的主要活性代谢产物,帕托珠利在兽医临床上已被开发用于治疗马的原虫性脑脊髓炎(EPM)以及由新孢子虫和肉孢子虫引起的哺乳动物中枢性疾病。帕托珠利虽具有抗球虫活性,但至今尚未被开发为防治鸡球虫病的药物用于兽医临床。为探讨帕托珠利在防控鸡球虫病方面的可能性,本研究开展了单剂量口服帕托珠利溶液在健康肉鸡的药动学和生物利用度研究,并与单剂量口服妥曲珠利溶液在鸡的药动学特征进行比较。上述研究不仅能为帕托珠利的进一步开发利用提供依据,而且可指导临床合理用药。1、鸡血浆中帕托珠利和妥曲珠利含量的HPLC检测本研究分别建立了鸡血浆样品中帕托珠利和妥曲珠利含量的HPLC测定方法。血浆样品中帕托珠利采用乙酸乙酯液液萃取和净化,妥曲珠利则采用0.1%甲酸乙腈提取和净化,均采用C18色谱柱进行分离,HPLC紫外检测器检测。帕托珠利和妥曲珠利检测波长分别为250 nm、240 nm,流动相分别为0.2%乙酸水-乙腈(47:53,V/V)和0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液(pH=3)-乙腈(40:60,V/V),流速均为1mL/min,柱温分别为35℃和30℃。外标法定量。结果显示,血药浓度在0.10~20.00μg/mL范围内,帕托珠利和妥曲珠利线性关系均良好(R2≥0.999),检测限(LOD)和定量限(LOQ)均分别为0.05 μg/mL和0.1 μg/mL。血浆中帕托珠利添加浓度为0.10~20.00μg/mL时,回收率为87%~98%,批内和批间RSD均小于5%;血浆中妥曲珠利添加浓度为0.10~20.00 μg/mL时,回收率为87%~99%,批内和批间RSD分别小于4%和5%。本试验建立的帕托珠利、妥曲珠利提取和测定方法,适用于鸡血浆中帕托珠利和妥曲珠利含量的测定。2、帕托珠利溶液在鸡体内的药动学和生物利用度研究采用平行实验设计。20只健康AA鸡(公母各半),平均体重1.55 kg,随机分为帕托珠利溶液单剂量口服组(5 mg/kg)和单剂量静注组(5 mg/kg)。给药前所有鸡禁食12 h,于给药2 h后恢复饮食。按预定的时间采集血样,血浆中帕托珠利含量采用经验证的HPLC检测方法进行测定。实测血药浓度采用Winnolin6.3版分析软件计算药动学参数。结果显示,单剂量静注帕托珠利溶液后在鸡体内的平均消除半衰期(T1/2β)、平均药时曲线下面积(AUC0-t)、平均表观分布容积(Vz)、平均滞留时间(MRT)和平均血浆清除率(CL)分别为 93.60±11.18 h、778.27±120.00h·μg/mL、859.45±116.10 mL/kg、129.84±16.59h和6.40±0.83 mL/h/kg。帕托珠利在鸡体内分布范围较窄,较快的体清除率和较长的消除半衰期,提示其在鸡体内可能存在肝肠循环现象;单剂量口服帕托珠利溶液后主要药动学参数如下:平均Cmax、Tmax、T1/2β、AUC0-t和MRT分别为 4.52±1.01 μg/mL、24.00±6.00 h、101.78±15.54 h、609.23±118.59 h·μg/mL 和141.79±21.63 h,绝对生物利用度(F)为78.67%。表明帕托珠利溶液口服胃肠道吸收良好,但吸收和消除均缓慢。3、帕托珠利溶液与妥曲珠利溶液口服给药的比较药动学研究采用平行实验设计。20只健康AA鸡(公母各半),平均体重1.55 kg,随机分为妥曲珠利溶液单剂量口服(5 mg/kg)组和帕托珠利溶液单剂量口服(5 mg/kg)组。给药前所有鸡禁食12h,给药2h后恢复饮食。按预定的时间采集血样,血浆中妥曲珠利和帕托珠利分别采用经验证的HPLC检测方法进行测定。实测血药浓度采用Winnolin6.3分析软件计算药动学参数。结果显示,单剂量口服妥曲珠利溶液后妥曲珠利在鸡体内的平均 Cmax、Tmax、T1/2β、AUC0-t和 MRT 分别为 6.17±0.85μg/mL、2.80±1.03 h、16.65±3.63 h、92.00±10.36h·μg/mL 和 16.05±2.49h。与妥曲珠利相比,帕托珠利口服吸收缓慢、消除半衰期明显延长。研究结果提示帕托珠利给药后在鸡体内不仅药效维持时间可能较长,而且在鸡的可食性组织中残留时间也较长。
姚亚文[3](2021)在《基于基因组重测序筛选柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药的候选基因及耐药相关基因特性研究》文中指出鸡球虫病是一种寄生于鸡肠道危害严重的寄生虫病。目前,该病主要依赖于药物防治,药物的长期广泛使用导致鸡球虫出现严重耐药性。为研究鸡球虫耐药性产生的分子机制,本研究对柔嫩艾美耳球虫敏感株(DS)和盐霉素耐药株(SMR)进行全基因组重测序,利用选择性清除方法筛选出可能与盐霉素耐药相关的候选基因,并对3个耐药相关基因(柔嫩艾美耳球虫保守蛋白35(EtCHP35)、柔嫩艾美耳球虫保守蛋白40(EtCHP40)和柔嫩艾美耳球虫表面抗原(EtSAG))的特性进行了初步分析。1.全基因组重测序与选择性清除筛选柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药相关基因本研究对柔嫩艾美耳球虫10株药物敏感株、3株实验室诱导的盐霉素耐药株和15株单卵囊分离的田间盐霉素耐药株进行了全基因组重测序分析,结果显示样品数据量均在1?Gb以上,Q20≥95%、Q30≥90%,与参考基因组比对结果显示比对率均高于82%,测序深度均大于14%,覆盖度(4×)均高于92%。利用选择性清除方法对柔嫩艾美耳球虫药物敏感株和盐霉素耐药株重测序结果进行分析,获得73个在敏感株受选择基因,共1221个SNPs位点,其中81个SNPs属于非同义突变;获得148个在盐霉素耐药株受选择基因,共2545个SNPs位点,其中118个SNPs位点属于非同义突变。GO富集分析结果显示,敏感株候选基因主要参与生物过程和分子功能,盐霉素耐药株候选基因主要参与生物代谢过程。KEGG通路分析结果显示,敏感株候选基因主要参与吞噬体、氧化磷酸化和新陈代谢等通路,盐霉素耐药株候选基因主要参与吞噬体,新陈代谢等通路。将选择性清除的候选基因与转录组结果关联分析,获得共有基因14个,这些基因主要参与核糖体和ATP转运等通路。2.3个耐药相关基因的克隆和生物信息学分析以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊c DNA第一链为扩增模板,成功克隆了EtCHP35,EtCHP40和EtSAG的ORF序列。对氨基酸序列分析显示,三个蛋白均无跨膜结构,有多个蛋白酶磷酸化位点,其中EtCHP35含一个逆转录酶位点,EtCHP40含一个天冬氨酸蛋白酶活性位点,EtSAG含一个信号肽,一个苏氨酸富集区,属于表面抗原家族(SAG family member)。成功构建原核重组表达质粒并诱导表达了三个重组蛋白(r EtCHP35,r EtCHP40和r EtSAG),并制备了相应的抗体。3.3个耐药相关基因特性分析间接免疫荧光定位结果显示EtCHP35和EtCHP40主要分布在子孢子的表面和顶端,EtSAG主要分布在子孢子和第二代裂殖子的表面。体外抑制实验结果显示这3个蛋白与子孢子入侵宿主细胞无关。利用实时荧光定量PCR,对3个基因在柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段以及不同虫株(耐药株和敏感株)的mRNA转录水平进行分析,结果显示EtCHP35和EtSAG基因在敏感株孢子化卵囊阶段的mRNA转录水平最高,EtCHP40基因在第二代裂殖子阶段高表达。与敏感株相比,EtCHP35基因的mRNA转录水平在马杜拉霉素耐药株和盐霉素耐药株第二代裂殖子阶段上调;EtCHP40基因在3株耐药株(地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株、盐霉素耐药株)第二代裂殖子阶段均上调,且在马杜拉霉素耐药株的转录水平显着高于其他耐药株;EtSAG基因的mRNA转录水平在马杜拉霉素耐药株上调,在盐霉素和地克珠利耐药株的转录水平下调。且在不同浓度的盐霉素作用下,EtCHP35和EtCHP40的mRNA转录水平随着药物浓度的升高而升高。上述结果为进一步研究柔嫩艾美耳球虫耐药性产生的分子机制及建立田间鸡球虫耐药性快速检测方法提供了一定的基础。
郭双双[4](2021)在《临床柔嫩艾美耳球虫的抗药性分析和药物作用研究》文中研究说明球虫病是危害畜禽养殖业的常见病,其中鸡球虫病是影响集约化养鸡最重要的寄生虫病,鸡球虫中致病性强、危害大的主要是柔嫩艾美耳球虫。抗球虫药物的使用是长期来控制本病的主要方法,但存在日益严重的球虫耐药性问题,造成巨大的的经济损失。因此,了解临床球虫对一线常用药物的敏感性现状,特别是柔嫩艾美耳球虫的耐药性,同时探索田间混合株和柔嫩艾美耳球虫分离株的耐药一致性,验证不同种属球虫耐药性检测方法的可靠性,对临床科学的用药选择、延缓耐药的产生和球虫耐药的应对等有重要意义。为此,本研究检测了临床田间混合株以及从中各分离的3株柔嫩艾美耳球虫株对11种常用抗球虫药物的敏感性,在分析比较临床耐药现状的基础上,针对分离的耐药柔嫩艾美耳球虫,分别进行了不同抗球虫药物联合、天然药物和抗球虫药物联合以及抗球虫药物和辅助药物联合等方式,探索有效的耐药应对法,以期为改善临床耐药提供线索和参考,主要研究内容如下:成功构建了鉴定七种艾美耳球虫的Taq Man荧光定量PCR方法,方法检测限度为10拷贝,七种球虫质粒的标准曲线和扩增效率等均符合方法学要求。本研究采用球虫的琼脂块单卵囊分离方法,从临床田间混合XYP和HZD中分离到XYP1、XYP2、XYP3和HZD1、HZD2、HZD3共6株柔嫩艾美耳球虫,分别通过其寄生的肠道部位、卵囊和孢子囊的形态结构等生物学特征判断为柔嫩艾美耳球虫,进一步通过荧光定量PCR方法鉴定,确认为6株遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫。利用鸡体试验的抗球虫指数(ACI)、最适抗球虫活性百分率(POAA)、病变计分减少率(RLS)和相对卵囊产量(ROP)4项指标的综合评价方法,分别检测了临床田间混合XYP和HZD株,以及从中分离的柔嫩艾美耳球虫株HZD1、HZD2、HZD3和XYP1、XYP2、XYP3,对癸氧喹酯、二硝托胺、氯羟吡啶、盐酸氯苯胍、马度米星铵、地克珠利、尼卡巴嗪、甲基盐霉素、莫能菌素、磺胺氯吡嗪钠和拉沙洛西钠的耐药性。结果显示,临床球虫对常用的抗球虫药物都存在严重的耐药性,其中山东XYP株对11种临床常用抗球虫药均表现为完全耐药,不同柔嫩艾美耳球虫株之间的耐药性结果不一致,与其来源的田间混合株的耐药情况也有明显的不同。本研究结果提示,基于单卵囊分离的不同种属球虫药物敏感性检测的传统方法存在局限性,鸡球虫不同种属的药物敏感性测试方法还有待进一步研究和完善。采用正交试验设计法,利用单卵囊分离技术分离的耐药柔嫩艾美耳球虫,通过鸡体试验的方法,进行了不同类型抗球虫药物联合应用应对耐药柔嫩艾美耳球虫的可行性,同时探索了天然药物、辅助药物与抗球虫药物联合使用对耐药虫株的有效性,通过对组方的不同因素以及不同水平的药效评价,筛选合理组方和药物的最适剂量。结果发现,尼卡巴嗪与甲基盐霉素以及莫能菌素与癸氧喹酯的联合应用,可以部分提升抗球虫的疗效,此外,氯苯胍的剂量提高可以明显改善药物的敏感性,氯苯胍和甲基盐霉素联合应用有提升药物疗效的趋势,但本试验选用的天然药物、辅助药物对耐药球虫疗效的改善作用不明显,球虫耐药的消除和有效应对方法还有待进一步的探索和研究。综上,本研究通过单卵囊分离技术和q PCR鉴定技术,成功分离鉴定了6株遗传背景一致的柔嫩艾美耳球虫。论文检测并分析了田间混合株和柔嫩艾美耳球虫分离株的耐药性,发现了临床鸡球虫的严重耐药性以及传统方法检测不同种属球虫耐药性方法的局限性。论文还利用不同抗球虫药物联合使用、抗球虫药物和天然药物联合使用以及抗球虫药物和辅助药物联合使用等措施,探索了消减球虫耐药的可能性,为球虫耐药性的研究提供了参考。
程晓蕾[5](2021)在《两种抗球虫药对鸡盲肠与土壤中菌群影响的研究》文中进行了进一步梳理鸡球虫病作为胞内寄生虫病,给养殖业造成巨大经济损失。以抗球虫药物为主的鸡球虫病防治模式,决定了养殖过程需要大量的使用抗球虫药物。通常,这些抗球虫药物又以其原型或主要代谢物的形式通过动物排泄物进入环境中。盐霉素是重要的聚醚类离子载体药物,沙咪珠利是我国化学合成类国家一类新药,它们对肠道微生物及环境微生物的影响目前还不清楚。据此,本论文以盐霉素和沙咪珠利为研究对象,分别研究它们对鸡盲肠内容物微生物多样性及代谢组的影响,以及对土壤环境菌落微生物影响作用,以期为两药的合理使用和环境转归提供科学依据。为研究沙咪珠利、盐霉素对鸡盲肠内容物微生物多样性及其功能的影响,利用16S高通量测序技术,对鸡盲肠内容物进行研究。试验结果表明,健康组、感染组、沙咪珠利用药组、盐霉素用药组样品基于门水平的物种组成中,Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidota为优势菌群,但健康组的Proteobacteria相对丰度显着低于其他三组;基于属水平的物种组成分别是Escherichia-Shigella、Bacteroides、Faecalibacterium、Enterococcus、Alistipes、unidentified Chloroplast、Helicobacter、Tuzzerella,Butyricicoccus,UCG-005组成,但健康组中Escherichia-Shigella显着低于其他三组(P<0.05),Faecalibacterium和Alistipes显着高于其他三组(P<0.05),健康组的Enterococcus显着低于感染组(P<0.05),但与其他两组差异并不显着。四组样品中盲肠菌群的主要功能都集中在新陈代谢、遗传信息处理、环境信息处理,且无显着差异。鸡盲肠内容物代谢组学分析结果显示,沙咪珠利用药组和感染组代谢物之间存在显着差异,沙咪珠利用药组与感染组相比,有51个上调差异代谢物,14个下调差异代谢物,差异代谢物主要涉及甘油磷脂代谢、嘌呤代谢、氨酰-t RNA生物合成、半胱氨酸和蛋氨酸的代谢等;盐霉素用药组与感染组相比,有43个上调差异代谢物,32个下调差异代谢物,差异代谢主要涉及β-丙氨酸代谢、组氨酸代谢,维生素B6代谢等。利用16S高通量测序技术,继续研究这两种抗球虫药对粪便堆肥过程中微生物的影响。与盲肠内容物结果相似,新鲜粪便中门水平的优势物种也是Proteobacteria、Firmicutes、Bacteroidota。随着堆肥时间的延长,三组样品中Firmicutes占据绝对优势,Clostridiales作为堆肥过程中的优势菌种,在三组样品之间相对丰度差异不显着,说明这两种抗球虫药物的使用,没有明显改变粪便中的优势物种。使用Biolog-ECO检测方法,研究分别添加这两种抗球虫药对土壤微生物群落功能活性的影响,试验结果表明,沙咪珠利的施加,在一定时间内没有改变土壤微生物群落多样性,而盐霉素的施加在一定时间内增强了土壤微生物群落多样性。综上所述,这两种抗球虫药物对感染柔嫩艾美耳球虫的鸡盲肠内容物菌群结构及代谢通路影响有限,对鸡粪堆肥过程中的优势菌群结构产生影响不明显,而在土壤中沙咪珠利也不会明显影响微生物活性,盐霉素可在一定时间内影响微生物活性。
吴文君[6](2020)在《如东县鸡球虫种类调查及柔嫩艾美耳球虫的耐药性检测》文中提出鸡球虫病是由艾美耳属球虫引起的一种严重危害养鸡业的寄生原虫病,其病原有7种,分别是柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、早熟艾美耳球虫(E.praecox)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)和布氏艾美耳球虫(E.brunetti)。不同种类的球虫其致病性不尽一致,且对同一种药物的敏感性也不一致。在自然情况下,球虫多为混合感染,在不同地区流行的球虫种类有所不同。目前,对该病的防治仍以药物为主,但长期使用药物已导致耐药性产生,影响药物效力。因此,对鸡球虫流行种类的调查与鉴定以及田间分离株的耐药性检测,是防控鸡球虫病的重要基础。为此,本文开展了以下工作。通过采用粪检卵囊、ITS-1序列的PCR检测、卵囊形态观察及动物回归试验相结合的方法,在如东县对21个养殖场(户)的28个鸡群进行了球虫种类和流行病学的调查。结果显示,21个养殖场均检出球虫卵囊,在28个鸡群中26个感染球虫,其中50日龄以下鸡群的卵囊阳性率为83.3%(10/12),50日龄及以上鸡群的卵囊阳性率为100%(16/16);共检测到7种鸡球虫,其检出率柔嫩艾美耳球虫为85.7%,堆型艾美耳球虫为92.9%,巨型艾美耳球虫为82.1%,毒害艾美耳球虫为42.9%,和缓艾美耳球虫为42.9%,早熟艾美耳球虫为39.3%,布氏艾美耳球虫为14.3%,优势种为堆型艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫;球虫混合感染率为92.3%(24/26),其中混合感染4种球虫最高达46.2%(12/26);PCR检测结果与卵囊形态特征观察及动物回归试验结果相一致。采用动物感染试验法,以相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)、最适抗球虫百分数(POAA)和抗球虫指数(ACI)等4项判定指标,分析2株柔嫩艾美耳球虫田间分离株及1株实验室保存株对地克珠利和盐霉素的耐药性。结果显示,分离株1和实验室保存株对地克珠利无耐药性,分离株2对地克珠利无耐药性或轻度耐药;3个虫株对盐霉素均完全耐药。分析其原因,可能是盐霉素在该县曾经或现在已有广泛使用,而地克珠利在该市使用较少或停用时间较长。鉴于这一检测结果,建议养鸡场应停用盐霉素,改用地克珠利。在使用时进行轮换用药或联合用药,以延长药物的使用寿命。结论:如东县养鸡场流行7种鸡球虫,优势种是堆型、柔嫩和巨型艾美耳球虫,多数为混合感染;两鸡场对地克珠利无耐药性或轻度耐药,对盐霉素产生了完全耐药。
王海霞[7](2020)在《柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导及耐药相关基因特性的初步分析》文中研究说明球虫病是世界上危害严重的寄生虫病之一,对养鸡业造成了巨大的经济损失。随着药物的广泛使用及不合理使用,耐药性成为无法避免的问题,但球虫耐药性形成的机制至今不清楚,也没有找到控制球虫产生耐药性的靶基因。本研究通过实验室诱导获得了柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药虫株,观察了盐霉素耐药株和敏感株子孢子和裂殖子的超微结构,分析了盐霉素耐药株和敏感株的差异表达基因,检测了3个鸡球虫田间分离株的耐药状况,利用单卵囊分离技术获得22个柔嫩艾美耳球虫盐霉素田间耐药株,对柠檬酸合酶(EtCS)、甲硫氨酸氨基肽酶(EtMetAP)、锚蛋白重复序列(EtANK)3个球虫耐药相关基因的特性进行了初步分析。1.柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的实验室诱导与电镜观察采用药物浓度递增法,以15 mg/kg(药物/饲料)为起始诱导浓度,经过24次传代,用鸡体药敏试验检测,获得对盐霉素60 mg/kg完全耐药的柔嫩艾美耳球虫耐药株。利用透射电镜观察了盐霉素耐药株子孢子和裂殖子的超微结构,发现耐药株虫体的形态变得不规则、细胞膜粗糙与肿胀、细胞核形状变得不规则甚至溶解、微线减少、支链淀粉增多等。2.柔嫩艾美耳球虫敏感株和耐药株的比较转录组学分析利用RNA-seq对柔嫩艾美耳球虫敏感株和盐霉素耐药株的子孢子和裂殖子进行转录组测序分析。结果显示,与敏感株相比,耐药株子孢子获得17个上调表达基因、13个下调表达基因;耐药株裂殖子获得606个上调表达基因、496个下调表达基因,子孢子和裂殖子共有差异表达基因18个。GO分析发现,耐药株子孢子的差异表达基因主要参与离子结合过程,耐药株裂殖子的差异表达基因主要参与细胞蛋白质代谢过程。用qPCR对差异表达基因进行了验证,结果与转录组测序结果基本一致。3.鸡球虫田间分离株的耐药程度检测与柔嫩艾美耳球虫盐霉素田间耐药株的分离从安徽不同养殖场收集样品,获得3个鸡球虫田间株(AH1、AH2、AH3),通过鸡体药敏试验检测了田间株对5种抗球虫药物(地克珠利、盐霉素、癸氧喹酯、甲基盐霉素、氯苯胍)的耐药程度,除AH2对氯苯胍中度耐药外,所测虫株对其他药物完全耐药。用琼脂糖技术分离获得22个柔嫩艾美耳球虫单卵囊分离株,用qPCR分析了4个差异表达基因在2个单卵囊分离株及安徽1混合种的mRNA转录水平,与转录组测序结果一致。4.三个耐药相关基因特性的初步分析对3个球虫耐药相关基因(EtCS、EtMetAP、EtANK)进行克隆、表达与纯化,制备相应抗体,分析3个基因在柔嫩艾美耳球虫球虫未孢子化卵囊、孢子化卵囊、子孢子、裂殖子的转录水平和翻译水平,结果表明这三个基因在四个阶段的转录水平和翻译水平不一致,可能是翻译后修饰的结果。间接免疫荧光表明,EtCS、EtMetAP、EtANK分别定位于子孢子除折光体外的细胞质中、子孢子表面、子孢子的顶端、都定位于裂殖子的细胞膜和细胞质中。体外抑制实验表明,这3个蛋白都参与了子孢子入侵DF-1细胞的过程。用EtCS处理鸡巨噬细胞后发现,EtCS可与巨噬细胞结合,抑制巨噬细胞的增殖及NO的产生。对敏感株和不同耐药株进行转录水平分析,发现这3个基因在柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株和马杜拉霉素耐药株中表达都显着上调,而在盐霉素耐药株中差异不显着,与转录组结果一致。但这3个基因在耐药株中的蛋白翻译水平与转录结果不一致。利用qPCR分析3个基因在单卵囊分离的盐霉素田间耐药株、安徽1混合种、单卵囊分离的地克珠利田间耐药株的mRNA转录水平,结果显示,与敏感株相比,3个基因在安徽1混合种的转录水平都很低;在3株地克珠利田间耐药株中,除EtCS在其中2株下调表达外,其余都上调表达;在3株盐霉素田间耐药株中,EtMetAP表达上调和EtCS表达下调,EtANK差异不明显;与盐霉素转录组结果不一致,可能是由于分离的田间耐药株存在多重耐药性。结论:本研究利用诱导获得的柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株和敏感株进行比较转录组学分析获得差异表达基因,用田间分离的柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株进行了验证,选取3个耐药相关基因进行初步分析,结果为进一步研究球虫耐药性产生的分子基础提供了基础。
王青虎[8](2020)在《临沂地区兔球虫病流行病学调查及药物防治的效果观察》文中研究指明兔球虫病(rabbit coccidiosis)是由艾美耳属(Eimeria)或等孢属(Isospora)球虫寄生于兔的小肠或胆管上皮细胞内所引起的一种家兔最常见的体内寄生虫病。该病分布广、传播快、致死率高,对不同品种、年龄的兔均具有易感性,特别是断奶后至3月龄内的仔兔最易感染,给养兔业造成极大的危害,带来了巨大的经济损失。目前公认的兔球虫的种类有11种有效种,11种有效种包括斯氏艾美耳球虫(E.stiedai)、肠艾美耳球(E.intestinalis)、黄艾美耳球虫(E.falvescens)、小型艾美耳球虫(E.exigua)、中型艾美耳球(E.media)、大型艾美耳球虫(E.magna)、穿孔艾美耳球虫(E.perforans)、维氏艾美耳球虫(E.vejdovskyi)、盲肠艾美耳球(E.coecicoia)、梨型艾美耳球虫(E.piriformis)、无残艾美耳球虫(E.irresidua)。为掌握临沂地区兔球虫病的流行病学情况,本试验研究利用饱和食盐水卵囊漂浮法对临沂地区6个兔场采集的450份(每个兔场75份)仔兔新鲜粪便进行检测。结果表明:(1)450份仔兔新鲜粪便中有345份检出球虫卵囊,平均检出率76.67%。(2)此次调查的6个兔场,其球虫卵囊OPG值(每克粪便中卵囊数量)最大的为9.47×104,最小的为0.15×104,说明该地区的养兔场中兔球虫的感染情况处于中度感染或轻度感染。(3)根据卵囊形态特征、内残体、外残体等特征,镜检结果显示:临沂地区6个兔场共检出11种公认艾美耳球虫,且粪样呈混合感染,多为4-6种球虫混合感染。这些结果为该地区养兔生产中球虫病的防治提供了参考依据,为比较3种抗球虫药和药物组合对兔球虫病的预防效果,选用两批共480只,40日龄的健康獭兔,开展试验,试验周期30天;每批分为4组,每组60只仔兔,将氯苯胍(150 mg/kg)、常山碱(100 mg/kg)、氯丙胍+常山碱(80 mg/kg+100 mg/kg)、二硝托胺(125 mg/kg),分别添加到各组饲料中,观察试验兔的临床症状,测定每克粪便卵囊的数量变化,并对每只死亡兔作剖检观察,来判定药物的抗球虫效果。结果表明:(1)仔兔断奶后5天(40日龄)和64日龄左右球虫感染较为严重,为球虫病高发期。(2)处理A组(氯苯胍)与其它组平均增重存在差异显着(P<0.05),平均增重低于其它组;处理B组(氯苯胍+常山碱)与处理C组(常山碱)平均增重存在差异不显着(P>0.05);处理D组(二硝托胺)与其它组平均增重存在差异显着(P<0.05),平均增重高于其它组。(3)药物防治的效果观察显示,二硝托胺对临沂地区兔球虫病防治效果最好,可作为该地区兔球虫防控的首选药物,常山碱可作为次选,氯苯胍暂时不建议使用。
华恩玉[9](2020)在《堆型艾美耳球虫配子体蛋白EaGAM56与EaGAM82的原核表达及其免疫保护作用研究》文中研究指明鸡球虫病是一种严重危害养鸡业的寄生原虫病,据不完全统计每年球虫病给家禽养殖业造成的经济损失超过30亿美元。长期以来,鸡球虫病的防控主要依赖药物。但随着球虫耐药性的不断增强以及药物残留危害食品安全,鸡球虫病的防控措施由药物防治转向疫苗免疫预防。目前,用于临床的鸡球虫病疫苗主要是活虫苗,亚单位疫苗仅见有一种,即由分离于巨型艾美耳球虫(Eimeriamaxima)配子体的3种蛋白研制而成。堆型艾美耳球虫(E.acervulina)是养鸡场流行最广泛的鸡球虫之一,可引起鸡的亚临床球虫病,影响鸡的生长发育,降低饲料利用率。迄今,国内外对堆型艾美耳球虫配子体蛋白及其基因少有报道,其重组蛋白的免疫保护力也尚无见有报道。为此,本文对堆型艾美耳球虫配子体蛋白56基因(Eagam56)与82基因(Eagam82)进行了克隆和序列分析,分别构建了 2个基因的原核表达质粒,诱导表达后鉴定了重组蛋白的免疫原性,并经动物免疫保护试验评价了重组蛋白对堆型艾美耳球虫的免疫保护力,研究结果将为研制重组配子体抗原亚单位疫苗奠定基础。1.堆型艾美耳球虫Eagam56基因的克隆表达与免疫原性分析提取堆型艾美耳球虫(扬州株)卵囊的基因组DNA,PCR扩增Eagam56基因片段,克隆至pGEM-T-Easy载体;经测序、密码子优化后连接至pET-28a(+)质粒,构建pET-28a(+)-Eagam56表达载体,转化至大肠杆菌BL21;重组菌经酶切和测序鉴定后进行诱导表达,表达产物分别进行SDS-PAGE分析、Western-blot鉴定以及免疫原性分析。结果显示,克隆的Eagam56基因全长为1323 bp,具有一个大小为1323 bp的完整开放阅读框,编码440个氨基酸;与Genbank上的Eagam56基因序列对比,其同源性为99.9%;用在线软件对该基因编码区抗原性进行预测,发现Eagam56基因含有10个抗原决定簇,其中3个位于酪氨酸、脯氨酸富集区;重组蛋白大小约49 kDa,以可溶蛋白形式居多,可被HIS单抗特异性识别,也可被鼠抗重组蛋白多克隆抗体,以及堆型艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)感染的鸡阳性血清特异性识别,显示重组蛋白EaGAM56具有良好的免疫原性和交叉抗原性。2.堆型艾美耳球虫Eagam82基因的克隆表达与免疫原性分析提取堆型艾美耳球虫(扬州株)卵囊的基因组DNA,PCR扩增Eagam82基因片段,克隆至pGEM-T-Easy载体;经测序、密码子优化后连接至pET-28a(+)质粒,构建pET-28a(+)-Eagam82表达载体,转化至大肠杆菌BL21;重组菌经酶切和测序鉴定后,对表达产物进行SDS-PAGE分析、Western-blot鉴定以及免疫原性分析。结果显示,克隆的Eagam82基因全长为1704bp,具有一个大小为1704bp的完整开放阅读框,编码568个氨基酸;与Genbank上的Eagam8基因序列对比,其同源性为99.4%;用在线软件对该基因编码区抗原性进行预测,发现Eagam82基因含有15个抗原决定簇,其中2个位于酪氨酸、脯氨酸富集区;重组蛋白大小约82 kDa,以可溶蛋白形式为多;可被HIS单抗特异性识别,也可被鼠抗重组蛋白多克隆抗体,以及堆型艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫感染的鸡阳性血清特异性识别,显示重组蛋白EaGAM82具有良好免疫原性和交叉抗原性。3.重组蛋白rEaGAM56和rEaGAM82及其联合免疫对堆型艾美耳球虫的免疫保护力以黄羽肉鸡为试验动物,以鸡的增重、相对增重率、卵囊减少率、病变记分、抗球虫指数(ACI)以及血清抗体水平等为评价指标,评价重组蛋白rEaGAM56、rEaGAM82以及2种重组蛋白联合应用的免疫保护效果。结果显示,rEaGAM56与rEaGAM82高(200 μg/鸡)、中(100 μg/鸡)剂量免疫组以及联合免疫组,鸡临床症状减轻。随着免疫剂量的增加,鸡的相对增重率与卵囊减少率增加,平均肠道病变记分减少。联合免疫高剂量组(各100 μg/鸡重组蛋白)的相对增重率与卵囊减少率达73.74%和74.27%。rEaGAM56、rEaGAM82、联合免疫高剂量组的 ACI 分别为 148.24、143.92 和 148.74。rEaGAM56的免疫保护力较rEaGAM82的强,rEaGAM56和rEaGAM82免疫鸡后均能产生血清抗体。结论:两种重组蛋白免疫均能产生一定的免疫保护力。
沈佳晨[10](2020)在《帕托珠利混悬液在仔猪的药动学及生物利用度研究》文中指出帕托珠利为妥曲珠利的主要活性代谢产物,不仅具有抗球虫活性,而且对新孢子虫、弓形虫、鞭毛虫等原虫也均显示出良好的活性。目前帕托珠利已被开发用于治疗马原虫性脑脊髓炎(EPM),但迄今尚未见批准用于其他动物方面的报道。目前可用于猪球虫病防控的药物品种很少,而帕托珠利的抗球虫活性有望开发用于预防仔猪球虫病。本研究通过对帕托珠利混悬液在仔猪体内的药动学特征以及口服给药的生物利用度的研究,旨在为其在防治仔猪球虫病方面的临床合理给药提供依据。1、猪血浆中帕托珠利含量的HPLC检测本研究建立了猪血浆中帕托珠利含量的HPLC测定法法。猪血浆中帕托珠利采用乙酸乙酯液液萃取和净化,采用C18反向色谱柱进行分离,高效液相色谱紫外检测器检测,检测波长为250nm,外标法定量。流动相为乙腈-0.2%乙酸水溶液(体积比53:47),流速1mL/min,柱温35℃。结果表明,帕托珠利血药浓度在0.1010.00μg/mL范围内线性关系良好(R>0.999),方法检测限和定量限分别为0.04μg/mL和0.1μg/mL,批内和批间的回收率均大于90%,批内和批间的精密度RSD分别小于5%和9%。本研究确立了猪血浆中帕托珠利的净化和测定方法,适用于猪血浆中帕托珠利含量的测定。2、帕托珠利混悬液在仔猪的药动学和生物利用度研究采用平行实验设计。16头40日龄健康仔猪随机分成两组,每组8头(公母各半),分别进行单剂量静脉注射(6mg/kg bw)或单剂量口服给药(15mg/kg bw),所有猪给药前禁食12h,给药2h后恢复正常饮食。给药后按预定的采血点采集血样,血浆中帕托珠利含量采用经验证的HPLC检测方法进行测定。实测血药浓度数据采用Graphad prism 8.0拟合药时曲线图,并用Winnonlin5.2计算药动学参数。结果显示,单剂量静脉注射帕托珠利注射液后帕托珠利在仔猪体内主要药动学参数如下:平均消除半衰期(T1/2β)为136.98h,平均滞留时间(MRT)为165.92h,平均药时曲线下面积(AUC0-t)为1570.97h.μg/mL,平均表观分布容积(Vz)为695.59 mL/kg,平均血浆清除率(CL)为3.77 mL/h·kg。单剂量口服帕托珠利混悬液后帕托珠利在仔猪体内主要药动学参数如下:平均消除半衰期(T1/2β)为134.05h,平均达峰时间(Tmax)为42.00h,平均峰浓度(Cmax)为14.03μg/mL,平均滞留时间(MRT)为173.19h,平均药时曲线下面积(AUC0-t)为2831.00 h·μg/mL,帕托珠利混悬液口服给药绝对生物利用度为72.08%。结果表明,帕托珠利在仔猪体内分布较差,消除缓慢;帕托珠利混悬液口服给药后在仔猪体内吸收良好,消除时间缓慢。
二、禽、兔的抗球虫药得合理使用(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、禽、兔的抗球虫药得合理使用(论文提纲范文)
(1)聚醚类抗生素与恩诺沙星在鸡上基于CYP酶的相互作用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略语表 |
1 前言 |
1.1 立题依据 |
1.2 国内外研究进展 |
1.2.1 聚醚类抗球虫药的研究进展 |
1.2.2 ENR的研究进展 |
1.2.3 聚醚类抗生素以及ENR的相互作用研究进展 |
1.2.4 CYP450代谢酶的概述 |
1.2.5 药物相互作用的研究方法 |
1.3 研究内容与目标 |
1.3.1 研究内容 |
1.3.2 研究目标 |
2 材料与方法 |
2.1 药品 |
2.2 试剂 |
2.3 溶液配制 |
2.4 仪器与设备 |
2.5 试验动物 |
2.6 肝微粒体的制备 |
2.6.1 肝微粒体蛋白浓度测定 |
2.6.2 肝微粒体蛋白活性验证 |
2.7 探针药物检测方法建立 |
2.7.1 检测条件 |
2.7.2 样品前处理方法 |
2.7.3 专属性 |
2.7.4 标准曲线的建立 |
2.7.5 检测限和定量限 |
2.7.6 准确度和精密度 |
2.8 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶体外活性影响 |
2.8.1 反应时间的优化 |
2.8.2 蛋白浓度的优化 |
2.8.3 底物浓度的优化 |
2.8.4 SAL和ENR主要代谢酶的确认 |
2.8.5 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶活性影响 |
2.8.6 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶活性抑制类型 |
2.8.7 SAL和ENR体外联合给药对代谢的影响 |
2.9 SAL与 ENR联用后在鸡体内的暴露情况 |
2.9.1 动物给药方案 |
2.9.2 鸡血浆中ENR和SAL检测方法建立 |
2.10 SAL与ENR相互作用的分子机制研究 |
2.10.1 肝脏RNA提取 |
2.10.2 反转录为cDNA |
2.10.3 RT-PCR |
2.10.4 Western blot |
2.11 数据分析 |
3 结果与分析 |
3.1 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶体外活性的影响 |
3.1.1 肝微粒体蛋白浓度及活性 |
3.1.2 CYP2A6探针药物检测方法 |
3.1.3 CYP3A4探针药物检测方法 |
3.1.4 CYP2D6、2C23a、2C45、2E1探针药物检测方法 |
3.1.5 肝微粒体孵育CYP2A6底物体系 |
3.1.6 肝微粒体孵育CYP2D6、2C23a、2C45、2E1底物体系 |
3.1.7 SAL和ENR主要代谢酶的确认 |
3.1.8 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶活性的影响 |
3.1.9 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶活性抑制类型 |
3.1.10 SAL和ENR体外联合给药对代谢的影响 |
3.2 SAL与ENR在鸡体内的相互作用 |
3.2.1 鸡血浆中ENR检测方法 |
3.2.2 鸡血浆中SAL检测方法 |
3.2.3 SAL对ENR药动学影响 |
3.2.4 ENR对SAL药动学影响 |
3.3 相互作用机制的研究 |
3.3.1 联合使用后对代谢酶mRNA的影响 |
3.3.2 代谢酶相关基因表达量的影响 |
3.3.3 联合使用后对代谢酶表达量的影响 |
4 讨论 |
4.1 肝微粒体制备 |
4.2 孵育检测方法的优化 |
4.2.1 探针药物的选择 |
4.2.2 探针药物检测方法的选择 |
4.2.3 探针药物孵育方法的优化 |
4.3 聚醚类抗生素和ENR对代谢酶体外活性的影响 |
4.4 SAL与ENR的药动学 |
4.4.1 血浆样品检测方法的优化 |
4.4.2 血浆前处理方法的优化 |
4.4.3 给药剂量的选择 |
4.4.4 药动学结果比较分析 |
4.5 代谢酶mRNA及蛋白表达的影响 |
5 全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
附录 |
附录Ⅰ-研究生简介 |
附录Ⅱ-相关数据和图表 |
(2)帕托珠利溶液在鸡体内的生物利用度及其与妥曲珠利溶液的比较药动学(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
第1章 前言 |
1.鸡球虫病防治的研究进展 |
1.1 鸡球虫的生活史 |
1.2 鸡球虫的种类与特点 |
1.3 鸡球虫病的防治措施 |
1.4 当前抗鸡球虫药耐药性问题 |
2.均三嗪类抗球虫药概述 |
2.1 均三嗪类药物的主要种类 |
2.2 均三嗪类药物的理化性质 |
2.3 均三嗪类药物的作用机理 |
2.4 均三嗪类药物的药动学研究 |
2.5 均三嗪类药物的药效学研究 |
2.6 均三嗪类药物的残留消除研究 |
2.7 均三嗪类药物的安全毒理学研究 |
3.本研究的目的与意义 |
第2章 鸡血浆中帕托珠利和妥曲珠利含量的HPLC检测方法 |
1.材料 |
1.1 仪器及设备 |
1.2 对照品 |
1.3 试剂 |
1.4 试液的配制 |
2.方法 |
2.1 鸡血浆中帕托珠利含量的HPLC检测方法 |
2.2 鸡血浆中妥曲珠利含量的HPLC检测方法 |
3.结果 |
3.1 帕托珠利的色谱行为 |
3.2 妥曲珠利的色谱行为 |
3.3 检测限与定量限 |
3.4 标准曲线与线性范围 |
3.5 回收率 |
3.6 精密度 |
3.7 帕托珠利和妥曲珠利的稳定性 |
4.讨论 |
4.1 帕托珠利 |
4.2 妥曲珠利 |
5.小结 |
第3章 帕托珠利溶液在鸡体内的药动学和生物利用度研究 |
1.材料 |
1.1 仪器及设备 |
1.2 试液的配制 |
1.3 受试药品 |
2.方法 |
2.1 试验动物 |
2.2 试验设计与给药方案 |
2.3 血样采集与保存 |
2.4 给药后血浆样品中帕托珠利浓度的测定 |
2.5 数据分析与处理 |
2.6 绝对生物利用度的计算 |
3.结果 |
3.1 采血时间 |
3.2 临床观察与剔除动物 |
3.3 给药后鸡血浆中帕托珠利色谱图 |
3.4 血药浓度与药动学特征 |
4.讨论 |
4.1 鸡单剂量静注帕托珠利溶液后的药动学特征 |
4.2 鸡单剂量口服帕托珠利溶液后的药动学特征 |
5.小结 |
第4章 帕托珠利溶液与妥曲珠利溶液口服给药的比较药动学研究 |
1.材料 |
1.1 仪器及设备 |
1.2 试液的配制 |
1.3 受试药品 |
2.方法 |
2.1 试验动物 |
2.2 试验设计与给药方案 |
2.3 血样采集与保存 |
2.4 给药后血浆样品中帕托珠利和妥曲珠利浓度的测定 |
2.5 数据分析与处理 |
3.结果 |
3.1 给药后鸡血浆中妥曲珠利色谱图 |
3.2 帕托珠利血药浓度与药动学特征 |
3.3 妥曲珠利血药浓度与药动学特征 |
4.讨论 |
4.1 鸡单剂量口服妥曲珠利溶液后的药动学特征 |
4.2 帕托珠利溶液和妥曲珠利溶液在鸡体内的的药动学特征比较 |
5.小结 |
全文结论 |
参考文献 |
攻读学位期间取得的研究结果 |
致谢 |
(3)基于基因组重测序筛选柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药的候选基因及耐药相关基因特性研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
主要符号对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 抗球虫药 |
1.1.1 聚醚离子载体类抗球虫药 |
1.1.2 化学合成类抗球虫药 |
1.2 鸡球虫耐药性产生的原因 |
1.2.1 遗传因素 |
1.2.2 药物选择压力 |
1.2.3 生物学因素 |
1.3 鸡球虫耐药性的研究现状 |
1.4 其他顶复门原虫耐药性的研究现状 |
1.5 全基因组重测序 |
1.6 选择性清除 |
1.7 展望 |
第二章 全基因组重测序筛选柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药相关基因 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 试验动物 |
2.2.2 实验虫株 |
2.2.3 试验药物 |
2.2.4 实验试剂 |
2.2.5 实验仪器 |
2.2.6 子孢子的收集与纯化 |
2.2.7 基因组重测序 |
2.2.8 选择性清除分析结果与转录组测序结果的关联分析 |
2.3 结果 |
2.3.1 虫体的收集与纯化 |
2.3.2 DNA的提取检测 |
2.3.3 质控结果 |
2.3.4 样品与参考基因组比对结果 |
2.3.5 基于Hp&Fst的选择消除分析结果 |
2.3.6 候选基因SNP位点的分布 |
2.3.7 基因功能富集分析 |
2.3.8 与转录组的关联分析结果 |
2.4 讨论 |
第三章 3 个耐药相关基因的克隆和生物信息学分析 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 实验动物和实验虫株 |
3.2.2 实验试剂 |
3.2.3 试验仪器 |
3.2.4 敏感株孢子化卵囊的收集与纯化 |
3.2.5 cDNA第一链模板的制备 |
3.2.6 基因克隆 |
3.2.7 生物信息学分析 |
3.3 结果 |
3.3.1 基因的克隆 |
3.3.2 生物信息学分析 |
3.4 讨论 |
第四章 3个耐药相关基因功能特性的初步分析 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 实验动物与细胞 |
4.2.2 实验虫株 |
4.2.3 实验试剂 |
4.2.4 实验仪器 |
4.2.5 实验虫株的收集与纯化 |
4.2.6 cDNA模板的制备 |
4.2.7 重组表达质粒的构建 |
4.2.8 重组蛋白的诱导表达 |
4.2.9 重组蛋白的纯化 |
4.2.10 重组蛋白的反应原性分析 |
4.2.11 多克隆抗体的制备 |
4.2.12 实时荧光定量PCR |
4.2.13 间接免疫荧光定位 |
4.2.14 体外抑制实验 |
4.3 结果 |
4.3.1 重组表达质粒的构建 |
4.3.2 重组蛋白的诱导表达 |
4.3.3 重组蛋白的纯化 |
4.3.4 重组蛋白的反应原性分析 |
4.3.5 3个基因在DS不同发育阶段的mRNA转录水平 |
4.3.6 三个蛋白在DS虫体上的定位分析 |
4.3.7 三个多克隆抗体对子孢子入侵DF-1细胞体外抑制实验 |
4.3.8 3个基因在不同耐药株和敏感株的转录水平分析 |
4.4 讨论 |
第五章 全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(4)临床柔嫩艾美耳球虫的抗药性分析和药物作用研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
主要符号对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 鸡球虫病背景 |
1.2 E.tenella概述 |
1.2.1 发病原因 |
1.2.2 发病机理 |
1.2.3 鉴定方法的研究 |
1.3 抗球虫药物概述 |
1.3.1 抗球虫药物的简介 |
1.3.2 抗球虫药物的耐药进展 |
1.4 球虫病的防治 |
1.4.1 天然药物 |
1.4.2 延缓药物代谢 |
1.5 本研究的目的意义 |
第二章 E.tenella的分离与鉴定 |
2.1 材料 |
2.1.1 试验仪器与试剂 |
2.1.2 试验虫株 |
2.1.3 试验动物的选用 |
2.1.4 荧光定量PCR引物 |
2.2 方法 |
2.2.1 E.tenella的单卵囊分离与采集 |
2.2.2 E.tenella的扩增 |
2.2.3 E.tenella分离株的鉴定 |
2.3 结果 |
2.3.1 分离株的鉴定结果 |
2.4 讨论 |
2.5 本章小结 |
第三章 田间混合株和柔嫩分离株对常用抗球虫药的耐药性检测 |
3.1 材料 |
3.1.1 试验仪器与试剂 |
3.1.2 试验虫株 |
3.1.3 试验动物的选用 |
3.1.4 试验药物 |
3.2 方法 |
3.2.1 田间混合株和柔嫩分离株的耐药性检测 |
3.2.2 耐药性的评判 |
3.3 结果 |
3.3.1 田间混合株的抗性分析 |
3.3.2 田间混合XYP株中三株分离株的抗性分析 |
3.3.3 田间混合HZD株中三株分离株的抗性分析 |
3.4 讨论 |
3.5 本章小结 |
第四章 药物联合应用对柔嫩XYP1分离株的防治效果试验 |
4.1 材料 |
4.1.1 试验仪器与试剂 |
4.1.2 试验虫株 |
4.1.3 试验动物的选用 |
4.1.4 试验药物 |
4.2 方法 |
4.2.1 不同复方的剂量水平 |
4.2.2 E.tenella的联合用药试验与药效评判方法 |
4.3 结果 |
4.3.1 柔嫩分离株XYP1对癸氧喹酯与莫能菌素联合应用的结果 |
4.3.2 柔嫩分离株XYP1对尼卡巴嗪与甲基盐霉素联合应用的结果 |
4.4 讨论 |
4.5 本章小结 |
第五章 田间混合株和柔嫩分离株耐药应对方法的试验 |
5.1 材料 |
5.1.1 试验仪器与试剂 |
5.1.2 试验虫株 |
5.1.3 试验动物的选用 |
5.1.4 试验药物 |
5.2 方法 |
5.2.1 柔嫩分离株的耐药消除 |
5.2.2 田间混合株的耐药消除和评判方法 |
5.2.3 不同复方的剂量水平 |
5.3 结果 |
5.3.1 XYP1分离株的耐药消除 |
5.3.2 XYP2分离株的耐药消除 |
5.3.3 XYP混合株的耐药消除 |
5.4 讨论 |
5.5 本章小结 |
第六章 结论 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(5)两种抗球虫药对鸡盲肠与土壤中菌群影响的研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
主要符号对照表 |
第一章 绪论 |
1.1 球虫病及抗球虫药 |
1.2 微生物的组成及作用 |
1.2.1 肠道微生物 |
1.2.2 堆肥粪便中微生物的组成及作用 |
1.2.3 土壤中微生物的组成及其作用 |
1.3 微生物群落研究方法 |
1.3.1 平板培养法 |
1.3.2 传统分子生物学手段 |
1.3.3 高通量测序手段 |
1.3.4 Biolog微孔板法 |
1.4 代谢组学及其检测手段 |
1.4.1 代谢组学概述 |
1.4.2 代谢组学检测手段 |
1.4.3 代谢组学的应用 |
1.5 研究目的及内容 |
第二章 沙咪珠利和盐霉素对鸡盲肠内容物微生物影响的研究 |
2.1 材料 |
2.1.1 仪器 |
2.1.2 试剂与材料 |
2.1.3 试验动物与虫株 |
2.2 方法 |
2.2.1 试验分组 |
2.2.2 攻虫给药 |
2.2.3 样品采集 |
2.2.4 盲肠组织病理切片的制作 |
2.2.5 样品高通量测序 |
2.2.6 信息分析 |
2.3 结果 |
2.3.1 OTU聚类分析 |
2.3.2 样本在各水平的物种相对丰度 |
2.3.3 物种丰度聚类热图 |
2.3.4 Alpha多样性分析 |
2.3.5 Beta多样性分析 |
2.3.6 差异物种分析 |
2.3.7 功能预测 |
2.3.8 鸡盲肠组织病理切片观察 |
2.4 讨论 |
2.5 本章小结 |
第三章 沙咪珠利和盐霉素对鸡盲肠内容物代谢组学的影响 |
3.1 材料 |
3.1.1 仪器设备 |
3.1.2 试剂 |
3.2 试验内容 |
3.2.1 样品采集 |
3.2.2 非靶向代谢组学检测 |
3.2.3 数据处理 |
3.3 试验结果 |
3.3.1 色谱图 |
3.3.2 主成分分析 |
3.3.3 正交偏最小二乘法-判别分析 |
3.3.4 差异代谢物的筛选和火山图 |
3.3.5 差异代谢物的代谢通路分析 |
3.4 讨论 |
3.5 本章小结 |
第四章 沙咪珠利和盐霉素对鸡粪堆肥前期微生物影响的研究 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 试验动物与药物 |
4.1.2 材料与仪器 |
4.1.3 试验方法 |
4.1.4 样品DNA的提取,16S rRNA扩增及测序 |
4.1.5 生物信息学分析 |
4.2 结果 |
4.2.1 粪便样品的基本性质 |
4.2.2 不同处理组样品细菌优势类群和相对丰度 |
4.2.3 Alpha多样性分析 |
4.2.4 不同处理组鸡粪中的特殊群落及其影响力 |
4.2.5 不同处理组鸡粪的系统发生进化关系 |
4.3 讨论 |
4.4 本章小结 |
第五章 沙咪珠利和盐霉素对土壤微生物群落多样性的影响 |
5.1 试验部分 |
5.1.1 材料和试剂 |
5.1.2 仪器和设备 |
5.1.3 试验方法 |
5.1.4 Biolog-ECO监测指标 |
5.1.5 微生物对不同类型碳源的利用程度 |
5.1.6 土壤微生物群落对碳源利用程度主成分分析 |
5.1.7 数据统计 |
5.2 试验结果 |
5.2.1 沙咪珠利和盐霉素分别对土壤微生物整体活性的影响 |
5.2.2 沙咪珠利和盐霉素分别对土壤微生物对碳源利用率的影响 |
5.2.3 沙咪珠利和盐霉素对土壤微生物多样性指数的影响 |
5.2.4 主成分分析 |
5.3 讨论 |
5.4 本章小结 |
第六章 总结 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
作者简历 |
(6)如东县鸡球虫种类调查及柔嫩艾美耳球虫的耐药性检测(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
文献综述:鸡球虫病的病原学及其防治研究进展 |
1 鸡球虫病的病原学 |
1.1 鸡球虫病的病原种类 |
1.2 鸡球虫种类的鉴定方法 |
1.3 鸡球虫种类的鉴别特征 |
1.4 鸡球虫病的流行特点 |
2 鸡球虫病的药物防治 |
2.1 抗球虫药种类 |
2.2 抗球虫药的合理使用 |
2.3 抗球虫药的耐药性检测 |
3 本研究的目的与意义 |
参考文献 |
第一章 如东县小型鸡场鸡球虫感染情况与种类的调查 |
1 材料与方法 |
1.1 鸡球虫卵囊基因组DNA与实验动物 |
1.2 主要仪器与试剂 |
1.3 粪样采集 |
1.4 粪检卵囊 |
1.5 卵囊分离与培养 |
1.6 鸡球虫种类鉴定 |
2 结果与分析 |
2.1 球虫感染情况 |
2.2 球虫种类鉴别特征 |
3 讨论 |
参考文献 |
第二章 柔嫩艾美耳球虫田间分离株的耐药性检测 |
1 材料与方法 |
1.1 试验动物 |
1.2 试验虫株 |
1.3 试验药物与给药途径 |
1.4 试验分组 |
1.5 感染剂量 |
1.6 临床观察 |
1.7 耐药性评价指标 |
1.8 耐药性判断标准 |
2 结果与分析 |
2.1 临床观察及血便情况 |
2.2 存活率 |
2.3 平均增重与最适抗球虫百分数 |
2.4 病变记分与病变记分减少率 |
2.5 卵囊产量与相对卵囊产量 |
2.6 抗球虫指数 |
2.7 耐药性判定结果 |
3 讨论 |
参考文献 |
全文结论 |
攻读学位期间发表的学术论文 |
致谢 |
(7)柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导及耐药相关基因特性的初步分析(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
第一章 绪论 |
1.1 耐药性的定义 |
1.2 耐药性的类型 |
1.2.1 交叉耐药性 |
1.2.2 多重耐药性 |
1.3 实验室耐药虫株的诱导 |
1.4 耐药性检测的方法 |
1.4.1 鸡体检测法 |
1.4.2 同工酶分析法 |
1.4.3 超微结构的比较法 |
1.4.4 PCR技术测定法 |
1.5 抗球虫药物作用机理及其耐药性 |
1.5.1 离子载体类抗生素及其耐药机理 |
1.5.2 磺胺类抗球虫药物的耐药性 |
1.5.3 喹啉类抗球虫药物耐药性 |
1.5.4 抗硫胺素类抗球虫药物耐药性 |
1.5.5 吡啶类抗球虫药物的耐药性 |
1.5.6 三嗪类抗球虫药物及其耐药性 |
1.6 控制鸡球虫耐药性产生的策略 |
1.6.1 控制球虫的传播 |
1.6.2 合理的用药方案 |
1.6.3 综合治疗 |
1.6.4 定期检测耐药性 |
1.7 展望 |
第二章 柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的实验室诱导 |
2.1 引言 |
2.2 材料与方法 |
2.2.1 实验动物 |
2.2.2 试验虫株 |
2.2.3 实验试剂 |
2.2.4 实验仪器 |
2.2.5 试验药物 |
2.2.6 柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的实验室诱导 |
2.2.7 透射电子显微镜观察盐霉素耐药株与敏感株子孢子和第二代裂殖子的超微结构 |
2.3 结果 |
2.3.1 柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导 |
2.3.2 诱导虫株的耐药性检测 |
2.3.3 透射电子显微镜观察敏感株与耐药株的超微结构 |
2.4 讨论 |
第三章 柔嫩艾美耳球虫敏感株与盐霉素耐药株差异基因的筛选与验证 |
3.1 引言 |
3.2 材料与方法 |
3.2.1 实验动物 |
3.2.2 实验虫株 |
3.2.3 实验药物 |
3.2.4 实验试剂 |
3.2.5 实验仪器 |
3.2.6 敏感株与盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子的收集与纯化 |
3.2.7 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子转录组测序 |
3.2.8 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子差异表达基因的验证 |
3.3 结果 |
3.3.1 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子总RNA的提取 |
3.3.2 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子测序数据生物信息分析 |
3.3.3 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子差异基因的筛选 |
3.3.4 敏感株和盐霉素耐药株子孢子和第二代裂殖子差异基因的验证 |
3.4 讨论 |
第四章 现场鸡球虫感染现状和耐药程度调查及盐霉素田间耐药株的分离 |
4.1 引言 |
4.2 材料与方法 |
4.2.1 实验动物 |
4.2.2 试验药物 |
4.2.3 实验试剂 |
4.2.4 实验仪器 |
4.2.5 田间株粪便样品的收集及繁殖 |
4.2.6 形态学鉴定田间株球虫种类 |
4.2.7 多重PCR鉴定球虫种类 |
4.2.8 药敏试验验证田间株耐药性 |
4.2.9 抗盐霉素田间株单卵囊的分离 |
4.2.10 qPCR分析差异表达基因在田间分离株的转录水平 |
4.3 结果 |
4.3.1 形态学鉴定田间株球虫种类 |
4.3.2 多重PCR鉴定球虫种类 |
4.3.3 药敏试验验证田间株耐药性 |
4.3.4 单卵囊分离田间盐霉素耐药株 |
4.3.5 差异表达基因在单卵囊分离株和田间混合种转录水平的分析 |
4.4 讨论 |
第五章 3个耐药相关基因功能特性初步研究 |
5.1 引言 |
5.2 材料与方法 |
5.2.1 实验动物 |
5.2.2 实验虫株、原核表达载体及细胞 |
5.2.3 实验试剂 |
5.2.4 实验仪器 |
5.2.5 敏感株孢子化卵囊的收集与纯化 |
5.2.6 敏感株孢子化卵囊总RNA的提取与c DNA的合成 |
5.2.7 耐药基因的扩增 |
5.2.8 基因的生物信息学分析 |
5.2.9 重组表达质粒的构建 |
5.2.10 重组蛋白的诱导表达与纯化 |
5.2.11 重组蛋白反应原性分析 |
5.2.12 抗重组蛋白多克隆抗体的制备 |
5.2.13 耐药基因在不同发育阶段和不同耐药株的转录水平分析 |
5.2.14 耐药基因在不同发育阶段和不同耐药株的翻译水平分析 |
5.2.15 耐药相关蛋白在子孢子入侵DF-1细胞后的定位 |
5.2.16 田间盐霉素耐药株和地克珠利耐药株对耐药基因进行验证 |
5.2.17 多克隆抗体对子孢子入侵DF-1细胞体外抑制实验 |
5.2.18 柠檬酸合酶对体外培养鸡巨噬细胞功能的影响 |
5.3 结果 |
5.3.1 敏感株孢子化卵囊的总RNA提取 |
5.3.2 耐药基因的克隆 |
5.3.3 基因的生物信息学分析 |
5.3.4 重组表达质粒的构建 |
5.3.5 重组蛋白的表达与纯化 |
5.3.6 重组蛋白的反应原性分析 |
5.3.7 三个基因在不同发育阶段的转录水平及翻译水平分析 |
5.3.8 三个基因在不同耐药株中的转录和翻译水平分析 |
5.3.9 三个基因在田间分离株的mRNA转录水平分析 |
5.3.10 三个蛋白在子孢子入侵DF-1细胞后的定位分析 |
5.3.11 多克隆抗体对子孢子入侵DF-1细胞体外抑制实验 |
5.3.12 柠檬酸合酶对体外培养鸡巨噬细胞功能的影响 |
5.3.13 r Et CS对一氧化氮(NO)生成量的测定 |
5.4 讨论 |
第六章 全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
(8)临沂地区兔球虫病流行病学调查及药物防治的效果观察(论文提纲范文)
致谢 |
摘要 |
Abstract |
英文缩写和符号清单 |
文献综述 |
1.1 兔球虫病基础研究 |
1.1.1 兔的主要饲养品种及养殖区域 |
1.1.2 我国兔球虫相关研究记载 |
1.1.3 兔球虫的病原种类研究 |
1.2 兔球虫病的概括 |
1.2.1 兔球虫的流行病学特点 |
1.2.2 临床症状及解剖特点 |
1.2.3 诊断要点 |
1.2.4 生产中球虫难控制的主要原因 |
1.3 兔抗球虫免疫研究 |
1.3.1 兔球虫病的免疫原性相关研究 |
1.3.2 兔抗球虫免疫应答机制 |
1.4 兔球虫防治 |
1.4.1 兔球虫常用药物 |
1.4.2 兔球虫疫苗的研发 |
1.5 本研究的目的及意义 |
1 引言 |
2 临沂地区兔球虫的流行病学调查 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料 |
2.1.2 方法 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 调查兔场兔球虫的流行病史 |
2.2.2 兔球虫的感染情况 |
2.2.3 兔球虫的感染率强度(OPG) |
2.2.4 兔球虫形态学鉴定结果 |
2.3 讨论 |
3 临沂地区兔球虫药物防治试验的疗效观察 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 .试验动物 |
3.1.2 试验药品 |
3.1.3 试验方法 |
3.1.4 指标的测定 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 粪便球虫卵囊检测情况 |
3.2.2 死亡统计 |
3.2.3 腹泻情况统计 |
3.2.4 生长性能统计 |
3.2.5 分析 |
3.3 讨论 |
3.3.1 球虫药物的分类 |
3.3.2 合理搭配轮换用药 |
3.3.3 三种球虫药物的相关效果研究 |
3.3.4 兔球虫病的防控建议 |
4 结论 |
参考文献 |
作者简介 |
(9)堆型艾美耳球虫配子体蛋白EaGAM56与EaGAM82的原核表达及其免疫保护作用研究(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
缩略词表 |
文献综述 鸡球虫病防治研究进展 |
1 鸡球虫的生物学特征 |
2 鸡球虫病的诊断与防治 |
3 鸡球虫病的免疫预防 |
4 本研究的目的与意义 |
第一章 堆型艾美耳球虫配子体蛋白gam56基因的克隆与表达及其免疫原性分析 |
1 材料与方法 |
2 结果 |
3 讨论 |
第二章 堆型艾美耳球虫配子体蛋白gam82基因的克隆与表达及其免疫原性分析 |
1 材料与方法 |
2 结果 |
3 讨论 |
第三章 重组蛋白rEaGAM56和rEaGAM82及其联合免疫对堆型艾美耳球虫的免疫保护力 |
1 材料与方法 |
2 结果 |
3 讨论 |
参考文献 |
全文结论 |
攻读学位期间发表的学术论文 |
致谢 |
(10)帕托珠利混悬液在仔猪的药动学及生物利用度研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
第1章 前言 |
1. 三嗪类抗球虫药研究进展 |
1.1 地克珠利 |
1.2 妥曲珠利 |
1.3 纳川珠利与沙咪珠利 |
2 帕托珠利研究进展 |
2.1 理化性质 |
2.2 帕托珠利的药理学特性 |
2.3 帕托珠利的临床应用 |
2.4 三嗪类抗球虫药耐药性研究进展 |
3 本研究的目的和意义 |
第2章 猪血浆中帕托珠利含量的HPLC检测 |
1 材料 |
1.1 仪器与设备 |
1.2 标准品与试剂 |
1.3 试液的配置 |
2 方法 |
2.1 猪血浆样品预处理 |
2.2 色谱条件 |
2.3 血浆中帕托珠利含量的定量测定 |
2.4 检测限与定量限 |
2.5 标准曲线的绘制 |
3 方法学验证 |
3.1 系统适用性 |
3.2 系统残留 |
3.3 选择性 |
3.4 精密度与准确度 |
3.5 回收率 |
3.6 稳定性 |
4 结果 |
4.1 色谱行为 |
4.2 检测限与定量限 |
4.3 标准曲线与线性范围 |
4.4 系统残留 |
4.5 准确度与精密度 |
4.6 回收率 |
4.7 稳定性 |
5 讨论 |
5.1 提取条件的优化 |
5.2 色谱条件的优化 |
5.3 线性范围 |
6 小结 |
第3章 帕托珠利混悬液在猪体内的药动学和生物利用度研究 |
1. 材料 |
1.1 仪器与设备 |
1.2 试剂与试液 |
1.3 药品 |
1.4 饲料 |
1.5 试验动物入选 |
2 方法 |
2.1 试验设计与给药方案 |
2.2 血样采集与保存 |
2.3 血浆样品中帕托珠利含量的测定 |
2.4 数据分析 |
2.5 绝对生物利用度的计算 |
3 结果 |
3.1 采血时间 |
3.2 临床观察与剔除动物 |
3.3 给药后猪血浆中帕托珠利色谱图 |
3.4 血药浓度与药动学特征 |
4 讨论 |
4.1 猪单剂量静注帕托珠利注射剂后的药动学特征 |
4.2 猪单剂量口服帕托珠利混悬液后的药动学特征 |
5 小结 |
结语 |
参考文献 |
在学期间发表的学术论文 |
致谢 |
四、禽、兔的抗球虫药得合理使用(论文参考文献)
- [1]聚醚类抗生素与恩诺沙星在鸡上基于CYP酶的相互作用研究[D]. 杨玉娟. 华中农业大学, 2021(02)
- [2]帕托珠利溶液在鸡体内的生物利用度及其与妥曲珠利溶液的比较药动学[D]. 张小龙. 扬州大学, 2021(02)
- [3]基于基因组重测序筛选柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药的候选基因及耐药相关基因特性研究[D]. 姚亚文. 中国农业科学院, 2021
- [4]临床柔嫩艾美耳球虫的抗药性分析和药物作用研究[D]. 郭双双. 中国农业科学院, 2021(09)
- [5]两种抗球虫药对鸡盲肠与土壤中菌群影响的研究[D]. 程晓蕾. 中国农业科学院, 2021(09)
- [6]如东县鸡球虫种类调查及柔嫩艾美耳球虫的耐药性检测[D]. 吴文君. 扬州大学, 2020(04)
- [7]柔嫩艾美耳球虫盐霉素耐药株的诱导及耐药相关基因特性的初步分析[D]. 王海霞. 中国农业科学院, 2020
- [8]临沂地区兔球虫病流行病学调查及药物防治的效果观察[D]. 王青虎. 安徽农业大学, 2020(04)
- [9]堆型艾美耳球虫配子体蛋白EaGAM56与EaGAM82的原核表达及其免疫保护作用研究[D]. 华恩玉. 扬州大学, 2020
- [10]帕托珠利混悬液在仔猪的药动学及生物利用度研究[D]. 沈佳晨. 扬州大学, 2020(04)