一、传染性喉气管炎的发生及防治中存在的问题（论文文献综述）
吴咪[1]（2021）在《鸡传染性喉气管炎病毒流行株生物学特征及影响其复制相关宿主蛋白作用机制的研究》文中研究指明鸡传染性喉气管炎病毒（Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV）属疱疹病毒科α疱疹病毒亚科,可引起鸡的传染性喉气管炎。早在1925年美国首次报道鸡传染性喉气管炎以来,在上世纪六十年代我国也发现了该病,相继在我国各省均有发生,该病是目前危害养禽业的重要疫病之一。国内外主要使用弱毒疫苗预防该病,但因疫苗株毒力普遍偏强,因此存在潜伏感染的危害以及无法鉴别疫苗株与野毒株的缺点。目前对ILTV基础研究较少,制约了鸡传染性喉气管炎防控技术的发展。本研究针对影响ILTV复制的关键宿主蛋白为切入点,首次鉴定到信号肽酶复合物亚基3（SPCS3）是影响ILTV在细胞中复制的关键宿主蛋白之一,发现SPCS3蛋白可以切割ILTV的gL蛋白。本研究内容及主要试验结果如下:1.分别对三株ILTV:SH2016、SH2017、GD2018的生长特性及致病性进行研究。三株ILTV均可在鸡肝癌细胞（LMH）增殖,感染ILTV后120h,SH2016滴度可达到103.08TCID50,SH2017和GD2018分别可达到103.42TCID50和105.08TCID50,其中GD2018较其它两株更适应LMH细胞生长;经绒毛尿囊膜方式接种9～11日龄SPF鸡胚,接种后168h,收取尿囊膜,SH2016滴度可达到103.25TCID50,SH2017和GD2018分别可达到102.67TCID50和104.33TCID50,GD2018更适应在尿囊膜上生长;收取尿囊液,SH2016滴度可达102.67TCID50,SH2017和GD2018分别可达到100.33TCID50和100.5TCID50,SH2017和GD2018不生长,SH2016可以在尿囊腔中复制。以尿囊腔方式接种9～11日龄SPF鸡胚,接种后168h,收取尿囊膜,SH2016滴度可达103.25TCID50,SH2017和GD2018分别可达到102.58TCID50和101.83TCID50;收取尿囊液,SH2016滴度可达104.58TCID50,SH2017和GD2018分别可达到101.25TCID50和100.67TCID50,即SH2017和GD2018几乎不生长,而SH2016更适应在尿囊腔中增殖。此外,分别用三株ILTV感染8周龄SPF鸡,SH2016临床症状最明显,是唯一引起鸡死亡的毒株,且三株ILTV只能在鸡喉气管组织中复制,其他脏器并未检测到;GD2018在攻毒后第14d,抗体效价最高,SH2016在攻毒后第21d抗体效价最高。2.分别对三株ILTV基因组进行高通量测序,拼接出全基因组序列,根据基因组结构,预测各蛋白序列。三株ILTV基因组长度分别为:SH2016为153.805kb、SH2017为153.024kb、GD2018为153.855kb;GC含量分别为:SH2016为48.16%、SH2017为48.06%、GD2018为48.10%。三株ILTV基因组结构均由UL、US、IRs及TRs四个区域组成。对病毒基因组核酸序列及10个编码蛋白氨基酸序列进行系统进化分析,基因组DNA进化树上,SH2016与俄罗斯分离株Rus/Ck/Tatarstan/1009/1643株亲缘关系最近,而与SH2017、GD2018关系较远;SH2017与美国分离株LT Blen亲缘关系最近;GD2018与俄罗斯分离株Rus/Ck/Penza/2013/2701及意大利分离株4784/80亲缘关系较近。g C及gL蛋白进化树中,三株ILTV在同一分支,该蛋白具有较高的保守性;gD、gE及gG蛋白进化树中,SH2016与GD2018在同一分支,同源性较高,而与SH2017同源性较低;gB、gH、gM、gI及TK蛋白进化树中,SH2017与GD2018同源性较高,而与SH2016同源性较低。对三株ILTV病毒10个蛋白氨基酸突变位点进行比较,发现除三株ILTV的gC蛋白序列完全一致外,其它9个病毒蛋白都有不同程度的氨基酸位点差异,这些蛋白差异疑与三株ILTV复制能力及致病性的差异相关。3.构建鸡全基因组CRISPR/Cas9敲除文库,对LMH细胞全基因组范围进行逐一扫描式敲除,构建基因敲除细胞文库,然后用ILTV感染细胞文库,对存活的细胞进行高通量测序,确定存活细胞中敲除的宿主基因。第一次测序结果发现3个非编码RNA（ncRNA）基因和SPCS3（信号肽酶复合物亚基-3）基因可能与病毒复制相关,随后的三次重复实验结果均显示,SPCS3基因是存活细胞中敲除率最高的基因,因此推测宿主蛋白SPCS3可能是影响ILTV复制的关键蛋白之一。4.比较ILTV在LMH细胞和SPCS3蛋白截短的LMH细胞系（分别命名为1-6和1-14）中的生长,在1-6细胞系中,ILTV的病毒滴度降低102.625倍,在1-14细胞系中,ILTV的病毒滴度降低103.75倍,表明SPCS3蛋白截短确实可以对ILTV的复制起到抑制作用。通过在线生物软件对ILTV中具有信号肽及多个跨膜结构的病毒蛋白进行预测,成功构建9个含有单一信号肽的病毒蛋白及4个含有多个跨膜结构的病毒蛋白真核表达质粒,转染细胞后,其中8个病毒蛋白成功表达,比较各病毒蛋白在LMH细胞及1-14细胞系中表达差异,结果显示,ILTV的衣壳糖蛋白L（gL）蛋白在两种细胞中的蛋白分子量差异明显,表明SPCS3蛋白截短影响了其切割gL蛋白的功能,这可能是影响ILTV复制的主要原因。5.为了解SPCS3蛋白截短对其它α疱疹病毒的影响,分别将鸭肠炎病毒（DEV）和人单纯疱疹病毒1型（HSV-1）两种α疱疹病毒感染LMH细胞和1-14细胞系,比较其生长差异。结果显示,与在LMH细胞上相比,DEV在1-14细胞系中病毒滴度降低102倍,而HSV-1在两种细胞上的生长无差异。进一步构建DEV和HSV-1两种病毒的gL蛋白真核表达质粒,分别转染LMH细胞和1-14细胞系后,两种病毒的gL蛋白在LMH细胞与1-14细胞系中,分子量大小无明显变化,但是DEV的gL蛋白在1-14细胞系中表达量明显低于LMH中的表达量,而HSV-1的gL蛋白在1-14细胞系种表达量没有明显变化,进一步表明截短的SPCS3可能影响gL蛋白的稳定性,从而影响DEV复制。本研究丰富了我国ILTV毒株全基因组序列生物学信息,明确了三株ILTV流行株的生物学特性。通过CRISPR/Cas9高通量筛选技术,筛选到一种与禽疱疹病毒复制相关的宿主蛋白分子,完善了ILTV复制中发挥关键作用的宿主蛋白作用机制,为ILTV致病分子机制研究尝试了新的思路。
王李辉,刘洋洲,张扬[2]（2020）在《鸡传染性喉气管炎的防治分析》文中认为传染性喉气管炎常发于禽类养殖过程,是鸡的一种传染性病毒性疾病。本文介绍鸡传染性喉气管炎的特点,给出具体防治措施,供相关人员借鉴参考。1鸡传染性喉气管炎的流行特点鸡传染性喉气管炎病毒为疱疹病毒,其环境适应能力非常低,一般在55℃环境中处理15min
杜娟[3]（2019）在《畜禽养殖业排泄物的污染及防治对策》文中进行了进一步梳理重视畜禽排泄物污染问题是实现畜牧业可持续发展的前提,为防止畜禽粪尿污染,保护环境,构建和谐生态,通过我国畜禽排泄物污染的现状,分析造成环境污染的原因及其危害,探究如何防治污染的有效对策。
高晓磊,韩明宝,刘思桐,赵丽霞,朱秀同,刘浩,郁宏伟,谢康[4]（2019）在《1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究》文中研究指明将鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同免疫途径免疫1日龄雏鸡,评价其安全性和效力。以10羽份/只剂量接种后,两组鸡均未观察到全身反应。以1羽份/只剂量接种后28d攻毒,两种免疫方式均可以使免疫鸡产生较强免疫力,能够抵抗传染性喉气管炎病毒（ILTV）WG株强毒和鸡痘病毒（FPV）102株的攻击。以上结果显示,鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗以皮下注射和皮下刺种2种不同途径免疫1日龄雏鸡,具有良好的安全性和有效性。
周海宁,李知新,张成莲,艾文,杨佳冰,赵燕,田进梅,闫小芹,张和平[5]（2015）在《宁夏规模蛋鸡场4种鸡病血清学调查》文中进行了进一步梳理为调查宁夏鸡传染性支气管炎、鸡传染性法氏囊、鸡产蛋下降综合征和鸡传染性喉气管炎4种鸡病流行情况,采集全区15个规模养鸡场450份血清,采用ELISA方法对这4种鸡病进行抗体水平检测。结果表明,鸡传染性支气管炎、鸡传染性法氏囊和鸡产蛋下降综合征总体抗体阳性率较高（81.1%91.3%）,可有效保护鸡群感染;鸡传染性喉气管炎抗体阳性率05.3%,说明宁夏部分养鸡场存在鸡传染性喉气管炎感染。本次调查,证实宁夏地区大部分鸡场重视鸡传染性支气管炎、鸡传染性法氏囊病和鸡产蛋下降综合征3种疫病疫苗免疫工作,且使用的疫苗有效,能产生较高的抗体水平。建议中小规模养殖猪场结合自身实际,加强饲养管理和消毒工作,进一步制定合理的免疫程序。鸡传染性喉气管炎阳性场户要制定合理的净化方案,建立健康稳定的免疫鸡群。此次调查,为宁夏地区鸡病综合防治提供科学依据。
陈星昊,雷正洲,蒋立锋[6]（2015）在《中草药免疫增强剂在鸡病防治中的应用》文中研究说明近年来,随着社会经济水平的不断提高,很大程度上推进了养鸡业的发展,并且加大了市场需求量。但是在养殖过程中,部分地区缺乏现代化养殖的思想意识,进而忽略了鸡病的防治,导致鸡养殖成活率逐渐降低。当前,中草药免疫增强剂作为鸡病防治的重要药物,在降低疾病发生频率,提高养殖成活率等方面发挥着重要作用。本文就中草药免疫增强剂在鸡病防治中的作用进行探究和分析。
朱士江[7]（2012）在《用于治疗鸡传染性喉气管炎的中药口服液的研制》文中研究表明鸡传染性喉气管炎（Avian Infectious Laryngotracheitis，ILT）是由鸡传染性喉气管炎病毒（AvianInfectious Laryngotracheitis virus，ILTV）引起的主要侵害鸡呼吸系统的一种急性、高度接触性传染病，可引起死亡和产蛋下降而造成严重的经济损失。本病疫情遍及世界各地，并呈地方性流行，在我国是仅次于鸡新城疫（ND）、鸡传染性法氏囊病（IBD）、鸡传染性支气管炎（IB）和马立克氏病（MD）的危害养禽业的禽类传染病。对于本病的治疗，目前尚无化学特效药。部分中药组方，如喉炎净散、喉瘟散和鸡喉净等，对本病有较好的疗效，但多以散剂形式拌料添加，使用极不方便，且消化利用率低。为此，我们将现有临床应用的中药组方，进一步研制得到喉炎宁口服液，并按照新兽药研制要求对本品的生产工艺、药学与质量标准和临床疗效进行了系统的试验研究。采用TD微型提取浓缩机组对本品水提工艺进行正交试验，以加水量、提取时间、提取次数为考察因素，以干膏得率和甘草酸含量为评价指标，确定本品的水提条件为：每次加10倍量水，煎煮2次，时间分别为2.0和1.0小时。采用薄层鉴别试验方法，分别以绿原酸和甘草次酸标准品为阳性对照，以缺金银花和缺甘草的喉炎宁口服液为阴性对照，研究得到本品绿原酸和甘草次酸的薄层鉴别方法，为本品金银花和甘草的质量控制提供了有效定性方法。采用高效液相色谱法，以甘草酸单铵盐标准品和绿原酸标准品为对照，对本品甘草酸和绿原酸的含量测定方法进行方法学考察，研究证实该方法系统适用性好，阴性对照无干扰，线性关系试验、精密度试验、加样回收率试验、重复性试验和稳定性试验都符合方法学考察要求。以人工感染ILTV的依莎褐商品代蛋公鸡为试验动物，以喉炎净散为药物对照，对喉炎宁口服液进行了临床疗效研究。将非免疫1日龄依莎褐商品代蛋公鸡250只，常规饲养至60日龄，选取240只，随机分为6组：健康对照组、模型组、阳性药物对照组及喉炎宁高、中、低剂量组。除健康对照组外其余5组接种鸡传染性喉气管炎病毒。药物治疗组于攻毒36h后分别以每日每只雏鸡0.1g喉炎净散拌料，以0.4%、0.2%、0.1%喉炎宁口服液饮水。统计死亡率以及药物对雏鸡的有效率和治愈率。结果表明，喉炎宁口服液对ILT的总有效率达90%95%，治愈率为85%92.5%，证实雏鸡群应用喉炎宁治疗ILT效果显着，饮服本药的最佳治疗剂量为0.2%。通过本研究确立了喉炎宁口服液的生产工艺与制法要求，建立了本品绿原酸、甘草次酸的薄层鉴别方法，以及绿原酸和甘草酸的HPLC含量测定方法标准，并通过临床试验证实本品对表现温热咳嗽的ILT疗效显着。
邵攀峰[8]（2010）在《鸡传染性喉气管炎病毒gB基因重组DNA疫苗的构建与鸡IL-18联合免疫试验》文中进行了进一步梳理鸡传染性喉气管炎（ILT）是由鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起鸡的一种急性、高度接触性上呼吸道传染病,呈全球性流行,是危害养禽业的重要疫病之一。目前国内外防制本病普遍采用弱毒疫苗。这些疫苗的毒力普遍偏强,可以在鸡体内潜伏感染,而且在鸡体传代过程中毒力返强。因此,研制更安全而有效的疫苗,将有利于彻底控制乃至根除ILT。自从1990年出现基因免疫以来,许多病毒的不同基因导入各种动物体内,产生了很好的免疫效果。DNA疫苗作为第3代疫苗,因其既有亚单位疫苗的安全性,又有减毒活疫苗的有效性而受到研究人员的瞩目。但是DNA疫苗诱导机体产生的抗体水平低,还不能完全有效抵抗致死剂量病原体的攻击。怎样增强免疫保护效果显得尤为紧迫。许多研究已经表明,细胞因子具有明显的免疫增强作用,包括IL-2、IFN-γ、IL-6、IL-18等。本研究根据已发表的ILTV SA2疫苗株gB基因序列（M64927）设计、合成了1对引物,以ILTV CG株基因组DNA为模板扩增gB基因,并进行克隆和测序。根据真核表达载体pcDNA3.1（+）和ILTV gB全基因核苷酸序列,设计、合成1对引物,PCR扩增ILTV gB全基因。将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切获得的gB基因片段克隆到经同样处理的真核表达载体pcDNA3.1（+）中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/gB。根据pGEM-ChIL-18设计1对引物,上、下游引物分别加入EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点,扩增IL-18全基因核苷酸序列,将该基因片段重组到真核表达载体pcDNA3.1（+）中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/IL-18。为测定构建的编码ILTV糖蛋白gB基因的重组DNA疫苗与鸡IL-18联合免疫的试验效果,将pcDNA3.1/gB、pcDNA3.1/IL-18分别或联合免疫21日龄SPF雏鸡,两周后加强免疫。首免后每周抽取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。二免疫后第3周用100ELD50 ILTV强毒进行攻击。结果显示,pcDNA3.1/gB和pcDNA3.1/gB与pcDNA3.1/IL-18联合免疫组均能诱导鸡产生特异性的体液免疫及细胞免疫应答,其中以pcDNA3.1/gB与pcDNA3.1/IL-18联合免疫组的T淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+明显高于单独pcDNA3.1/gB免疫组（P<0.01）,87%抵抗ILTV强毒的致死性攻击。本试验采用的真核双表达载体plRES,是双顺反子结构,具有两个多克隆位点。将鸡传染性喉气管炎病毒（ ILTV）的gB基因和鸡白介素18（ IL-18）基因分别或同时插入双顺反子质粒pIRES中,在启动子下游的MCS A的酶切位点Xho I与Mlu I之间插入鸡传染性喉气管炎病毒gB基因片段,在MCS B的酶切位点Sal I与Not I之间插入鸡白介素-18基因片段,获得表达ILTV gB基因的pIRES/gB质粒、表达鸡白介素-18基因的pIRES/ IL-18质粒及共表达质粒pIRES/gB/IL18。
李淑坚[9]（2009）在《中西药复方制剂治疗蛋鸡传染性喉气管炎的疗效观察》文中提出采用以麻黄、杏仁、金银花、连翘等、再加扑尔敏研末制成可溶性散剂——"清喉冲剂",对发病鸡群进行对比治疗试验。有效率和治愈率分别为98%和97%。
刘文波[10]（2005）在《表达ILTV gB及gD主要抗原表位基因和鸡IgY重链恒定区基因重组鸡痘病毒免疫效力的研究》文中研究说明传染性喉气管炎（Infectious laryngotractheitis，ILT）是由传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的鸡的一种急性上呼吸道传染病。该病分布于世界各地，被OIE列为B类传染病。上世纪60年代，我国也发现本病。此后，相继在许多省市流行，给我国养禽业造成了严重的经济损失。目前国内外主要使用弱毒疫苗预防本病，但它们都存在着疫苗株毒力偏强、潜伏感染、易于返祖以及疫苗株和野毒株无法鉴别的缺点，从而不利于ILT的根除。随着分子生物学的发展，利用基因工程疫苗预防ILT已成为人们的共识。禽痘病毒载体是继痘苗病毒以后发展起来的又一动物病毒载体。由于禽痘病毒具有宿主范围窄，可插入较大的外源基因，在动物体内能产生一过性感染，却能诱发保护性免疫应答，易于工业化生产等优点，使其从众多的活病毒载体中脱颖而出，成为当前重组病毒载体疫苗研究的热点，并且在人和许多动物重要传染病重组疫苗的研制中得到广泛应用。本研究利用鸡痘病毒弱毒疫苗株282 E4株为载体，构建了表达ILTV烟台株gB及gD主要抗原表位基因和鸡IgY重链恒定区基因的重组鸡痘病毒，并检测了其对鸡抵抗ILTV强毒株攻击的免疫保护作用。研究主要包括以下几个方面： 1．传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因的序列测定及TK蛋白结构功能初步分析 根据传染性喉气管炎病毒（ILTV）美国632株TK基因序列设计并合成1对引物，以烟台分离株为模板扩增了TK基因并对其进行了序列测定。结果表明，该基因包括1个1089 bp的完整开放阅读框架，可编码363个氨基酸组成的多肽。核苷酸序列比较分析发现，不同ILTV毒株之间TK基因相对保守，但与其他疱疹病毒之间同源性则比较低。氨基酸序列分析还发现，尽管与其他疱疹病毒的TK蛋白同源性较低，但ILTV TK蛋白也具有疱疹病毒胸苷激酶催化结构域的保守氨基酸共有序列：-DGXXGXGK-（ATP结合结构域）和-DRH-（核苷酸结合结构域），以及5个保守的Cys残基。这些Cys残基可能是通过形成二硫键来维持TK蛋白氨基酸的功能构象，使ATP结合结构域与核苷酸结合结构域在空间上相互重叠，并与底物靠近发生反应，从而发挥TK蛋白的功能。 2．传染性喉气管炎病毒烟台株gE基因的序列测定及gE蛋白结构功能初步分析 根据传染性喉气管炎病毒（ILTV）美国标准攻毒毒株gE基因序列设计并合成1对引物，以烟台株为模板，PCR法扩增出1条1.5 kb的gE基因片段，并将其克隆至
二、传染性喉气管炎的发生及防治中存在的问题（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、传染性喉气管炎的发生及防治中存在的问题（论文提纲范文）
（1）鸡传染性喉气管炎病毒流行株生物学特征及影响其复制相关宿主蛋白作用机制的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 1 引言 |
| 1.1 鸡传染性喉气管炎及鸡传染性喉气管炎病毒概述 |
| 1.1.1 鸡传染性喉气管炎病毒的发现及分类 |
| 1.1.2 鸡传染性喉气管炎流行病学 |
| 1.1.3 鸡传染性喉气管炎病毒的粒子特点及理化特性 |
| 1.1.4 鸡传染性喉气管炎的诊断与防控措施 |
| 1.2 鸡传染性喉气管炎病毒的分子生物学特征及研究进展 |
| 1.2.1 鸡传染性喉气管炎病毒基因组结构及特征 |
| 1.2.2 鸡传染性喉气管炎病毒与致病力及复制相关的主要基因 |
| 1.2.3 鸡传染性喉气管炎病毒的复制机制及细胞间的传播机制 |
| 1.3 CRISPR/Cas9基因编辑技术概述 |
| 1.3.1 CRISPR/Cas9系统介绍 |
| 1.3.2 CRISPR/Cas9系统的分类及作用机制 |
| 1.3.3 全基因组文库CRISPR/Cas9筛选 |
| 1.4 本研究目的与意义 |
| 2 试验一三株传染性喉气管炎病毒的生长特性及致病性研究 |
| 2.1 主要材料 |
| 2.1.1 毒株、鸡胚、细胞及试验动物来源 |
| 2.1.2 主要试剂与试剂盒 |
| 2.1.3 主要仪器设备 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 三株ILTV毒价的测定 |
| 2.2.2 三株ILTV生长趋势的比较 |
| 2.2.3 三株ILTV致病性试验 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 三株ILTV毒价测定 |
| 2.3.2 生长趋势比较 |
| 2.3.3 感染鸡临床症状 |
| 2.3.4 抗体检测 |
| 2.3.5 三株ILTV qPCR组织脏器分布 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 3 试验二三株传染性喉气管炎病毒基因组序列的测定与分析 |
| 3.1 主要材料 |
| 3.1.1 毒株、鸡胚、细胞及试验动物来源 |
| 3.1.2 主要试剂 |
| 3.1.3 主要仪器设备 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 ILTV的扩增 |
| 3.2.2 ILTV的纯化 |
| 3.2.3 ILTV的基因组DNA提取 |
| 3.2.4 ILTV全基因组高通量测序 |
| 3.2.5 基因组结构注释 |
| 3.2.6 三株ILTV全基因组及蛋白的进化与比较分析 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 三株ILTV病毒纯化后病毒基因组DNA电泳图 |
| 3.3.2 ILTV全基因组高通量测序 |
| 3.3.3 三株ILTV基因组结构注释 |
| 3.3.4 三株ILTV全基因组及相关蛋白系统进化树分析 |
| 3.3.5 三株ILTV重要蛋白的比较分析 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 4 试验三利用CRISPR/Cas9敲除技术筛选对ILTV复制相关的宿主因子 |
| 4.1 主要材料 |
| 4.1.1 毒株、菌株及细胞来源 |
| 4.1.2 主要试剂与试剂盒 |
| 4.1.3 主要仪器设备 |
| 4.2 方法 |
| 4.2.1 鸡全基因组CRISPR/Cas9敲除文库的构建 |
| 4.2.2 鸡全基因组CRISPR/Cas9敲除文库质粒的提取 |
| 4.2.3 鸡全基因组CRISPR/Cas9慢病毒的包装 |
| 4.2.4 鸡全基因组CRISPR/Cas9LMH细胞文库的构建 |
| 4.2.5 ILTV感染阳性细胞 |
| 4.2.6 LMH细胞基因组DNA的提取 |
| 4.2.7 引物设计 |
| 4.2.8 PCR产物胶回收 |
| 4.2.9 高通量测序 |
| 4.3 结果 |
| 4.3.1 鸡全基因组CRISPR/Cas9建库结果 |
| 4.3.2 慢病毒感染效率 |
| 4.3.3 嘌呤霉素筛选靶细胞 |
| 4.3.4 ILTV病毒筛选靶细胞 |
| 4.3.5 sgRNA扩增结果 |
| 4.3.6 高通量测序结果 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 5 试验四与宿主蛋白SPCS3相互作用的ILTV相关病毒蛋白的分析 |
| 5.1 主要材料 |
| 5.1.1 主要毒株、菌株及细胞来源 |
| 5.1.2 主要试剂与试剂盒 |
| 5.1.3 主要仪器设备 |
| 5.2 方法 |
| 5.2.1 SPCS3多克隆抗体的制备 |
| 5.2.2 ILTV在截短细胞系与正常细胞上生长差异的确定 |
| 5.2.3 ILTV蛋白的构建与表达 |
| 5.3 结果 |
| 5.3.1 SPCS3蛋白截短细胞系验证 |
| 5.3.2 ILTV在1-14细胞和LMH细胞生长差异 |
| 5.3.3 LMH与SPCS3蛋白截短细胞系转染效率比较 |
| 5.3.4 ILTV蛋白表达 |
| 5.4 讨论 |
| 5.5 小结 |
| 6 试验五SPCS3蛋白截短表达对其它α疱疹病毒复制的影响 |
| 6.1 主要材料 |
| 6.1.1 毒株、菌株及细胞来源 |
| 6.1.2 主要试剂 |
| 6.1.3 主要仪器设备 |
| 6.2 方法 |
| 6.2.1 DEV和HSV-1在LMH及1-14细胞上的毒价滴定 |
| 6.2.2 DEV和HSV-1在LMH细胞与1-14细胞上生长差异的确定 |
| 6.2.3 DEV和HSV-1的病毒蛋白gL(UL1)蛋白在LMH细胞与1-14细胞表达差异的确定 |
| 6.3 结果 |
| 6.3.1 DEV及HSV-1的毒价结果 |
| 6.3.2 DEV及HSV-1在LMH及1-14细胞上生长差异比较结果 |
| 6.3.3 DEV及HSV-1的gL蛋白在LMH及1-14细胞上表达差异比较 |
| 6.4 讨论 |
| 6.5 小结 |
| 7 全文讨论 |
| 8 全文结论 |
| 9 创新点 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（2）鸡传染性喉气管炎的防治分析（论文提纲范文）
| 1 鸡传染性喉气管炎的流行特点 |
| 2 临床表现 |
| 3 病理变化 |
| 4 鸡传染性喉气管炎防治措施 |
| 4.1预防措施 |
| 4.1.1管理措施防治 |
| 4.1.2药物防治 |
| 4.2治疗措施 |
| 5 小结 |
（3）畜禽养殖业排泄物的污染及防治对策（论文提纲范文）
| 1 畜禽排泄物污染现状 |
| 1.1 我国畜禽排泄物总量概况 |
| 1.2 畜禽排泄物污染环境的原因 |
| 2 畜禽排泄物污染的危害分析 |
| 2.1 对水体的危害 |
| 2.2 对土壤的危害 |
| 2.3 对大气的危害 |
| 2.4 传播人畜共患病 |
| 3 畜禽排泄物污染的防治对策 |
| 3.1 加强行政执法,通过政策法规控制污染 |
| 3.2 科学规划,合理布局 |
| 3.3 科学调配饲料,降低污染 |
| 3.4 规范各种药物、添加剂及消毒剂的使用 |
| 3.5 畜禽排泄物的资源化利用 |
| 4 结论 |
（4）1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 疫苗 |
| 1.2 攻毒用标准强毒 |
| 1.3 免疫试验用鸡 |
| 1.4 安全性试验 |
| 1.5 效力试验 |
| 2 结果 |
| 2.1 安全性试验 |
| 2.2 效力试验 |
| 3 讨论 |
（5）宁夏规模蛋鸡场4种鸡病血清学调查（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 试剂 |
| 1.3 检测方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 流行病学调查 |
| 2.2 血清学调查 |
| 3 结论与讨论 |
（6）中草药免疫增强剂在鸡病防治中的应用（论文提纲范文）
| 1 中草药免疫增强剂的作用机理 |
| 2 中草药免疫增强剂在鸡病防治中的作用 |
| 3 中草药免疫增强剂的应用案例 |
（7）用于治疗鸡传染性喉气管炎的中药口服液的研制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 绪论 |
| 1.1 研究背景与意义 |
| 1.2 组方原则与依据 |
| 1.3 国内外研究现状 |
| 1.3.1 AILT 的研究概述 |
| 1.3.2 中兽药在 AILT 防治方面的研究概述 |
| 1.3.3 “喉炎宁”主要药味研究概述 |
| 第二章 生产工艺研究 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 药材与对照品 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 工艺样品制备 |
| 2.2.2 干膏得率的计算 |
| 2.2.3 甘草酸含量测定 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 药学与质量标准研究 |
| 3.1 材料 |
| 3.1.1 仪器 |
| 3.1.2 样品 |
| 3.1.3 对照品 |
| 3.2 方法 |
| 3.2.1 绿原酸的薄层鉴别 |
| 3.2.2 甘草次酸的薄层鉴别 |
| 3.2.3 甘草酸的含量测定 |
| 3.2.4 绿原酸的含量测定 |
| 3.3 结果 |
| 3.3.1 性状描述 |
| 3.3.2 绿原酸的薄层鉴别 |
| 3.3.3 甘草次酸的薄层鉴别 |
| 3.3.4 甘草酸含量测定结果 |
| 3.3.5 绿原酸含量测定结果 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 临床试验研究 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 材料 |
| 4.1.2 ILTV 种毒复壮 |
| 4.1.3 动物处理及分组 |
| 4.1.4 疗效评价标准 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 人工诱发雏鸡喉气管炎试验结果 |
| 4.2.2 人工感染 ILTV 疗效试验结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 结论 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（8）鸡传染性喉气管炎病毒gB基因重组DNA疫苗的构建与鸡IL-18联合免疫试验（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 摘要 |
| 文献综述 |
| 引言 |
| 试验一 鸡传染性喉气管炎病毒gB 基因与鸡白介素-18 基因真核表达载体的构建 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 试验二 鸡传染性喉气管炎病毒gB 基因与鸡白介素-18 基因免疫保护试验 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 试验三 鸡传染性喉气管炎病毒gB 基因与鸡白介素-18 基因真核共表达载体的构建 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果与分析 |
| 3 讨论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 发表论文 |
（9）中西药复方制剂治疗蛋鸡传染性喉气管炎的疗效观察（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 供试药物 |
| 1.1.1 清喉冲剂 |
| 1.1.2 青霉素、链霉素 |
| 1.1.3 病毒灵原粉 |
| 1.2 供试鸡群 |
| 1.3 试验鸡群管理 |
| 1.4 试验方法 |
| 1.4.1 试验分组 |
| 1.4.2 治疗用药 |
| 2 结果 |
| 2.1 用药后的治疗效果见表1 |
| 2.2 结果判定 |
| 3 讨论 |
（10）表达ILTV gB及gD主要抗原表位基因和鸡IgY重链恒定区基因重组鸡痘病毒免疫效力的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一篇 文献综述 |
| 第一章 传染性喉气管炎病及其研究进展 |
| 1 传染性喉气管炎病毒的历史及分类 |
| 2 传染性喉气管炎的流行病学及致病机理 |
| 3 传染性喉气管炎病毒的生物学进展 |
| 4 传染性喉气管炎病毒的分子生物学研究进展 |
| 5 传染性喉气管炎病的诊断 |
| 6 传染性喉气管炎基因工程疫苗的研究进展 |
| 7 展望 |
| 参考文献 |
| 第二章 应用禽痘病毒表达载体研制重组疫苗的研究进展 |
| 1 禽痘病毒的基本特性 |
| 2 重组禽痘病毒的构建 |
| 3 外源基因在重组禽痘病毒中的表达 |
| 4 禽痘病毒表达载体的优越性 |
| 5 重组禽痘病毒疫苗的应用前景 |
| 参考文献 |
| 第二篇 试验研究 |
| 第三章 传染性喉气管炎病毒烟台株TK基因的序列测定及TK蛋白结构功能初步分析 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 第四章 传染性喉气管炎病毒烟台株gE基因的序列测定及gE蛋白结构功能初步分析 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 第五章 目的片段的选取及重组鸡痘病毒转移载体pEF-gB-gD和pEF-gB-gD-IgY的构建 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 第六章 目的片段在重组鸡痘病毒中的表达及其生物学特性的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 第七章 重组鸡痘病毒对SPF鸡的免疫保护作用 |
| 1 材料与方法 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
| 参考文献 |
| 英文摘要 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 攻读博士学位期间发表论文 |
| 附录 |
| Curriculum vitae |
四、传染性喉气管炎的发生及防治中存在的问题（论文参考文献）
- [1]鸡传染性喉气管炎病毒流行株生物学特征及影响其复制相关宿主蛋白作用机制的研究[D]. 吴咪. 内蒙古农业大学, 2021(01)
- [2]鸡传染性喉气管炎的防治分析[J]. 王李辉,刘洋洲,张扬. 家禽科学, 2020(06)
- [3]畜禽养殖业排泄物的污染及防治对策[J]. 杜娟. 现代畜牧科技, 2019(12)
- [4]1日龄雏鸡免疫鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗安全性及效力的研究[J]. 高晓磊,韩明宝,刘思桐,赵丽霞,朱秀同,刘浩,郁宏伟,谢康. 中国动物保健, 2019(04)
- [5]宁夏规模蛋鸡场4种鸡病血清学调查[J]. 周海宁,李知新,张成莲,艾文,杨佳冰,赵燕,田进梅,闫小芹,张和平. 甘肃畜牧兽医, 2015(12)
- [6]中草药免疫增强剂在鸡病防治中的应用[J]. 陈星昊,雷正洲,蒋立锋. 当代畜禽养殖业, 2015(11)
- [7]用于治疗鸡传染性喉气管炎的中药口服液的研制[D]. 朱士江. 中国农业科学院, 2012(07)
- [8]鸡传染性喉气管炎病毒gB基因重组DNA疫苗的构建与鸡IL-18联合免疫试验[D]. 邵攀峰. 河南农业大学, 2010(03)
- [9]中西药复方制剂治疗蛋鸡传染性喉气管炎的疗效观察[J]. 李淑坚. 中国动物检疫, 2009(12)
- [10]表达ILTV gB及gD主要抗原表位基因和鸡IgY重链恒定区基因重组鸡痘病毒免疫效力的研究[D]. 刘文波. 南京农业大学, 2005(12)