用基因工程生产无酒精啤酒

用基因工程生产无酒精啤酒

一、利用遗传工程技术生产无酒精啤酒(论文文献综述)

周婷[1](2021)在《喷雾干燥葡萄酒粉的制备、性质及其对面包品质的影响》文中提出葡萄酒中含有有机酸、香味物质等风味成分及其中含有的多酚、黄酮等生理活性成分使其被认为是一种有用的原料,可以用于制作许多不同的健康食品和饮料产品。然而出于健康、民族、社会或宗教原因,含醇的酒类不能作为食品应用配料运用到食品种,使得葡萄酒的使用受到了限制。为了解决上述问题,本文采用喷雾干燥方法对葡萄酒进行脱醇,制备微胶囊葡萄酒粉,对喷雾干燥微胶囊葡萄酒粉的工艺进行了优化,并对获得的葡萄酒粉的相关性质进行研究,最后将其应用于面包面团中研究其对面包品质的影响。本文主要研究内容如下:(1)喷雾干燥微胶囊葡萄酒粉制备及工艺优化。以麦芽糊精为载体,对微胶囊葡萄酒粉喷雾干燥工艺过程中进料速率、压缩空气流量及进风温度通过单因素实验结合正交实验进行优化。结果表明,影响喷雾干燥工艺产品集粉率的主次因素依次是进料速率、进风温度、压缩空气流量;而影响喷雾干燥工艺产品分散性的主次因素依次是压缩空气流量、进风温度、进料流量;喷雾干燥最优工艺为:进风温度160℃,进料速率41.9 mL/min,压缩空气流量130 NL/min,在此条件下其集粉率为51.91%,分散性为27 s。(2)喷雾干燥微胶囊葡萄酒粉性质的测定。对微胶囊葡萄酒粉的基本成分、生理活性成分含量、理化性质、加工性质及安全与卫生指标进行了测定。结果表明,葡萄酒粉中水分含量为5.03%,碳水化合物含量为45.2 g/100g,总酚含量为1.981±0.01 mg/100g,总黄酮含量为1.125±0.02 mg/100g。葡萄酒粉中可溶性固形物为47.28%,水分活度为0.41,葡萄酒粉能够显着影响水分流动性,微颗粒形状良好,表面光滑,无明显裂纹或气孔;葡萄酒粉傅里叶红外光谱中有典型的有机酸和酚类化合物特征;具有良好的热稳定性;分别以去离子水和乙醇为分散剂对葡萄酒粉的粒径进行分析,葡萄酒粉在不同的分散体系中粒径不同;对其溶液香气成分进行测定,共检测出484种物质,依据保留时间对面积百分比大于0.1%且匹配度大于70(最大值为100)的鉴定结果进行检索和分析,检索到4种醇类化合物,8种酯类化合物,2种醛类化合物,2种酸类化合物,2种烷类化合物。葡萄酒粉具有良好的分散性,且在不同温度下分散性不同;澄清度为84.40±0.14,pH为3.71,色度和色调分别为3.54±0.00、0.57±0.00,L*,a*,b*色值分别为 41.65±0.05,26.11±0.07,17.98±0.04,堆积密度为6.20±0.00 g/mL,0h时结块性为2.516±0.011N,在相对湿度为0.44的干燥器中放置72小时后结块性为11.772±0.013N,吸水性指数与水溶性指数分别为0.024 g/g和91.24 g/100g,在不同相对湿度下,葡萄酒粉的平衡含水量分别为8.49%,8.58%,12.45%和26.11%;葡萄酒粉中砷、铅、锡含量均低于标准,符合食品安全国家标准对卫生指标的要求;葡萄酒粉中菌落总数、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌含量均低于标准,符合食品安全国家标准对微生物指标的要求。(3)喷雾干燥微胶囊葡萄酒粉对面包品质的影响。葡萄酒粉的加入能够影响面团的流变学特性,添加量不同对面团弹性模量影响不同;随着葡萄酒粉的添加,面团相位角升高。在不同发酵阶段,葡萄酒粉对面团发酵特性影响不同。随着葡萄酒粉含量的增大,面团L值显着降低(P<0.05),a*值显着增加(P<0.05),b*值显着降低(P<0.05)。添加葡萄酒粉使面筋的网络结构清晰,结构较强,淀粉颗粒大都被镶嵌在面筋网络结构中。不同葡萄酒粉添加量对面包的比容、质构、气孔分布特性影响不同。总体来说,当葡萄酒粉添加量小于3.0%时,能够提高面包品质,大于5.0%时降低面包品质。随着葡萄酒粉添加量的增加,面包芯含水量呈显着性增加(P<0.05)。添加3.0%葡萄酒粉的面包感官综合评分最高,显着高于空白组(P<0.05)。贮藏过程中,面包的硬度显着增加(P<0.05),面包内聚性和弹性无显着变化(P>0.05),面包胶粘性和咀嚼性随贮藏时间增加而显着增大(P<0.05)。在面包贮藏过程中,葡萄酒粉的加入可以显着影响贮藏过程中面包质构品质的变化。葡萄酒粉对面包不同品质影响程度不同,且对面包贮藏品质影响的阶段不同。面包的含水量随着贮藏时间的延长均显着降低(P<0.05)。随着葡萄酒粉添加量增大,面包含水量降低趋势显着变缓,这说明葡萄酒粉的加入能降低面包贮藏过程中水分损失速率。

刘杨[2](2012)在《特殊酵母发酵生产无醇啤酒的研究》文中认为随着人们对酒精危害认识的加深,以及消费者越来越多的关注健康,无醇啤酒、无醇葡萄酒等无醇饮料渐渐走进人们的生活,其中无醇啤酒更是受到消费者的青睐。我国国家标准对于无醇啤酒的规定除了要求酒精体积分数小于等于0.5%外,还要求啤酒的原麦汁浓度大于等于3.0°P。按照此定义在不考虑口感的情况下,若将原麦汁浓度调整为3.0°P,采用普通啤酒酵母正常发酵,发酵度为65%,则会产生约体积分数1.2%的酒精,若无其它手段配合,不能得到无醇啤酒。工业上主要通过两种方法生产无醇啤酒,一种是工业上最常用的是物理脱醇法,即在正常生产啤酒的基础上,通过反渗透、透析或蒸发等方法脱醇,但这种方法需要增加脱醇设备,增加成本;另一种是通过控制发酵减少酒精产生的生物法,本文便是选择生物法—特殊酵母发酵生产无醇啤酒,筛选诱变了适于生产无醇啤酒的酵母,研究了形态、部分生理特性、发酵特性、发酵工艺、产品特性,主要研究结果、结论如下:1确定路德类酵母为发酵菌株,对于路德类酵母应用于啤酒发酵也有相关文献报道,为安全微生物。2路德类酵母28℃下生长8h进入对数生长期,属于弱凝聚性酵母,发酵速度最快的温度是12℃,极限发酵度偏低,发酵10°P麦汁的极限发酵度为13.8%。3进行2000mL量筒和400L中试试验,发现路德类酵母在大生产中的发酵性能与三角瓶发酵基本一致,应用于中试是可行的,但是发酵用的麦汁需是低浓麦汁。4用pH与路德类酵母原发酵液相同的稀释水将原麦汁浓度稀释成5°P,与市售无醇啤酒相近,并进行比较,发现在理化指标和风味成份、残糖方面都有一定差异,特别是糖组份方面,路德类酵母发酵液含有大量的麦芽糖和麦芽三糖,pH偏高,酯类含量偏低,且不含有乙酸异丁酯,而高级醇含量没有明显差异,这些因素造成了其在口感上的不同:路德类酵母发酵液有类似于菊花的香气,较温和、较淡薄,没有明显酸感,原浓较高时有甜味、麦汁味。5将麦汁原浓降低到5°P,EMS诱变筛选出路德类酵母L3菌株,发酵度在15%左右,比出发菌株显着提高,以此消除发酵液的甜味;6确定了3-甲硫基丙醛是产生麦汁味的主要物质,以其作为表征啤酒麦汁味的指标,差别阈值为5.0μg/L,建立了其GC/MS的检测方法,应用该法检测了不同啤酒中3-甲硫基丙醛的含量,发现普通啤酒都在50μg/L以下,得到路德类酵母发酵啤酒中3-甲硫基丙醛的控制标准为不超过55μg/L。7确立了最终的发酵工艺:路德类酵母L3为发酵菌株,原麦汁浓度为5°P,麦汁pH为4.7,接种量和活化时间分别为3%和24h,并应用于实验室试验和100L小试试验,结果发现发酵液中3-甲硫基丙醛含量在控制标准之下(55μg/L),pH在4.2左右,在正常啤酒pH范围之内,其他理化指标及风味成份都在正常范围内,感官品评发酵液口感柔和,没有甜味、麦汁味,但口感较淡薄。

赵文娟[3](2007)在《无醇啤酒新型生产方法的研究》文中提出自2002年,我国已连续五年蝉联世界第一啤酒生产大国的宝座,产品结构也呈现出多元化发展的趋势。近年来,世界卫生组织呼吁人们减少酒精饮料的消费,人们也已意识到过量饮用酒精带来的危害,在欧美各国,啤酒及其它酒精饮料的消费量已逐年下降,而无醇啤酒的产量正在逐渐增加。我们结合了限制发酵法和真空蒸馏法的优点,研发成功了无醇啤酒基料。把无醇啤酒基料经稀释还原成无醇啤酒后,与市售几种无醇啤酒进行了品评对比,并对排序结果进行了数理统计分析,结论表明该无醇啤酒与市售无醇啤酒在感官方面更有优势。本课题针对无醇啤酒基料的制备及无醇啤酒的整体生产工艺做了较为详细的研究,主要分为四方面,其内容和结果如下:1.采用特殊的糖化工艺。在糖化过程中,蛋白质休止后直接升温至72℃保温,直至碘检无变化时结束糖化。然后升温至78℃灭酶活并进行过滤。该糖化工艺弃去了62-68℃可发酵性糖生成的最适反应温度段,降低了麦汁中可发酵性糖的含量。2.限制发酵法制备发酵液。发酵液降糖1~2°P后,立即降温,以抑制酒精的生成量;同时酵母的各种代谢产物与啤酒接近。3.对发酵液进行真空蒸馏,制备无醇啤酒基料。通过对比试验,确定了真空蒸馏的最佳真空度,最佳温度,以及所得无醇啤酒基料的最佳浓度。蒸发温度的高低直接决定无醇啤酒的质量:温度过低,理化指标达不到要求;温度过高,会使啤酒受到较大的损害,最终确定蒸发器的最佳真空度范围为0.05~0.06MPa,蒸发温度范围为64~68℃,无醇啤酒的最佳浓度为65°P。4.对无醇啤酒基料进行稀释还原。将无醇啤酒基料进行稀释还原后,通过感官品评排序法,对排序结果进行数理统计,结果表明,把无醇啤酒基料稀释到4°P,再按体积比添加约15%的普通成品啤酒进行口味修饰,其口味最佳,当然酒精度应控制在0.5%(v/v)以下。

孙宗祥[4](2007)在《低醇啤酒基因工程菌株的构建及其发酵参数的分析》文中研究说明低醇啤酒既具有啤酒应有的啤酒风味,又具有多饮不醉的优点,同时也符合当今消费者日益重视身体健康的消费趋势,加上妇女对酒精过敏男士对低醇啤酒的喜爱,低醇啤酒正在走俏。啤酒乙醇的含量是决定低醇啤酒的关键指标,它直接关系到啤酒的品质。如何解决啤酒中乙醇的含量是生产低醇啤酒的关键。目前,降低啤酒中乙醇含量的办法有很多种,其中最理想的方法之一就是构建低醇啤酒基因工程菌株,通过对工业用酿酒酵母本身进行改造来生产低醇啤酒。在酿酒酵母代谢过程中,控制乙醇产量的关键酶就是乙醇脱氢酶Ⅰ(ADHⅠ),它催化代谢中的乙醛生成乙醇。乙醇脱氢酶Ⅰ(ADHⅠ)的活力大小直接关系着酿酒酵母乙醇的产量。通过对工业用酿酒酵母的改造,利用基因敲除的方法去除其自身的ADHⅠ,然后转入相对酶活力较弱的ADHⅠ基因就能够达到降低乙醇含量的目的。本研究采用LFH-PCR法从质粒pCAMBIA中扩增出两端带有与酿酒酵母ADHⅠ同源序列的潮霉素基因片段,利用醋酸锂转化法将构建的潮霉素基因片段导入工业酿酒酵母(HDY-01)中去,外源基因片段通过同源部分与酿酒酵母染色体重组并整合到染色体上,破坏了酿酒酵母的ADHⅠ基因,从而构建了ΔADHⅠ酿酒酵母。然后,根据GeneBank上登录的枯草芽孢杆菌的ADHⅠ(BADHⅠ)基因序列(CNC 000964),设计一对引物(引物上下游带有XBaⅠ的酶切位点),对其进行PCR扩增,将扩增得到的片断与pYC6/CT载体连接,构建表达载体pYC6/CT-BADHⅠ,利用醋酸锂转化法将表达载体pYC6/CT-BADHⅠ转入ΔADHⅠ酿酒酵母,构建低醇啤酒基因工程菌株。通过低温发酵实验,比较了HDY-01酵母,ΔADHⅠ酵母,和BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母三株菌株的生长状况及发酵液中的乙醛、乙醇、双乙酰、残糖、悬浮酵母数、二甲基硫、甲酸乙酯、乙酸乙酯、正丙醇、异丁醇、乙酸异戊、异戊醇等的含量。发现BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母的生长状况比HDY-01酵母和ΔADHⅠ酵母稳定,在整个发酵的15天中能维持较多的数量,同时乙醛、乙醇、双乙酰等风味物质含量要低于HDY-01酵母,符合优质低醇啤酒标准指标。本研究的成功实现,会为低醇啤酒生产构建适合菌株,扩大了菌株来源的同时,采用的出发菌株来源于生产,改造成功后,无需更改生产设备,这样大大提高设备利用率和经济效益。

李磊,谭淑娟,肖泽仪,武法文,徐志红,张志炳[5](2005)在《无醇及低醇饮料的研制方法》文中认为研制及生产无醇及低醇饮料的方法主要有两大类。一类是用限制发酵的方法,包括专一酵母发酵、改变糖化工艺和改变发酵工艺法;另一类是制成酒精饮料后利用各种分离手段脱除酒精,有蒸馏法、渗析法、反渗透法、吸附法、膜萃取、超临界CO2萃取法、旋转锥体柱法(SCC)、冷冻法和渗透汽化法。(孙悟)

张沛[6](2004)在《带有ALDC基因的青岛啤酒酵母工程菌的研究》文中研究说明双乙酰阈值很低,是啤酒中重要的风味物质,其含量是啤酒发酵是否成熟的重要标志。α-乙酰乳酸是啤酒发酵过程中,酵母细胞内进行缬氨酸生物合成的中间产物,也是形成双乙酰的前躯体,α-乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)能催化α-乙酰乳酸直接脱羧生成乙偶姻。由于啤酒酵母中不存在ALDC基因,不能代谢产生α-乙酰乳酸脱羧酶。本研究筛选含有ALDC基因的啤酒酵母工程菌并对其发酵性能进行研究,工程菌利用自身的代谢作用产生ALDC酶活性,将双乙酰的前躯体α-乙酰乳酸降解,加速双乙酰的还原,从而缩短啤酒发酵的周期。 对获得的250余株ALDC阳性转化子和受体菌进行细胞形态、大小、酵母生长、死亡率和死灭温度等试验;通过双乙酰含量的测定,筛选到10余株酶活性高的工程菌;通过发酵试验,筛选到双乙酰峰值低、还原快、发酵性能及风味物质与青岛啤酒相似的1、2、4、9、14#五株工程菌。 对筛选到的工程菌酶学性能研究表明,工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶活性明显受不同浓度CuSO4的诱导。在检测范围内,当CuSO4浓度为20μmol/L时,工程菌酶活性达到最高;工程菌产生的α-乙酰乳酸脱羧酶活性较高的pH范围为5~7,最适pH为6.0;其酶反应活性较高的温度范围为30~60℃,最适反应温度为40℃;工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶对热较敏感;在培养过程中产生的酶总量与细胞密度成正比关系,α-乙酰乳酸脱羧酶可能是组成型酶,随着菌体量的增加,α-乙酰乳酸脱羧酶的酶活逐步提高。 工程菌的抗铜性明显高于受体菌,且抗铜性非常稳定。经20代传代后,工程菌的双乙酰含量比受体菌的低20~30%,而且传代的α-乙酰乳酸脱羧酶活性的测定数据也佐证了双乙酰的测定结果。实验结果同时表明,工程菌的发酵性状经过传代,仍保持稳定。 分别提取受体菌和工程菌ZL-4第1代和第20代的总DNA,经HindⅢ酶切后,进行琼脂糖凝胶电泳,并将DNA转移到硝酸纤维素膜上,以α-乙酰乳酸脱羧酶基因为探针,与上述DNA进行Southern杂交。结果表明受体菌没有杂交信号,工程菌4#第1代和第20代均有明显的杂交信号,说明该工程菌带有α-乙酰乳酸脱羧酶基因,遗传稳定性很好。 利用EBC发酵管对1、2、4#进行了8次连续发酵实验,结果表明经过连续传代发酵,工程菌与受体菌相比,酵母生长、死亡率、发酵性能等基本不变,产生的风味物质也基本相同;工程菌与受体菌相比,双乙酰峰值降低8.8~51.7%,平均降低38.6%,其中4#降低32.4~51.7%;工程菌在发酵5天后,就可以将发酵液中的双乙酰的含量降到0.08mg/L或更低,而受体菌则只能降到0.1mg/L;跟踪测定到工程菌发酵液中的α-乙酰乳酸脱羧酶活性,表明α-乙酰乳酸脱羧酶基因在工程菌中成功稳定表达,而且,随着使用代数的增加,并未发现双乙酰的峰值和还原值明显增高的趋势。 在100L中试设备中,跟踪连续七代酵母泥发酵过程中酵母生长、降糖、双乙酰还原曲线,并对发酵过程中酶活性、酵母抗铜性、氨基酸利用等进行分析,结果表明,与受体菌相比,工程菌的双乙酰峰值平均下降23.8~43.1%,双乙酰还原至0.08mg/L的时间平均缩短30~37.5%,风味物质表明工程菌基本保持青岛啤酒的特色,达到了研究的目的。

毛志群[7](2003)在《燃料酒精高产酵母菌株选育及应用研究》文中进行了进一步梳理从来源不同的基质中分离得到115株酵母菌,经初筛、复筛和酒精发酵试验,最终获得一株适宜以玉米为原料,可进行浓醪酒精发酵的高产酵母菌株,编号为SP-48。进行了以下生理生化实验:发酵糖类试验,可发酵葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、半乳糖,不发酵乳糖;同化碳源试验,可同化棉子糖、半乳糖、麦芽糖、海藻糖、蔗糖,不同化纤维二糖、肌醇、核糖、赤藓糖醇、鼠李糖、乳糖、木糖、核糖醇、柠檬酸、琥珀酸、甘露醇、可溶性淀粉、阿拉伯糖;同化氮源试验,不能同化硝酸盐、盐酸乙胺、盐酸尸胺:可在无维生素培养基上生长;可在50%(w/w)葡萄糖酵母膏培养基中生长;37℃下可生长;不能在100ppm放线菌酮中生长。并对照模式菌株的生理特性,鉴定SP-48菌株属于酵母属(Saccharomyces)的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。 本研究确定了SP-48生长发酵的最佳生长温度、pH;研究了温度、pH和接种量对生长和发酵曲线的影响:研究了SP-48菌株的耐酸碱;耐酒精;耐盐;耐糖和耐发酵副产物特性。结果表明,其最适生长温度为30℃,最适生长pH为4.5;最适发酵温度为30℃,最适发酵pH为4.5;温度和接种量对生长和发酵曲线的影响显着,pH对生长和发酵曲线的影响不显着;耐酒精能力为20%(v/v),可在含18%(v/v)酒精的培养基中发酵;耐盐能力为7%;可在50%(w/w)的葡萄糖溶液中发酵;并对乙酸、乳酸和甘油有一定的耐受能力。 采用四因素三水平正交试验确定了SP-48菌株的浓醪酒精发酵工艺。浓醪发酵的最佳工艺条件为:料水比为1:2,糖化酶用量为300IU/g原料,接种量为6%(v/v),初始pH值为4.5。按照不同的料水比例,应用10L发酵罐进行小试的实验数据表明,料水比为1:2时,72h的酒精产量为16.2%(v/v),淀粉利用率为90.8%,比ADY在同样条件下产量高出15.7%;料水比为1:3时,72h的酒精产量为12.0%(v/v),淀粉利用率为89.4%,比ADY在同样条件下产量高出6.2%;料水比为1:4时,72h的酒精产量为9.3%(v/v),淀粉利用率为86.2%,比ADY在同样条件下产量高出9.4%。

毛建卫,崔艳丽[8](2002)在《高效膜分离技术在啤酒工业中的应用工艺》文中认为探讨了不同膜分离技术在啤酒工业中的应用现状和发展趋势,包括微滤、反渗透、渗析、超滤、液体除气膜、气体分离膜等膜分离技术在啤酒无菌过滤、生产鲜生啤酒、生产无醇啤酒、酵母液中啤酒回收、高浓啤酒稀释用水除氧、空分制氮取代空气或二氧化碳气等方面的应用和进展。表明了膜分离技术以其高效率、无相变、低耗能、无三废、投资少等特点,在提高啤酒的品味、品种、品质和产量方面有着重大的作用和广阔的发展前景。

陈晓虹[9](2000)在《利用遗传工程技术生产无酒精啤酒》文中认为 不含酒精的啤酒从字面上来看,是相互矛盾的。不过,比利时的科学家,已准备利用遗传工程技术,生产无酒精啤酒。目前,普通酒精的含量为3%~12%,若酒精含量低于1%,则可以认为是不含酒精的啤酒。因此,为了防止酵母生成酒精,绝大部分含低度酒精啤酒的酿制温度为1℃,但形成香味的物质就会丢失。面对这种状况,比利时洛文天主教大学酿造和食品研究院的菲利浦·庞佩及其领导的研究小组认为,无香味不含酒精的啤酒,可以用酵母传递的化学物质来进行生产。该研究小组通过气相色谱仪,对利用这种化学物质生产的无酒精啤酒,进行了分析。在分析过程中,将各种成份分开,并通过一个管口对气味进行鉴定。经过气相色谱仪对散发的气味物质进行

丹尼尔·斯蒂,严忠志,欧阳亚丽[10](1997)在《最后的补偿》文中提出《最后的补偿)(Final Remedy)是美国1996年推出的惊险小说,其作者丹尼尔·斯蒂文(Daniel Steven)是一名律师。该小说融医学与法律于一体,以一件医疗事件索赔案为线索,揭露了美国军方研制一种剧毒的生化武器的内幕,点评了美国社会中的若干热点问题,令人读后不禁掩卷长思。

二、利用遗传工程技术生产无酒精啤酒(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、利用遗传工程技术生产无酒精啤酒(论文提纲范文)

(1)喷雾干燥葡萄酒粉的制备、性质及其对面包品质的影响(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 发酵葡萄酒与皮渣
        1.1.1 发酵葡萄酒
        1.1.2 发酵葡萄皮渣
    1.2 发酵葡萄酒及皮渣中的活性成分
        1.2.1 发酵葡萄酒中的活性成分
        1.2.2 葡萄皮渣中的活性成分
    1.3 发酵葡萄酒及皮渣脱醇产品及技术
        1.3.1 无醇葡萄酒(皮渣)制品
        1.3.2 脱醇技术
    1.4 葡萄酒与皮渣粉末化产品及技术
        1.4.1 冻干法
        1.4.2 喷雾干燥法
    1.5 葡萄酒对面包品质的影响
    1.6 多酚对面包品质的影响
        1.6.1 多酚对面包品质的影响
        1.6.2 多酚潜在的健康益处
    1.7 研究目的及意义
第2章 喷雾干燥葡萄酒粉工艺的建立
    2.1 材料
        2.1.1 实验原料
        2.1.2 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 添加麦芽糊精法中喷雾干燥浆液的制备
        2.2.2 喷雾干燥性质的测定
        2.2.3 喷雾干燥工艺优化
    2.3 结果与分析
        2.3.1 麦芽糊精添加量对喷雾干燥集粉率的影响
        2.3.2 喷雾干燥工艺优化
    2.4 本章小结
第3章 喷雾干燥葡萄酒粉性质测定
    3.1 材料
        3.1.1 实验原料
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 基本成分测定
        3.2.2 生理活性成分测定
        3.2.3 理化性质
        3.2.4 加工特性
        3.2.5 安全与卫生指标
    3.3 结果分析
        3.3.1 基本成分及生理活性成分
        3.3.2 葡萄酒粉理化性质
        3.3.3 葡萄酒粉加工特性
        3.3.4 葡萄酒粉安全与卫生指标
    3.4 本章小结
第4章 喷雾干燥葡萄酒粉对面包品质的影响
    4.1 材料与设备
        4.1.1 材料
        4.1.2 仪器与设备
    4.2 面包制备
    4.3 实验方法
        4.3.1 面团性质的测定
        4.3.2 面包烘焙学特性的研究
        4.3.3 面包贮藏品质测定
    4.4 结果与分析
        4.4.1 面团的性质分析
        4.4.2 面包烘焙学特性研究
        4.4.3 面包贮藏期性质测定分析
    4.5 本章小结
结论与展望
参考文献
致谢

(2)特殊酵母发酵生产无醇啤酒的研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
1 引言
    1.1 无醇啤酒的概述
    1.2 无醇啤酒的发展与前景
        1.2.1 无醇啤酒的发展
        1.2.2 无醇啤酒的前景
    1.3 无醇啤酒的研究现状
        1.3.1 物理方法生产无醇啤酒的研究进展
        1.3.2 生物方法生产无醇啤酒的研究进展
        1.3.3 其他方法生产无醇啤酒的研究进展
        1.3.4 新技术在无醇啤酒中的应用
    1.4 特殊酵母
    1.5 本课题的立题背景、意义
    1.6 主要研究内容与目标
        1.6.1 研究内容
        1.6.2 技术路线
        1.6.3 研究目标
2 材料与方法
    2.1 试验材料
    2.2 主要试剂
    2.3 主要仪器
    2.4 试验方法
        2.4.1 理化分析
        2.4.2 啤酒中糖组份的测定
        2.4.3 啤酒中风味物质的测定
        2.4.4 酵母生理特性的测定
        2.4.5 中试(小试)方法
        2.4.6 菌株发酵度的测定
        2.4.7 高发酵度酵母的筛选方法
        2.4.8 啤酒中麦汁味物质—3-甲硫基丙醛含量的测定
        2.4.9 麦汁味物质—3-甲硫基丙醛阈值的测定
        2.4.10 啤酒的感观品评
        2.4.11 小试线麦汁糖化
    2.5 数据分析
3 结果与分析
    3.1 菌株筛选
        3.1.1 路德类酵母、白地霉、酵母 A、酵母 B 麦汁发酵试验
        3.1.2 路德类酵母、酵母 A 麦汁发酵试验
    3.2 路德类酵母的形态及生理特性的研究
        3.2.1 路德类酵母的形态
        3.2.2 酵母生理特性试验
    3.3 放大试验
        3.3.1 2000mL 量筒试验
        3.3.2 400L 发酵罐中试试验
    3.4 与市售无醇啤酒的比较
        3.4.1 啤酒主要理化指标的比较
        3.4.2 啤酒重要风味成份分析比较
        3.4.3 啤酒残糖分析比较
    3.5 路德类酵母发酵过程中主要问题的研究
        3.5.1 甜味
        3.5.2 麦汁味
    3.6 发酵生产试验
        3.6.1 实验室三角瓶发酵试验
        3.6.2 2000mL 发酵试验
        3.6.3 100L 发酵罐试验
4 讨论
    4.1 筛选菌株
    4.2 路德类酵母应用于大生产的可行性
    4.3 路德类酵母发酵过程中主要问题的研究
    4.4 进一步研究方向
5 结论
参考文献
致谢
攻读学位期间发表论文情况

(3)无醇啤酒新型生产方法的研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
第1章 绪论
    1.1 中国啤酒的发展历史和现状
        1.1.1 中国啤酒的发展历史
        1.1.2 中国啤酒的发展现状
    1.2 无醇啤酒的概念
    1.3 无醇啤酒的市场现状及前景
        1.3.1 无醇啤酒的市场现状
        1.3.2 无醇啤酒的市场前景分析
        1.3.3 无醇啤酒的研究现状
    1.4 本论文的选题背景、选题依据和研究意义
    1.5 本论文研究的主要内容
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料与仪器
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 酵母的扩培工艺流程
        2.2.2 麦汁制备过程控制
        2.2.3 发酵过程控制
        2.2.4 啤酒过滤
        2.2.5 真空蒸馏实验
        2.2.6 无醇啤酒基料的稀释
        2.2.7 碳酸化实验
        2.2.8 后修饰实验
        2.2.9 后贮
        2.2.10 啤酒过滤
        2.2.11 装瓶
        2.2.12 巴氏杀菌
    2.3 麦汁的分析方法
        2.3.1 麦汁糖度的测定
        2.3.2 麦汁pH 值的测定
        2.3.3 麦汁中的总氮含量的测定
        2.3.4 麦汁中α-氨基氮的测定
        2.3.5 麦汁中总还原糖的测定
        2.3.6 浸出物中糖与非糖之比
        2.3.7 麦汁多酚物质含量的测定
    2.4 无醇啤酒基料相关指标的测定
        2.4.1 无醇啤酒基料的浓度(比重或者糖度)的测定
        2.4.2 无醇啤酒基料pH 值的测定
        2.4.3 无醇啤酒基料的色度的测定
        2.4.4 无醇啤酒基料的酸度测定
        2.4.5 无醇啤酒基料的总氮含量的测定
        2.4.6 无醇啤酒基料的α-氨基氮的测定
    2.5 啤酒各项指标的测定
        2.5.1 啤酒中酒精含量的测定
        2.5.2 啤酒中双乙酰含量的测定
        2.5.3 发酵度的测定
        2.5.4 原麦汁浓度的测定
        2.5.5 总糖的测定
        2.5.6 啤酒酸度的测定
        2.5.7 啤酒色度的测定
        2.5.8 苦味质含量的测定
        2.5.9 大肠菌群的检测
第 3 章 无醇啤酒基料的制备工艺
    3.1 原料的选择
        3.1.1 酿造用水的水质要求
        3.1.2 大麦芽质量分析
        3.1.3 小麦芽添加比例的确定
        3.1.4 焦香麦芽添加量的确定
        3.1.5 酒花质量的分析
    3.2 糖化工艺条件的确定
        3.2.1 最佳麦芽粉碎度
        3.2.2 蛋白质休止温度与时间的确定
        3.2.3 特殊糖化工艺参数的确定
        3.2.4 糖化完全性测试
        3.2.5 洗糟程度的控制
        3.2.6 酒花添加量的确定
        3.2.7 麦汁溶氧量的确定
    3.3 发酵工艺的确定
    3.4 浓缩过程温度和真空度的确定
第4章 无醇啤酒的制备工艺
    4.1 稀释倍数的确定
    4.2 无醇啤酒稀释液的碳酸化
    4.3 无醇啤酒的修饰
        4.3.1 添加普通啤酒
        4.3.2 添加啤酒修饰剂
    4.4 无醇啤酒的生物稳定性
    4.5 无醇啤酒的非生物稳定性
        4.5.1 提高无醇啤酒的抗氧化性
        4.5.2 添加硅胶提高啤酒胶体稳定性
第5章 无醇啤酒的质量分析
    5.1 感官分析
    5.2 质量检验
    5.3 成本核算
第6章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
参考文献
致谢
附录
攻读硕士学位期间发表的论文

(4)低醇啤酒基因工程菌株的构建及其发酵参数的分析(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 低醇啤酒的概念、研究意义、国内外概况
        1.1.1 低醇啤酒的概念及研究的意义
        1.1.2 低醇啤酒国内外研究概况
    1.2 乙醇脱氢酶的研究概况
        1.2.1 乙醇脱氢酶
        1.2.2 乙醇脱氢酶的应用
    1.3 基因敲除技术在菌株改造上的研究
        1.3.1 标记基因的应用及剔除
        1.3.2 酿酒酵母的遗传转化系统
        1.3.3 基因敲除
    1.4 本论文研究的目的及意义
        1.4.1 本论文研究的目的
        1.4.2 本论文的意义
第2章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 供试菌株
        2.1.2 质粒
        2.1.3 仪器设备
        2.1.4 实验药品及配制
        2.1.5 培养基及配制
        2.1.6 引物
    2.2 实验方法
        2.2.1 枯草芽孢杆菌(B.sub)中BADHⅠ基因的克隆
        2.2.2 重组质粒DNA pYC6/CT- BADHⅠ的构建
        2.2.3 ΔADHⅠ酿酒酵母菌株的获得
        2.2.4 恢复突变酵母的获得
        2.2.5 HDY-01酵母、ΔADHⅠ酵母、BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母酶活力测定
        2.2.6 遗传稳定性试验
        2.2.7 HDY-01酵母、ΔADHⅠ酵母、BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母发酵实验
第3章 结果与分析
    3.1 BADHⅠ基因的获得结果
        3.1.1 枯草芽孢杆菌 DNA 提取结果
        3.1.2 PCR 扩增 B.sub 基因组中的 BADHⅠ基因结果
        3.1.3 BADHⅠ基因片段纯化结果
        3.1.4 连接产物pGMT-BADHⅠ转化大肠杆菌感受态细胞 DH5α结果
        3.1.5 pGMT-BADHⅠ质粒提取结果
        3.1.6 PCR 验证pGMT-BADHⅠ质粒转化 DH5α结果
    3.2 表达载体pYC6/CT- BADHⅠ的构建结果
        3.2.1 pGMT-BADHⅠ的 XbaⅠ酶切结果
        3.2.2 pYC6/CT 的 XbaⅠ酶切结果
        3.2.3 pYC6/CT-BADHⅠ转化 E.coli DH5α结果
        3.2.4 pYC6/CT-BADHⅠ质粒提取及 XbaⅠ酶切验证结果
    3.3 ΔADHⅠ酵母菌株的获得结果
        3.3.1 pCAMBIA 质粒的获得结果
        3.3.2 带有潮霉素筛选标记的同源重组片段的获得
        3.3.3 潮霉素杀伤曲线结果
        3.3.4 PCR 产物直接转化酵母菌结果
    3.4 Blasticidin 抑菌浓度的测定结果
        3.4.1 Blasticidin 抑菌浓度的测定结果
        3.4.2 pYC6/CT-BADHⅠ质粒转化ΔADHⅠ酵母菌结果
        3.4.3 重组子 PCR 验证结果
    3.5 HDY-01 酵母、ΔADHⅠ酵母、BADHⅠ-ΔADHⅠ酵母酶活力测定结果
    3.6 遗传稳定性试验结果
        3.6.1 传代菌株抗性检测结果
        3.6.2 传代菌株 ADHⅠ酶活力测定结果
    3.7 发酵参数测定
        3.7.1 乙醛测定结果
        3.7.2 乙醇测定结果
        3.7.3 残糖测定结果
        3.7.4 悬浮酵母数测定结果
        3.7.5 双乙酰含量测定结果
        3.7.6 二甲基硫测定结果
        3.7.7 甲酸乙酯测定结果
        3.7.8 乙酸乙酯测定结果
        3.7.9 正丙醇测含量定结果
        3.7.10 异丁醇测定结果
        3.7.11 乙酸异戊酯测定结果
        3.7.12 异戊醇测定结果
第4章 讨论
    4.1 ADH 基因的克隆及重组质粒的构建
    4.2 实验所用的表达系统
        4.2.1 宿主细胞的选择
        4.2.2 表达载体的选择
        4.2.3 关于基因敲除技术在菌株改造上的讨论
    4.3 实验方法的讨论
        4.3.1 关于 ADH 基因的克隆
        4.3.2 关于表达宿主的构建
        4.3.3 关于基因敲除
    4.4 关于结果的讨论
        4.4.1 酶活力测定结果
        4.4.2 乙醇测定结果
        4.4.3 乙醛测定结果
        4.4.4 双乙酰测定结果
结论
参考文献
致谢

(6)带有ALDC基因的青岛啤酒酵母工程菌的研究(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 啤酒工业发展状况
    1.2 双乙酰的产生及其控制措施
        1.2.1 啤酒中双乙酰的产生
        1.2.2 优化酿造工艺,控制双乙酰
        1.2.3 低双乙酰产生酵母菌的选育
    1.3 α-乙酰乳酸脱羧酶与啤酒成熟
        1.3.1 α-乙酰乳酸脱羧酶的作用机制
        1.3.2 从分子生物学角度,降低啤酒中双乙酰的策略
    1.4 α-乙酰乳酸脱羧酶的安全性/基因工程菌的安全性
    1.5 α-乙酰乳酸脱羧酶在微生物中的分布
    1.6 α-乙酰乳酸脱羧酶的酶学及物理化学性质
    1.7 α-乙酰乳酸脱羧酶的氨基酸序列
    1.8 α-乙酰乳酸脱羧酶基因在细菌中的克隆与表达
    1.9 α-乙酰乳酸脱羧酶基因在酵母中的克隆与表达
        1.9.1 酵母菌的克隆系统
        1.9.2 外源基因在酵母中克隆和遗传选择性标记
        1.9.3 酵母克隆系统中的启动子
    1.10 α-乙酰乳酸脱羧酶的应用前景
        1.10.1 α-乙酰乳酸脱羧酶衍生物的制备和固定化
        1.10.2 α-乙酰乳酸脱羧酶的工业应用
        1.10.3 α-乙酰乳酸脱羧酶啤酒酵母工程菌的应用
    1.11 青岛啤酒酵母工程菌的构建
        1.11.1 材料与方法
        1.11.2 结果
        1.11.3 小结
    1.12 带有ALDC基因的青岛啤酒酵母工程菌的研究
第二章 青岛啤酒酵母工程菌的培养和发酵特性测定与筛选
    2.1 材料与方法
        2.1.1 菌株
        2.1.2 培养基
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 分析方法
        2.1.4.1 酵母细胞大小的测定
        2.1.4.2 酵母生长曲线的测定
        2.1.4.3 酵母死亡率的测定
        2.1.4.4 死灭温度的测定
        2.1.4.5 α-乙酰乳酸脱羧酶活性的测定
        2.1.4.6 凝聚性的测定(Helm法)
        2.1.4.7 酵母耐酒精度的测定
        2.1.4.8 酵母生长发酵的最适pH值
        2.1.4.9 发酵产酸的测定
        2.1.4.10 双乙酰及其前驱体的测定
        2.1.4.11 成品啤酒保质期强化实验
        2.1.4.12 酵母抗铜性测定
        2.1.5 实验方法
        2.1.5.1 菌体生长
        2.1.5.2 菌种的保存
        2.1.5.3 酵母菌形态观察
        2.1.5.4 α-氨基氮同化率
        2.1.5.5 酵母产酸实验
        2.1.5.6 发酵糖类实验
        2.1.5.7 同化碳源实验
        2.1.5.8 同化硝酸盐实验
        2.1.5.9 酵母发酵实验的方法
        2.1.5.10 遗传稳定性实验
        2.1.5.11 啤酒酵母工程菌的筛选
    2.2 结果与讨论
        2.2.1 麦芽汁培养基的分析结果
        2.2.2 啤酒酵母工程菌的双乙酰测定结果
        2.2.3 α-乙酰乳酸脱羧酶活性的测定结果
        2.2.4 啤酒酵母工程菌及受体菌细胞形态测定结果
        2.2.5 啤酒酵母工程菌抗性的测定结果
        2.2.6 啤酒酵母工程菌发酵度及酒精的测定结果
        2.2.7 酵母工程菌的发酵力测定结果
        2.2.8 酵母工程菌耐酒精度的测定结果
        2.2.9 酵母生长发酵的最适pH值
        2.2.10 酵母对α-氨基氮的同化结果
        2.2.11 酵母产酸测定结果
        2.2.12 发酵糖类测定结果
        2.2.13 同化糖类的测定结果
        2.2.14 啤酒酵母工程菌凝聚性的测定结果
        2.2.15 啤酒酵母工程菌遗传稳定性的测定结果
    2.3 筛选的初步结论
第三章 青岛啤酒酵母工程菌小试--EBC发酵管发酵实验
    3.1 EBC发酵管试验结果
        3.1.1 EBC发酵实验之1发酵度
        3.1.2 EBC发酵实验之2酵母细胞数的峰值
        3.1.3 EBC发酵实验之3双乙酰的峰值和还原值
        3.1.4 EBC发酵实验之4工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶活性测定
        3.1.5 EBC发酵实验之5工程菌风味物质的分析
        3.1.6 EBC发酵实验之6工程菌发酵糖类实验
        3.1.7 EBC发酵实验之7工程菌凝聚性的测定
    3.2 α-乙酰乳酸脱羧酶酵母工程菌小试结果
    3.3 小结
第四章 啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶酶学特征的研究
    4.1 啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶酶学特征的研究
        4.1.1 啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶活性的测定
        4.1.2 啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶酶学特征
        4.1.2.1 pH对啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶活性的影响
        4.1.2.2 温度对啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶活性的影响
        4.1.2.3 啤酒酵母工程菌α-乙酰乳酸脱羧酶的热稳定性
        4.1.2.4 工程菌的生长与α-乙酰乳酸脱羧酶的产生
    4.2 小结
第五章 啤酒酵母工程菌遗传稳定性的研究
    5.1 酵母工程菌抗铜性实验
        5.1.1 酵母工程菌抗铜性实验
        5.1.2 工程菌抗铜性传代稳定性实验
    5.2 酵母工程菌传代发酵稳定性实验
    5.3 啤酒酵母工程菌遗传稳定性实验
    5.4 小结
第六章 青岛啤酒酵母工程菌中试
    6.1 材料和方法
        6.1.1 材料
        6.1.2 菌株
        6.1.3 中试设备
        6.1.4 糖化工艺
        6.1.5 发酵工艺
        6.1.6 酵母扩培
    6.3 结果与讨论
        6.3.1 原料及酿造用水的分析
        6.3.2 中试麦汁分析
        6.3.3 发酵过程分析
        6.3.3.1 扩培酵母发酵过程分析
        6.3.3.2 一代酵母发酵过程分析
        6.3.3.3 二代酵母发酵过程分析
        6.3.3.4 三代酵母发酵过程分析
        6.3.3.5 四代酵母发酵过程分析
        6.3.3.6 五代酵母发酵过程分析
        6.3.3.7 六代酵母发酵过程分析
        6.3.3.8 七代酵母发酵过程分析
        6.3.4 风味物质分析
        6.3.5 工程菌连续发酵实验的对比结果
    6.4 小结
主要结论
参考文献
致谢
硕士研究生期间在科学技术期刊上发表的论文

(7)燃料酒精高产酵母菌株选育及应用研究(论文提纲范文)

文献综述
前言
1 材料与方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 酵母菌分离源
        1.1.2 试验菌种及来源
        1.1.3 培养基
        1.1.4 其它试剂及材料
        1.1.5 主要仪器设备
    1.2 方法
        1.2.1 酵母分离样品的采集
        1.2.2 酵母菌的分离
        1.2.3 酵母菌的筛选
        1.2.4 酵母菌的鉴定
        1.2.5 SP-48菌株生理特性研究
        1.2.6 SP-48菌株发酵工艺正交实验
        1.2.7 10升发酵罐发酵实验
2 结果与分析
    2.1 酵母菌的分离
    2.2 酵母菌的筛选
        2.2.1 酵母菌一级筛
        2.2.2 酵母菌二级筛
        2.2.3 酵母菌三级筛
    2.3 酵母菌的鉴定
        2.3.1 SP-48菌株的形态和培养特征
        2.3.2 生理生化试验
    2.4 SP-48生理性能的研究
        2.4.1 不同因素对生长曲线的影响研究
        2.4.2 不同因素对发酵曲线的影响研究
        2.4.3 SP-48的耐酒精、耐糖、耐盐及耐酸碱特性研究
        2.4.4 SP-48耐副产物特性研究
    2.5 SP-48酒精酿造工艺的研究
        2.5.1 α-淀粉酶用量试验
        2.5.2 酒精酿造最佳工艺试验
        2.5.3 10L发酵罐小试试验
3 讨论
    3.1 酵母菌筛选与鉴定
        3.1.1 酵母菌分离
        3.1.2 发酵基质选择与菌种分离
        3.1.3 酵母菌鉴定
    3.2 SP-48生理特性
        3.2.1 生长与发酵温度
        3.2.2 生长与发酵pH值
        3.2.3 代谢副产物对酵母抑制作用
    3.3 糖化与发酵工艺
        3.3.1 中温蒸煮糖化工艺与酒精发酵
        3.3.2 浓醪发酵工艺与酒精发酵
4 结论
5 参考文献
6 附录
7 英文摘要
8 致谢

四、利用遗传工程技术生产无酒精啤酒(论文参考文献)

  • [1]喷雾干燥葡萄酒粉的制备、性质及其对面包品质的影响[D]. 周婷. 扬州大学, 2021(04)
  • [2]特殊酵母发酵生产无醇啤酒的研究[D]. 刘杨. 山东农业大学, 2012(02)
  • [3]无醇啤酒新型生产方法的研究[D]. 赵文娟. 山东轻工业学院, 2007(01)
  • [4]低醇啤酒基因工程菌株的构建及其发酵参数的分析[D]. 孙宗祥. 黑龙江大学, 2007(03)
  • [5]无醇及低醇饮料的研制方法[J]. 李磊,谭淑娟,肖泽仪,武法文,徐志红,张志炳. 酿酒科技, 2005(03)
  • [6]带有ALDC基因的青岛啤酒酵母工程菌的研究[D]. 张沛. 江南大学, 2004(01)
  • [7]燃料酒精高产酵母菌株选育及应用研究[D]. 毛志群. 河北农业大学, 2003(03)
  • [8]高效膜分离技术在啤酒工业中的应用工艺[J]. 毛建卫,崔艳丽. 食品科学, 2002(09)
  • [9]利用遗传工程技术生产无酒精啤酒[J]. 陈晓虹. 科技信息, 2000(01)
  • [10]最后的补偿[J]. 丹尼尔·斯蒂,严忠志,欧阳亚丽. 译林, 1997(04)

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用基因工程生产无酒精啤酒
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